外用多慮平對燒傷創面致癢介質影響的實驗研究

易先鋒 盧根香 鐘偉湘 宋春紅 童鐘

外用多慮平對燒傷創面致癢介質影響的實驗研究

易先鋒 盧根香 鐘偉湘 宋春紅 童鐘

目的 研究多慮平外用制劑對家兔燒傷創面致癢介質的影響。方法 采用顯微計數尺計算肥大細胞數目，通過免疫組織化學技術檢測0.25%多慮平外用制劑應用在家兔燒傷創面及創面愈合后不同時間中組織組胺及5-羥色胺的含量。結果 用藥后家兔實驗組脫顆粒的肥大細胞數目明顯少于對照組(P＜0.01)。二組家兔深Ⅱ度燒傷創面及燒傷愈合后創面不同時間組織中組織胺及5-羥色胺含量實驗組與對照組比較明顯差異P＜0.01)。結論 0.25%多慮平外用制劑對家兔燒傷創面致癢介質有一定的影響，從燒傷創面早期就開始用藥物進行燒傷瘙癢的干預是一條可以考慮的方法。

動物實驗;燒傷創面;瘙癢;多慮平;干預

增生的瘢痕組織臨床上大都會有瘙癢的癥狀，瘢痕瘙癢的機制尚沒有完全清楚［1］。課題應用多慮平外用制劑在家兔燒傷創面上以了解該藥物對燒傷創面致癢介質的影響，為治療燒傷的瘙癢尋找一條可供選擇的途徑方面作一些探索。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

選健康成年家兔60只，體重3.0 kg～5.5 kg，雌雄不均，動物由南昌大學實驗動物中心提供，動物隨機分為實驗組和對照組。

1.2 燒傷動物模型

實驗組和對照組家兔應用1%戊巴比妥鈉(30 mg/kg)腹腔內注射麻醉，麻醉成功后用90℃的沸水燙傷家兔的背及雙側2 min造成1%(深Ⅱ度)面積燒傷模型。

1.3 材料和實驗方法

實驗組應用0.25%多慮平外用制劑，對照組應用0.9%生理鹽水。每天創面涂藥一次，二組家兔分別在有燒傷創面的第7天、第14天和第21天及創面愈合后的第1天、第14天和第28天取創面組織制作病理切片標本。采用顯微計數尺計數組織中脫顆粒的肥大細胞數目。運用熒光分光光度法測定組織胺及5-羥色胺含量。兔抗人5-羥色胺多克隆抗體由上海施萊德生物技術有限公司提供。兔抗人肥大細胞類胰蛋白酶單克隆抗體由美國Maixin公司提供。組織胺標準品由美國Sigma公司提供。

1.4 統計方法

2 結果

2.1 肥大細胞(MC)的表達及分布情況

采用顯微計數尺分別計數二組家兔深Ⅱ度燒傷創面和創面愈合后不同時間組織中脫顆粒的肥大細胞數目。結果顯示：用藥后實驗組脫顆粒的MC數目與對照組比較有差異性，實驗組脫顆粒的肥大細胞數目明顯少于對照組(P＜0.01)差異有統計學意義。見表1。

表1 燒傷創面及創面愈合后組織中脫顆粒的肥大細胞數目s，個/高倍視野)

表1 燒傷創面及創面愈合后組織中脫顆粒的肥大細胞數目s，個/高倍視野)

注：△P＜0.01，差異有統計學意義

組別 例數 燒傷創面 燒傷創面愈合后第7天 第14天 第21天 第1天 第14天 第28天實驗組 30 3.26±0.71 2.43±0.72 2.17±0.23 2.05±0.64 1.93±0.35 1.78±0.46對照組 30 6.72±0.83△ 5.44±0.72△ 4.37±0.52△ 4.35±0.43△ 4.29±0.42△ 4.17±0.33△

2.2 組織胺及5-色胺含量

熒光分光光度法測定深Ⅱ度燒傷創面及創面愈合后組織不同時間點組織胺及5-羥色胺含量.結果顯示：家兔從燒傷用藥第7、14、21天和創面合后第1、14、28天創面組織的組織胺及5-色胺量逐次下降與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.01)，見表2，3。

表2 燒傷創面及創面愈合后組織中組織胺含量± s，μg/g)

表2 燒傷創面及創面愈合后組織中組織胺含量± s，μg/g)

注：△P＜0.01，差異有統計學意義

組別 例數 燒傷創面 燒傷創面愈合后第7天 第14天 第21天 第1天 第14天 第28天實驗組 30 2.17±0.51 2.04±0.22 1.68±0.23 1.39±0.18 1.29±0.16 1.19±0.14對照組 30 4.28±0.51△ 4.13±0.32△ 3.75±0.24△ 3.67±0.19△ 3.29±0.15△ 2.15±0.17△

表3 燒傷創面及創面愈合后組織中5-羥色胺含量±s，μg/g)

表3 燒傷創面及創面愈合后組織中5-羥色胺含量±s，μg/g)

注：△P＜0.01，差異有統計學意義

組別 例數 燒傷創面 燒傷創面愈合后第7天 第14天 第21天 第1天 第14天 第28天實驗組 30 1.99±0.23 1.78±0.21 1.62±0.14 1.37±0.12 1.28±0.11 1.19±0.10對照組 30 4.19±0.59△ 4.08±0.38△ 3.46±0.20△ 3.27±0.12△ 3.19±0.13△ 2.67±0.11△

3 討論

瘙癢是皮膚疾病中最常見的癥狀，雖然皮膚瘙癢的發生機制還不十分明確［2］。但目前研究認為存在獨立的癢覺神經傳導通路，瘙癢感受器起源于真皮與表皮連接處的游離神經末梢，不同的癢覺感受器與來源不同的配體特異結合后，由外周無髓C纖維傳入信號至脊髓背側角的最淺層Lamina I脊髓丘腦束上行至丘腦，進一步投射至皮質區，傳遞沖動導致瘙癢［3］。誘導瘙癢的許多介質中組胺主要存在于肥大細胞內的異染性顆粒中，當它被釋放以后作用于H1受體引起瘙癢［4］。5-羥色胺所致瘙癢是通過中樞和外周化學感受器共同作用產生［5］。在外周它間接促使肥大細胞釋放組胺，而在中樞它通過類阿片物質神經遞質系統發揮致癢作用。

增生的瘢痕組織臨床上大都會有瘙癢的癥狀。針對這種瘢痕瘙癢臨床上采用多種方法進行治療，但治療效果均不能長久穩定，同時長時間口服這些抗瘢痕瘙癢藥物也會產生一定的副作用。現已證實多慮平可影響人類皮膚對組胺介導的反應，有益于臨床上組胺介導的反應調節，多慮平不僅是一種抗抑郁藥，還有重要的抗H1受體和抗H2受體的活性作用，0.25%多慮平外用制劑是較為有效的抗組胺皮膚止癢制劑［6］。

本課題選用多慮平外用制劑對家兔深Ⅱ度燒傷創面進行分組外用治療。采用顯微計數尺計算肥大細胞數目，通過免疫組織化學技術檢測0.25%多慮平外用制劑應用在家兔燒傷創面及創面愈合后不同時間中組織組胺及5-羥色胺的含量。結果顯示用藥后家兔實驗組脫顆粒的肥大細胞數目明顯少于對照組(P＜0.01)。二組家兔深Ⅱ°燒傷創面及燒傷愈合后創面不同時間組織中組織胺及5-羥色胺含量實驗組與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.01)，可能是因為多慮平外用制劑能夠穩定肥大細胞，減少肥大細胞脫粒，使組織胺及5-色胺與相應的受體結合加快導致含量下降。

4 結論

瘙癢的發病機制與多元致瘙癢因子有關，本研究應用多慮平外用制劑從家兔的燒傷創面早期就開始干預，從實驗的結果來看多慮平外用制劑能夠在一定程度上減少瘙癢介質組織胺及5-羥色胺含量，穩定肥大細胞。本研究中止癢的穩定效果還需要進一步觀察。但從燒傷創面早期就開始用藥物進行燒傷瘙癢的干預是一條可以考慮的途徑。

［1］焦婷，肖生祥.瘙癢的病理生理學和治療進展.中國皮膚性病學雜志，2004，18(10)：622-623.

［2］Heymann，Warren R.Journal of the American Academy of Dermatology，2006，54(4)：705-7061.

［3］倪春雅，劉玲玲，朱學駿.皮膚源性瘙癢發生機制的研究進展國際皮膚性病學雜志，2008，34(5)：321-323.

［4］Stander S，Steinhof M，Schmelz Metal Neurophysiology of pruri-tiscutaneous elicitation of itch.Arch Dermatol，2003，5(14)：63-70.

［5］Rees J，Murray CS.Itching for progress.Clinical ＆ Experimental Der-matology，2005，30(5)：471-473.

［6］Drake LA，FalIon JD，Sober A.Relief of pruritus in patients with a topic dermatitis after treatment with topical doxep incream.Journal of the American Academy of Dermatology，2004，3l(4)：613-616.

廣東省科技立項課題(項目編號：2010B031600251)

510440 廣東省工傷康復中心(易先鋒 鐘偉湘 宋春紅童鐘);廣東科學技術職業學院(盧根香)