康樂鼻炎片中馬來酸氯苯那敏的含量測定法

劉荷英，程奇珍，易路遙

(江西省食品藥品檢驗所，江西南昌330029)

康樂鼻炎片是衛生部藥品標準中藥成方制劑第十二冊收載的復方制劑，由蒼耳子、辛夷、白芷、馬來酸氯苯那敏等11味中西藥加工制成，用于外感風邪、膽經郁熱、脾胃濕熱而致的傷風鼻塞、鼻窒、鼻鼽、鼻淵。本文采用高效液相色譜法對馬來酸氯苯那敏的含量進行測定，方法專屬性好，準確度高，供試品溶液制備方法簡單，可有效對康樂鼻炎片進行質量控制。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(島津LC－2010型);紫外分光光度計(UV2401型);精密天子天平(Sartorius BP211D型)。

馬來酸氯苯那敏對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，含量99.7%，批號:100047－200606);康樂鼻炎片(每片含馬來酸氯苯那敏 0.66 mg，批號 100900，100901，100902，江西藥都仁和制藥有限公司提供);乙腈(色譜純);十二烷基硫酸鈉(分析純);磷酸(分析純)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性 色譜柱:Diamonsil C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm);流動相:乙腈 －0.5%十二烷基硫酸鈉(含0.1%磷酸)(50∶50);柱溫:25 ℃;流速:1.0 mL·min－1;進樣量:20 μL;檢測波長:262 nm。理論板數按氯苯那敏峰計算應不低于2 000，馬來酸氯苯那敏峰的分離度應符合要求。為了考察干擾組分的干擾情況，分別吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品色譜圖中，在與對照品色譜圖相同保留時間有相應的峰，陰性對照液無對應峰，結果見圖1。

圖1 對照品(A)、陰性樣品(B)及供試品(C)色譜圖

2.2 試驗溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 取馬來酸氯苯那敏對照品12.5 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品20片，除去糖衣，研細，取細粉約1 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加流動相40 mL，搖勻，超聲處理30 min，取出，放置至室溫，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 陰性溶液的制備 稱取1.0 g缺馬來酸氯苯那敏的樣品，同供試品溶液制備法制備。

2.3 線性關系 精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品12.80 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得0.255 2 mg·mL－1的對照品貯備液，分別精密吸取對照品貯備液 1、3、5、7、10 mL 置50 mL 量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，各精密吸取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積Y對進樣濃度C進行線性回歸分析，結果馬來酸氯苯那敏在進樣濃度為5.105 ～51.05 μg·mL－1范圍內呈良好線性關系，其線性回歸方程為:Y=18 274 C+577.59，r=1.000。

2.4 檢測限 在上述色譜條件下，取馬來酸氯苯那敏對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋，在信噪比約為3∶1，得馬來酸氯苯那敏檢測限為1.532 ng。

2.5 精密度試驗 對線性項下25.52 μg·mL－1的馬來酸氯苯那敏對照品溶液連續6次進樣分析，計算氯苯那敏峰面積的RSD值。結果RSD為0.1%，精密度良好。

2.6 重復性試驗 精密稱取供試品細粉(批號:100900)約1 g，共6份，置50 mL量瓶中，同供試品溶液制備法制備，結果RSD為0.6%，表明該方法的重復性良好。

2.7 回收率試驗 取供試品細粉(批號:100900)0.5 g，共6份，分別精密稱定，再精密加入馬來酸氯苯那敏對照品貯備液適量，照正文含量測定方法，測定峰面積，回收率結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

2.8 穩定性試驗 精密稱取供試品細粉(批號:100900)1.005 0 g，置50 mL量瓶中，同供試品溶液制備法制備，分別在 0、2.5、5、7.5、10、12.5 h 取供試品溶液進樣分析，結果峰面積RSD為0.5%。

2.9 耐用性試驗 分別用島津LC－2010和Agilent 1200高效液相色譜儀通過3根色譜柱(色譜柱1:Diamonsil C18，4.6 mm ×150 mm，5 μm;色譜柱 2:Diamonsil C18，4.6 mm × 250 mm，5 μm;色譜柱 3:Agilent C18，4.6 mm ×250 mm，5 μm)對馬來酸氯苯那敏對照品溶液及重復性樣品(共6份)進行測定，結果平均標示百分含量為81.3%，RSD為0.5%。

2.10 樣品測定 按正文擬定方法測定3批樣品中馬來酸氯苯那敏的標示百分含量，測定結果見表2。

表2 樣品測定結果

3 討論

康樂鼻炎片成分復雜，且氯苯那敏含量較低，測定時干擾物質較多，有文獻通過三氯甲烷多次提取來去除干擾［1］，此方法操作繁瑣，誤差大，故本文嘗試用有機溶劑直接超聲提取，試驗中考察了甲醇、流動相、50%無水乙醇和無水乙醇4種提取溶劑，結果氯苯那敏提取效果優劣次序為:流動相/50%無水乙醇＞甲醇＞無水乙醇，因文獻報道的50%無水乙醇提取［2］時溶液較為粘稠，不易濾過，故最終選擇流動相作為康樂鼻炎片馬來酸氯苯那敏的提取溶劑。考察了不同的供試品取樣量和超聲時間，結果在供試品取樣量為0.5 g、1.0 g和2.0 g時，超聲時間為15 min、30 min 和 45 min 時馬來酸氯苯那敏的提取效果基本一致。

試驗中曾考察了5種流動相體系，分別為:①原標準中流動相:甲醇－含1%三乙胺和0.005 mol·L－1庚烷磺酸鈉的0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調節 pH 至3.0)體系;②乙腈－磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫銨11.5 g，加水溶解，量取磷酸1 mL，加水稀釋至1 000 mL)體系;③乙腈－磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8 g，加1 mol·L－1氫氧化鈉15.2 mL，三乙胺 0.5 mL，用水稀釋至1 000 mL)體系;④乙腈－0.2%十二烷基硫酸鈉水溶液(含0.1%磷酸)體系;⑤乙腈－0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液(含0.1%磷酸)體系。結果發現在上述不使用離子對試劑的體系中，無論如何調節有機相與水相的比例，氯苯那敏與雜質峰均不能實現良好分離，增加十二烷基硫酸鈉離子對試劑濃度，可以使氯苯那敏在色譜柱上保留增強，從而更好地與雜質峰分離，以乙腈－0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液(含0.1%磷酸)(50∶50)為流動相時，氯苯那敏與雜質峰分離良好，峰形尖銳對稱，保留時間較短。

［1］蒙躍龍，李小安.HPLC法測定康樂鼻炎片中馬來酸氯苯那敏的含量［J］.現代中醫藥，2005，25(6):51 －52.

［2］譚正虹，郭栩豐，周小露，等.HPLC法測定康樂鼻炎片中馬來酸氯苯那敏的含量［J］.今日藥學，2008，18(3):32 －33，88.