曲哲會,郭曉秋,劉 濤,李 健
(1.信陽農業高等專科學校動物科學系,河南 信陽464000;2.河南商城縣上石橋鎮農村經濟發展中心,河南 信陽465313)
豬瘟是由豬瘟病毒引起的豬一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病,是目前危害我國養豬業最嚴重的傳染病,盡管我國成功研制了最好的豬瘟疫苗,并且在豬瘟的防治方面發揮了積極作用,但目前豬瘟疫苗免疫效果卻往往不盡如人意,其中免疫程序不合理是主要原因。因此,我們應用3種免疫程序對不同規模豬場仔豬的免疫效果進行了監測,旨為不同規模豬場提供比較科學、合理的免疫程序,以提高豬瘟的防控水平。
1.1 檢測試劑盒 豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒,購自武漢科前動物生物制品有限責任公司。
1.2 儀器設備 微量移液器、酶標儀、洗板機、振蕩器、離心機、培養箱等。
1.3 疫苗 豬瘟兔化弱毒疫苗,由廣東永順生物制品廠生產。
2.1 免疫程序 選擇本地區常用的3種免疫程序,具體如下。
(1)免疫程序Ⅰ:仔豬0日齡,注射1頭份/頭,間隔2h后喂初乳,25日齡注射4頭份/頭,65日齡注射8頭份/頭。(2)免疫程序Ⅱ:25日齡注射4頭份/頭,65日齡注射8頭份/頭。(3)免疫程序Ⅲ:35日齡注射4頭份/頭,70日齡注射8頭份/頭。
2.2仔豬分組 所選擇的仔豬均為健康,無任何發病癥狀,在試驗過程中出現發病的仔豬的檢測數據均舍去。分別于仔豬0、20、35、50、80、120日齡和150日齡采血,分離血清,保存備用。根據規模大小分成4組,具體如下。
(1)A組:10~50頭母豬規模,選擇10個豬場,每個豬場選取同天生產的仔豬20頭,分別來自3窩以上,共200頭。分成3組,每組65~70頭。(2)B組:50~100頭母豬規模場,分組同A組。(3)C組:100~200頭母豬規模場,分組同A組。(4)D組:200頭母豬以上規模場,分組同A組。
2.3 抗體檢測 檢測方法為間接ELISA法,操作步驟按照試劑盒說明書進行。
結果判定:在酶標儀上測各孔OD630值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630值≥0.6,陰性對照孔平均OD630值必須<0.3。樣品OD630值>0.35,判為陽性;樣品 OD630值<0.35判為陰性。
3.1 3種免疫程序在A組應用效果分析 通過A組各階段抗體變化比較來看(見圖1和表1),免疫程序Ⅰ的效果明顯優于其他兩種,抗體量持續性增加,并且在20日齡時就可以提供較好的保護。而免疫程序Ⅱ和Ⅲ的免疫仔豬抗體量在35日齡前抗體水平都是比較低的,仔豬完全處于缺乏保護階段。之后3種免疫程序的抗體水平沒有明顯差異。因此,在A組中,免疫程序Ⅰ要優于免疫程序Ⅱ和Ⅲ。

3.2 3種免疫程序在B組應用效果分析 通過B組各階段抗體變化比較來看(見圖2和表2),按照免疫程序Ⅰ接種仔豬,能在20日齡時產生較高水平抗體;按照免疫程序Ⅱ接種的仔豬,雖然在20日齡抗體水平略下降,但經過25日齡的首免后,35日齡達到較高抗體水平;按照免疫程序Ⅲ接種的仔豬,在35日齡前的抗體水平在3種免疫程序中最低的,仔豬依然容易發生早期感染。之后3種免疫程序的抗體水平沒有明顯差異。因此,在B組中,免疫程序Ⅰ和Ⅱ都優于免疫程序Ⅲ。

表1 A組不同日齡仔豬豬瘟抗體水平檢測結果(OD630)

3.3 3種免疫程序在C組應用效果分析 通過C組各階段抗體變化比較來看(見圖3和表3),按照免疫程序Ⅰ接種仔豬,同樣能在20日齡時產生較高抗體水平;按照免疫程序Ⅱ接種的仔豬,雖然在20日齡抗體水平略下降,但經過25日齡的首免后,35日齡已經產生了較高水平抗體;按照免疫程序Ⅲ接種的仔豬,在35日齡前的抗體水平在3種免疫程序中最低的。之后3種免疫程序的抗體水平沒有明顯差異。因此,C組中免疫程序Ⅰ和Ⅱ都優于免疫程序Ⅲ。
3.4 3種免疫程序在D組應用效果分析 通過D組各階段抗體變化比較來看(見圖4和表4),免疫程序Ⅰ的抗體水平一直呈現穩步上升趨勢,同前3組一樣,免疫程序Ⅱ和Ⅲ的抗體水平在35日齡前均有明顯下降趨勢,35日齡后能迅速上升,之后3種免疫程序的抗體水平沒有明顯差異。但通過所測得的抗體量來看,即使在抗體量最低的免疫程序Ⅲ的35日齡,平均OD630值也達到了0.563 4,抗體量還是較高的。所以,由于該組仔豬體內母源抗體水平較高,免疫程序Ⅰ和Ⅱ的初免時間過早,受到母源抗體干擾較大,掌握不好就容易造成免疫失敗。

表2 B組不同日齡仔豬豬瘟抗體水平檢測結果(OD630)


養豬業一直是河南省畜牧業的支柱產業,是農村經濟的重要組成部分。但由于目前的養殖現狀是規模化豬場和中小型豬場并存,而且中小規模豬場仍占主體,大多數養殖戶還缺乏根據豬場定期的抗體水平監測結果確定最科學免疫程序的意識,主要依靠自身經驗,或照搬照抄他人程序,免疫程序混亂(如增加免疫密度、劑量、盲目超前免疫等),最終豬瘟仍沒有得到有效控制,造成一定的經濟損失,嚴重威脅養豬業的發展。因此,本試驗針對不同規模豬場的管理水平差異較大,通過3種常用免疫程序在各個規模豬場免疫結果的比較,旨在為不同規模豬場篩選出合理的、有針對性的免疫程序,以提高豬瘟的防控水平。

表3 C組不同日齡仔豬豬瘟抗體水平檢測結果(OD630)

表4 D組不同日齡仔豬豬瘟抗體水平檢測結果(OD630)
關于豬瘟疫苗免疫程序的報道較多,嚴平[1]報道,0日齡首免、35日齡二免、75日齡三免的免疫效果要好于20日齡首免、60日齡二免,超前免疫的效果要優于普通免疫的效果。根據本文中的各個規模豬場仔豬免疫的抗體水平變化來看,與其報道的一致,超前免疫效果優于其他兩種免疫程序,但在實際生產中發現,超前免疫的操作要求飼養員要有極強的責任心,否則很容易出現仔豬過早吃母乳而導致免疫失敗,而且200頭母豬規模以上豬場基本上都是由專業場長管理,各個環節比較科學、合理,仔豬獲得的母源抗體很高,相對更容易發生母源抗體干擾,不適合采用超前免疫。中小規模豬場,往往管理上存在很多問題,仔豬獲得母源抗體均較低(見圖1、2、3),如果不及時進行免疫,往往很容易發生豬瘟病毒的早期感染,從而造成哺乳期和保育期仔豬發病率和死亡率均高居不下,建議中小規模的豬場(特別是仔豬死亡較多的豬場)采用超前免疫,這與王世權[2]和朱巧云[3]報道是一致的。劉道新[4]等認為,仔豬20日齡首免、65日齡二免較符合豬瘟病毒抗體消長規律,既能減少母源抗體的影響,也能及時保護仔豬。本免疫程序Ⅱ在4個組中應用的監測結果證實,在絕大多數豬場仔豬25日齡時母源抗體水平已經很低,必須得通過人工被動免疫才能及時產生較高的抗體水平。
綜上所述,雖然豬瘟的免疫程序有多種,最合理的免疫程序應是每個豬場要根據自己豬場的實際情況(主要是豬瘟抗體水平變化規律),制定符合本場的免疫程序,并根據血清抗體監測結果及時修正,絕不能照搬照抄其他豬場的免疫程序。
[1]嚴平.不同免疫程序對豬瘟免疫效果的影響[J].河南畜牧獸醫,2007,28(5):20-21.
[2]王世權.不同豬瘟防疫程序對仔豬免疫效果的血清學檢測[J].河南畜牧獸醫,2000,21(8):25.
[3]朱巧云.豬瘟流行特點及綜合防治措施[J].現代農業科技,2009(13):340.
[4]劉道新,談志詳,胡擁軍.豬瘟免疫程序和不同企業生產的疫苗對豬瘟免疫效果影響的研究[J].中國動物檢疫,2004,21(8):27-28.