綿羊支原體病PCR快速診斷及治療

王玉茂 李峰 李書(shū)光 劉吉山 林初文 （山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院 256600）

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綿羊支原體病PCR快速診斷及治療

王玉茂 李峰 李書(shū)光 劉吉山 林初文 （山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院 256600）

綿羊支原體病又稱肺炎霉形體病是由肺炎支原體引起的一種高度接觸性傳染病，在世界各國(guó)分布甚廣。隨著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展，羊群的流動(dòng)性日趨活躍，在飼養(yǎng)模式、環(huán)境變化的多種應(yīng)激因素下，本病發(fā)病率急劇上升。臨床癥狀為咳嗽、氣喘、漸進(jìn)性消瘦及肺炎特征，發(fā)病率和死亡率很高。本單位羊場(chǎng)也相繼出現(xiàn)了5只病例。由于肺炎支原體培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間，形態(tài)小，不易染色，難做形態(tài)學(xué)鑒定，為此進(jìn)行PCR檢測(cè)，確診為綿羊支原體病。

1 主要臨床癥狀

病初體溫升高，隨之出現(xiàn)短而濕的咳嗽，鼻腔流出漿性鼻涕，呆立一處，不愿走動(dòng)。繼而氣喘、呼吸急促，嚴(yán)重者表現(xiàn)為連續(xù)性咳嗽，流出膿性鼻液。痛苦呻吟，眼瞼腫脹，流淚或有粘液性眼屎，有的腹瀉。肺部叩診呈濁音或?qū)嵰簦?tīng)診肺泡音減弱、消失或呈捻發(fā)音。多在一側(cè)出現(xiàn)胸膜肺炎變化，按壓胸壁表現(xiàn)敏感、疼痛。瀕死前體溫降到常溫一下，有的轉(zhuǎn)為慢性。

2 病理變化

皮下有膠樣變化，檢肺外觀腫大，以右肺尖葉為主的各肺葉實(shí)變是本病的特征性病變。多在肺的心葉、尖葉下緣，有的至隔葉、中間葉前緣有大小不等的肝變區(qū)，呈肉紅色。肝變部分與正常肺組織界限明顯，觸摸質(zhì)地稍發(fā)硬，顏色有紅至灰不等，切面呈大理石樣。部分病例胸水增多，呈淡黃色漿液或夾帶有灰白色纖維素碎片，胸膜粗糙無(wú)光澤，肺與胸膜之間有不同程度的粘連，粘連多見(jiàn)于尖葉和隔葉前緣，胸腔積液。

3 實(shí)驗(yàn)室PCR確診

PCR檢測(cè)結(jié)果如圖1所示，可見(jiàn)清晰的目的條帶。判定此次綿羊疾病為綿羊支原體病。

4 治療

應(yīng)用替米考星和阿奇霉素聯(lián)合用藥，阿奇霉素5~ 10mg/kg體重，肌肉注射；替米考星，10mg/kg體重，皮下注射，1次/d，連續(xù)注射3s。本場(chǎng)5只發(fā)病羊，除一只綿羊因后期衰竭治療不及時(shí)死亡外，其余4只痊愈。

圖1 支原體PCR檢測(cè)結(jié)果

M：DL2000；Y：Positive Control；C：Sample K：Blank

5 討論

5.1 化驗(yàn)室常用診斷方法的分析

5.1.1 病原分離法 該病的診斷一般采取病料(胸水和肺組織)樣品接種瓊脂平皿，再接種Hartley氏牛心湯分離培養(yǎng)。霉形體是一類(lèi)缺乏細(xì)胞壁的原核微生物，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求非常高，在特殊的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng)，而且生長(zhǎng)緩慢要求條件高，程序復(fù)雜，時(shí)間長(zhǎng)，易污染，不易分到。

5.1.2 血清學(xué)診斷方法 常用的方法有瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、玻片凝集試驗(yàn)和熒光抗體試驗(yàn)等。這些方法一般是做為群體的支原體普查。檢測(cè)的基礎(chǔ)是血液中的抗體，要求血液中的抗體必須達(dá)到一定的滴度才能檢測(cè)為陽(yáng)性，然而在感染的早期，病羊血液中還沒(méi)有產(chǎn)生抗體或抗體的水平很低，此時(shí)，檢測(cè)為陰性，因此，這些方法一般是用于檢測(cè)群體的抗體水平，疾病初期的診斷不適宜。

5.1.3 PCR診斷方法 本次采用PCR技術(shù)診斷本病，具有快速、省時(shí)、簡(jiǎn)便、特異性高、靈敏，及早準(zhǔn)確確定病原，為治療贏得時(shí)間，具有重要意義。

總之，PCR診斷本病，避免了化驗(yàn)室支原體分離的繁瑣和和血清學(xué)檢測(cè)方法的不足，簡(jiǎn)單易行，適應(yīng)于基層獸醫(yī)部門(mén)的快速診斷。

5.2 體會(huì)

（1）加強(qiáng)消毒管理。對(duì)羊舍和運(yùn)動(dòng)場(chǎng)地嚴(yán)格消毒，應(yīng)用次氯酸鈉或氫氧化鈉等消毒藥物。（2）注意治療中藥物的選擇和使用。支原體沒(méi)有細(xì)胞壁。像目前普遍適用的頭孢菌素類(lèi)和青霉素類(lèi)作用于細(xì)菌的細(xì)胞壁發(fā)揮殺菌作用的抗菌藥物，對(duì)支原體不發(fā)揮殺菌作用。所以優(yōu)先選擇通過(guò)抑制菌體蛋白的合成發(fā)揮殺菌作用的阿奇霉素，用于治療支原體感染，臨床效果較好。成年羊用量：5~10mg/kg體重，肌肉注射，1次/d，連用4d即可。與其他抗生素類(lèi)藥物相比較，其特點(diǎn)顯著。在大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素中，阿奇霉素對(duì)支原體的作用最強(qiáng)。在組織中的濃度比在血清中的濃度高10~100倍；在發(fā)病組織中特別是肺中，具有特異性聚集的性能。半衰期較長(zhǎng)，為2~3d，每天只需給藥1次即可。副作用較小。

為避免支原體的抗藥性，可同時(shí)使用大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素替米考星，10mg/kg體重，皮下注射，連續(xù)應(yīng)用3~5d效果更佳。

（2012–03–20）

S858.26

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1007-1733(2012)07-0056-02