高存帥,劉煥奇,劉萌萌
(青島農業大學動物科技學院,山東 青島266109)
2011年夏天,山東省即墨市某豬場育肥豬相繼發病,發病率約為30%,死亡率20%。主要癥狀為呼吸困難,發熱,糞便干稀交替,后肢跗關節腫脹。綜合臨床癥狀、病理剖檢及實驗室診斷確診為豬瘟繼發副豬嗜血桿菌病,采取防治措施后有效控制了疫情的蔓延。
經場長介紹:該豬場存欄母豬40多頭,育肥豬300多頭,保育豬60頭,飼料為成品全價料,免疫譜為PR、HC、FMD、PCV-2及PRRS。2011年6月中旬開始發病,發病育肥豬均在60~100日齡,主要表現為精神沉郁,消瘦,發抖,體溫升高到41℃,呼吸困難,5d內陸續死亡50多頭,病豬多數出現糞干稀交替,后肢跗關節腫脹,耳朵發紫,個別臀部和后肢皮下有出血斑等癥狀。采用氨芐西林配合安乃近注射治療,癥狀緩解,2d后再次復發,多數病豬發病3~5d內死亡。母豬、保育豬及其他日齡育肥豬均未見發病。
發病初期,病豬精神沉郁,食欲廢絕,扎堆,體溫升高,呼吸困難,氣喘,消瘦;后來表現為眼分泌物增多,流鼻涕,糞便干稀交替,關節腫脹,尿液發黃,有的發紅,耳朵發紫及皮下有出血斑等癥狀;后期因呼吸衰竭死亡。
送檢4頭病死豬,剖檢表現為肺臟廣泛性出血,表面有纖維素性滲出物附著;心包與胸膜粘連,心包膜增厚,典型“絨毛心”;肝臟腫大,漿膜有纖維素性滲出物;脾臟腫大不明顯,邊緣有出血,紅色梗死灶;腎臟皮質底色蒼白,表面有散在針尖大出血點;腹腔內臟器官與腹膜粘連,小腸被纖維素滲出物粘連;腸系膜淋巴結腫大有出血,切面濕潤;膀胱有個別散在針尖狀出血點;關節腔積液增多。
4.1 HC、PRRS及PCV抗原檢測 無菌采集4頭送檢豬的血液,靜置一段時間后離心,取血清。提取核酸后,運用本實驗室建立的多重PCR方法檢測抗原。多重PCR擴增HC、PRRS及PCV抗原片段大小分別為800bp,263bp,402bp,結果4頭送檢豬均為HC陽性,PRRS陰性,PCV陰性(見圖1)。

圖1 多重PCR擴增
4.2 病料抹片鏡檢 取肺臟、肝臟、脾臟抹片,革蘭染色鏡檢。結果發現,肺臟內白細胞增多,可見大量兩極濃染的革蘭陰性短桿菌;肝臟細胞腫大,有少量革蘭陰性桿菌;脾內淋巴細胞增多,淋巴細胞腫大不明顯。
4.3 細菌分離培養及生化試驗 采集病死豬的肺臟、血液及肝臟等病料分別劃線接種于TSA培養基、兔鮮血瓊脂和巧克力瓊脂平板,置于CO2培養箱,37℃培養24~36h,觀察細菌生長。結果發現,在兔鮮血瓊脂平板上未見生長;巧克力瓊脂平板上生長緩慢;TSA培養基上生長較好,有灰白、光滑呈露珠樣的菌落。挑取菌落經革蘭染色鏡檢,細菌形態與組織病料抹片基本一致。
將分離菌株接種到微量生化鑒定管,37℃培養24h。結果為觸酶陽性,可分解葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖和麥芽糖;氧化酶、脲酶、鳥氨酸脫羧酶和吲哚試驗均為陰性;不能發酵甘露醇、木糖、乳糖。符合副豬嗜血桿菌生化特性。
4.4 藥敏試驗 挑取分離菌株接種TSA培養基上,采用紙片法進行藥敏試驗。結果顯示,該菌株對頭孢噻肟、頭孢噻呋、阿莫西林、慶大霉素高度敏感;氟苯尼考、氨芐西林、丁胺卡那霉素中度敏感;對恩諾沙星、環丙沙星、克林霉素不敏感。
對發病豬進行隔離,對病死豬無公害化處理。采用含氯消毒劑對豬舍和用具進行消毒,每天1~2次。加強通風,注意飼養密度。大群緊急接種豬瘟弱毒苗2頭份/只,飼料中添加電解多維提高大群豬的抵抗力。
發病豬肌肉注射頭孢噻肟鈉40mg/kg體重,慶大霉素20mg/kg體重,每天兩次,連用3~5d,重癥者最好采用耳靜脈注射;同時配合注射大劑量豬瘟弱毒苗20~30頭份,3d后再用1次,對于病程長無治療價值的病豬予以淘汰。
HCV主要通過呼吸道傳播,在扁桃體復制后傳遞到各級淋巴結,然后通過血液到達骨髓、臟器淋巴結和脾臟淋巴組織等,6d內完成在豬體內傳播。HCV在單核巨噬細胞和血管內皮細胞復制,雖不引起免疫抑制,但會引起B淋巴細胞、輔助T細胞和細胞毒性T細胞數量減少。干擾素是臨床上應用較多的廣譜抗病毒藥,對于細胞外的病毒有殺滅作用,但對于細胞內病毒無作用。外源性的干擾素半衰期短,需每天給藥1次且價格昂貴。臨床實踐證明,大劑量豬瘟疫苗可在豬體內誘導干擾素的形成,并可持續形成干擾素抵抗HCV的感染。對于HC病程較長的病例雖可勉強存活,但長期的病損導致育肥豬生長遲緩,應及早淘汰。副豬嗜血桿菌是一種條件致病菌,機體抵抗力下降往往導致發病,由于發病后豬體內大量的纖維蛋白滲出影響藥物到達病灶,導致療效不佳。因此,發病后應盡早大劑量注射抗生素,通常采用兩種抗生素合理配伍,重癥病例采用靜脈注射可有效提高治愈率。
在豬病橫行的今天,只有通過合理的飼養管理,改善豬的惡劣生存環境,及時做好各種疫病的預防才能有效避免和降低疫病的發生。該場雖接種過HC疫苗卻仍出現疫情,究其原因發人深省。