生津藥和通絡藥對干燥綜合征大鼠免疫球蛋白影響的初步研究

王 丹 趙 浩

（1 上海中醫藥大學附屬岳陽中西醫結合醫院，上海 200437；2 上海光華中西醫結合醫院，上海 200052）

干燥綜合征（Sj?gren’s syndrome，SS）是一種常見的自身免疫性疾病，臨床主要表現為口干眼干，造成患者進食困難、欲哭無淚等情況，生活質量大為下降。目前西醫對該病早期缺乏行之有效的治療辦法，對中晚期患者常使用激素和免疫抑制劑治療，而這些藥物所帶來的副反應，又限制了臨床廣泛而長期的應用。

中醫根據SS臨床表現，將其歸屬于“燥證”、“燥痹”、“燥毒”等范疇[1,2]。確立了養陰生津、活血化瘀、清熱解毒等治療方法。從臨床觀察看[3]，上述方法均可有效的改善患者的口干眼干等臨床癥狀。本實驗采用養陰生津法、活血通絡法治療干燥綜合征模型鼠，通過觀察大鼠IgA、IgG、IgM的變化，初步探討養陰生津法、活血通絡法對干燥綜合征大鼠免疫球蛋白的影響，并比較兩種治療方法的差別。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選用SD大鼠，2周齡，（100±10）g，雌性，清潔級，購自上海中醫藥大學動物實驗中心。

1.2 藥物與試劑

養陰生津中藥（玄參、生地、麥冬等）、活血通絡中藥（當歸、丹參、莪術等）均按人與動物用藥量體表面積計算法換算大鼠用藥量，由上海中醫藥大學附屬岳陽中西醫結合醫院藥劑科制劑室制作分裝）。吸附無細胞百日咳、白喉、破傷風聯合疫苗，由上海生物研究所提供，批號：20090516-6；血清特異性抗體ELISA試劑盒（由上海玖梧實業有限公司提供）；弗氏完全佐劑、PBS緩沖液（由上海醫藥工業研究院提供）。

1.3 動物模型

參照文獻[4]，選用同種大鼠在超凈工作臺上解剖頸部，取出頜下腺，切碎，放入PBS緩沖液中，勻漿，再放入離心機，離心15min后，取上清液，用分光光度儀測定蛋白抗原含量。將蛋白與弗氏完全佐劑乳化，得到終濃度為0.75mg/ml的蛋白抗原。A、B、C、D組后腳掌皮下注射0.1mL乳化抗原，并于第1、7天在A、B、C、D各組大鼠腹腔注射稀釋后的百白破疫苗0.2mL，加強免疫。E組為正常對照，不做處理。

1.4 分組及給藥

將大鼠分為5組，每組10只，分別為養陰生津組（A）、活血通絡組（B）、強的松組（C）、生理鹽水組（D）及正常對照組（E）。A～D組經造模后，每日分別灌服養陰生津中藥、活血通絡中藥、強的松、生理鹽水，共給藥四周。E組為正常對照組，不做處理。

表1 給藥后各組大鼠的免疫球蛋白變化

1.5 統計學方法

使用SPSS17.0軟件包進行統計學分析，計量資料數據采用±s表示，各組間比較采用方差分析，以P＜0.05有統計學差異。

1.6 檢測指標

酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測IgA、IgG、IgM。

2 結 果

2.1 動物模型鑒定

取頜下腺進行HE染色，提示灶性淋巴細胞浸潤。見圖1。

圖1

2.2 各組免疫球蛋白變化情況

造模后大鼠的IgA、IgG、IgM水平均高于正常對照組，有統計學意義（P＜0.05）。藥物干預后，養陰生津法和活血通絡法均可降低模型鼠IgM水平（P＜0.05），效果優于強的松組（P＜0.05），但兩組中藥對比無顯著性差異（P＞0.05）；養陰生津法和活血通絡法可降低IgA、IgG水平（P＜0.05），但與強的松組比較無差異（P＞0.05）。見表1。

3 討 論

干燥綜合征臨床多表現為口干、眼干、鼻腔干等癥狀，常見舌質紅絳、舌面干燥、苔少舌裂，乃“陰虛水涸”之征。中醫尚無完全對應的病證，大多數醫家根據《內經》提出“諸澀枯涸，皆屬于燥”，將其歸屬“燥證”范疇，并根據肺脾腎與水液代謝關系，創立清燥救肺湯、沙參麥冬湯、增液湯等養陰增液的名方。多數醫家認為，干燥綜合征以陰虛為本，燥熱為標，日久津傷氣耗，津血虧乏，脈道失充，則血行滯澀；氣為血帥，氣虛血滯則瘀血內停。由此，因燥致瘀、因瘀致燥，形成惡性循環，導致本病纏綿難愈。現代研究現實，本病存在微循環障礙以及不同程度的血液濃、粘、凝、聚改變，并且已認識到血瘀證具有血液流變學、微循環、血流動力學、血管活性因子等多方面的異常[5]。

干燥綜合征的大多數患者均可出現免疫球蛋白增高，以往的研究表明[6]免疫球蛋白升高的患者其紫癜、腎小管酸中毒的發生率增高，高免疫球蛋白是觸發白細胞破碎性血管炎的重要因素之一。因此，對于干燥綜合征患者，降低異常的免疫球蛋白，可以減少內臟累及，控制病情進展。本研究采用佐劑誘導型SS大鼠模型[4]，造模后大鼠頜下腺HE染色顯示有淋巴細胞浸潤，免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平均顯著高于正常對照組，提示造模在唾液腺及血清免疫學方面均產生了類似人類的SS改變。養陰生津方是根據中醫“燥者濡之、潤之”的原則制定的方藥，以增液湯為基礎進行加味；而活血通絡方是根據中醫久病必瘀、久病入絡的病因病機而制定的。研究結果顯示，養陰生津中藥和活血通絡中藥均可降低模型大鼠的免疫球蛋白水平，與強的松功效相當，這為養陰生津法和活血通絡法治療干燥綜合征提供了實驗室依據。而相對于西藥而言，中藥具有良好的安全性和價格低廉等優勢，可長期而廣泛應用。按照中醫“治未病”理論，在干燥綜合征的早期就應該干預治療，防止疾病進一步進展，但目前畏于西藥的副反應，多數西醫主張有明確內臟累及的時候再進行用藥，這不符合《內經》“不治已病治未病，不治已亂治未亂”的理念。《靈樞?逆順》篇中謂：“上工刺其未生者也；其次，刺其未盛者也，……上工治未病，不治已病，此之謂也”，也是強調在疾病發作之先，把握時機，予以治療，從而達到“治未病”的目的。因此，在干燥綜合征的中早期，可以積極的使用中藥進行治療，來控制病情進展。實驗結果還顯示，兩組中藥在降低免疫球蛋白表達方面并無顯著性差異，從現代藥理學角度[7]，無論是以養陰生津為主的生地、麥冬，還是以活血通絡為主的當歸、丹參，均具有雙向免疫調節作用，提示我們在臨床即使是同一種疾病，也不可拘泥于一法。根據燥證的疾病進展特點，可以在不同階段分別采用養陰生津法或活血通絡法。

[1]曾小峰.干燥綜合征的臨床診治[J].實用老年醫學,2002,16(4):172-175.

[2]郝偉欣,董振華.干燥綜合征106例中醫證候分類回顧性研究[J].中醫雜志,2006,47(7):528-530.

[3]魏強華,傅紅衛. 清熱活血法與養陰生津法治療干燥綜合征的比較研究[J].中醫雜志,2006,47(7): 509-511.

[4]楊軍,楊彥春,肖林,等. 舍格倫綜合征動物模型的探討[J].臨床口腔醫學雜志,2007,23(1):17-18.

[5]周唯.陰虛血瘀證探析[J].山東中醫藥大學學報,2007,31(3):2.

[6]王秦,劉秀梅. 原發性干燥綜合征患者血清免疫球蛋白水平分析[J].山西醫藥雜志,2007,36(8):745.

[7]周世文,徐傳福.多糖的免疫藥理作用[J].中國生化藥物雜志,1994,15(2):143.