大火草抗慢性前列腺炎作用研究

蘭保強(qiáng)，王 麗，劉 瑛，覃 良，鄧聿胤

(廣西中醫(yī)藥研究院，廣西南寧530022)

慢性前列腺炎是成年男性的常見病、多發(fā)病，約有50%的男性在一生中的某個時期會受其影響［1］，而且由于反復(fù)發(fā)作，容易引起一系列復(fù)雜的癥候群，出現(xiàn)精神抑郁及性功能障礙等癥狀，給患者造成極大的身心損害，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量［2］。壯藥大火草 Anemone tomentosa為毛茛科植物［3］，有清熱除濕，利尿通淋、益氣補(bǔ)腎的功效，民間用于治療慢性前列腺炎有較好的效果，為佐證其療效，更好地為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)，本文對其作了如下藥效學(xué)研究。

1 材料

1.1 藥品與試劑 大火草供試樣品為無輔料的浸膏粉，每克干膏粉相當(dāng)于生藥12.30 g，由本實驗室提取，臨用時用水配制成所需濃度供試驗用，試驗日給藥劑量用生藥表示(g·kg－1);阿司匹林，上海晶純試劑有限公司，批號:27383;地塞米松，浙江仙琚制藥股份有限公司，批號:100842;前列通片，廣州中一藥業(yè)有限公司，批號:P00054。

1.2 動物 健康成年Wistar大鼠，雄性，體重180～220 g;健康成年昆明種小白鼠，雄性，體重18～22 g，均由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。許可證號:SCXK桂2009－0002。飼養(yǎng)于20～25℃、相對濕度(60±10)%環(huán)境中，顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲水。

2 方法與結(jié)果

2.1 對小鼠耳廓腫脹的影響 將小鼠50只隨機(jī)分為模型組、阿司匹林組(0.2 g·kg－1)和大火草高、中、低劑量組(30、15、7.5 g·kg－1)，每組10 只，給藥組連續(xù)灌胃給藥 3 d，每日1次，給藥體積20 mL·kg－1，模型組予等量蒸餾水。末次給藥后1 h，每只小鼠右耳前后均勻涂布二甲苯0.05 mL，左耳作對照。涂藥60 min后，處死動物，用直徑6 mm的打孔器將雙耳同部位切下，AEL－200電子天平稱重。以左、右耳片質(zhì)量之差為腫脹度，采用方差分析法檢驗組間差異。結(jié)果:與模型組比較，大火草高劑量組和阿司匹林組小鼠耳廓腫脹程度均明顯減輕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，提示大火草高劑量具有抗炎作用，見表1。

表1 對小鼠耳廓腫脹的影響(±s)

表1 對小鼠耳廓腫脹的影響(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

組別 n 劑量(g·kg－1) 耳腫脹度(mg)模型組10 － 11.81 ±5.39阿司匹林 10 0.2 4.61 ±1.28＊＊大火草高劑量 10 30 5.97 ±3.57*大火草中劑量 10 15 8.65 ±5.57大火草低劑量10 7.5 9.90 ±3.88

2.2 對醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 將小鼠50只隨機(jī)分為模型組、地塞米松組(0.002 g·kg－1)和大火草高、中、低劑量組(30、15、7.5 g·kg－1)，每組 10 只，給藥組連續(xù)灌胃給藥3 d，每日1次，末次給藥后1 h，各組動物按0.1 mL/10 g體重尾靜脈注射1%伊文思蘭，同時腹腔注射0.9%醋酸0.2 mL/只。15 min后處死動物，用生理鹽水洗滌腹腔3次，并收集洗滌液，合并后用生理鹽水調(diào)整體積至10 mL，在600 nm波長下測定吸光度。結(jié)果:與模型組比較，大火草高劑量組和地塞米松組均能顯著降低光密度OD值，有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，提示大火草能夠顯著拮抗醋酸引起的毛細(xì)血管通透性增加，見表2。

表2 對醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(±s)

表2 對醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

組別 n 劑量(g·kg－1) 光密度OD值10 － 0.275 ±0.062地塞米松 10 0.002 0.085 ±0.044＊＊大火草高劑量 10 30 0.209 ±0.045*大火草中劑量 10 15 0.228 ±0.043大火草低劑量模型組10 7.5 0.225 ±0.100

2.3 對小鼠棉球肉芽腫的影響 將小鼠50只隨機(jī)分為模型組、地塞米松組(0.002 g·kg－1)和大火草高、中、低劑量組(30、15、7.5 g·kg－1)，每組 10 只。連續(xù)灌胃 3 d 后，于腋下植入一個10 mg無菌棉球.每日給藥1次，連續(xù)10 d。末次給藥24 h后處死動物，剝?nèi)∶耷蛉庋拷M織，置80℃烤箱中，烘干1.5 h后取出，稱重。采用方差分析法檢驗組間差異。結(jié)果:與模型組比較，大火草高劑量組和地塞米松組的肉芽重量明顯減輕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，提示大火草高劑量具有抗非特異性炎癥的作用，見表3。

表3 對小鼠棉球肉芽腫的影響(±s)

表3 對小鼠棉球肉芽腫的影響(±s)

注:與對照組比較，＊＊P ＜0.01

組別 n 劑量(g·kg－1) 肉芽重量(mg)模型組10 7.5 65.22 ±10.10 10 － 67.85 ±7.35地塞米松 10 0.002 52.97 ±5.56＊＊大火草高劑量 10 30 55.16 ±6.47＊＊大火草中劑量 10 15 61.60 ±6.82大火草低劑量

2.4 對大鼠非細(xì)菌性前列腺炎的影響 采用角叉菜膠致大鼠非細(xì)菌性前列腺炎法［4］，將大鼠60只隨機(jī)分為正常對照組、模型組、陽性藥前列通片組(0.70 g·kg－1)和大火草高、中、低劑量組(21、10.5、5.25 g·kg－1)，每組 10 只。各組大鼠連續(xù)灌胃給藥7 d，每日1次，正常對照組與模型組予等容量蒸餾水。末次給藥后30 min，將大鼠用乙醚麻醉，無菌條件下剖開腹腔，在每鼠前列腺內(nèi)注入滅菌的1.5%角叉菜膠0.05 mL，縫合切口，24 h后斷頭處死大鼠，取致炎前列腺組織50 mg加入200 mL白細(xì)胞稀釋液和200 mL生理鹽水中，充分混勻，鏡下記錄白細(xì)胞數(shù)和卵磷脂小體密度。結(jié)果:與正常對照組比較，模型組與其他組白細(xì)胞顯著升高，卵磷脂小體密度顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01);與模型組比較，大火草高、中劑量組和前列通片組的白細(xì)胞明顯減少，差異有顯著性(P＜0.05或P＜0.01)，大火草高劑量組和前列通片組的卵磷脂小體密度明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。提示大火草高劑量對大鼠非細(xì)菌性前列腺炎有明顯改善作用，見表4。

表4 各組前列腺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)及卵磷脂小體密度比較(±s)

表4 各組前列腺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)及卵磷脂小體密度比較(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P＜0.01;與模型組比較，▲P ＜0.05，▲▲P＜0.01

組別 n 劑量(g·kg－1)白細(xì)胞數(shù)(個·mg－1)卵磷脂小體密度(個·mg－1)10 － 49.23 ±15.96 313.16 ±67.79模型組 10 － 152.20±43.45＊＊ 101.09±37.37＊＊前列通片 10 0.70 69.04±22.17＊▲▲185.35±52.91＊＊▲▲大火草高劑量 10 21 80.01±35.35＊▲▲178.34±51.92＊＊▲▲大火草中劑量 10 10.5 106.56±40.50▲ 121.53±33.33＊＊大火草低劑量 10 5.25 128.36 ±19.86＊＊ 124.12 ±42.46正常對照＊＊

3 小結(jié)

慢性前列腺炎并非是一種獨立的疾病，此病屬于中醫(yī)學(xué)的“精濁”、“白淫”、“白濁”等范疇，多因濕熱留滯、瘀血阻絡(luò)、肝腎虧虛而成［5］。大火草針對此病機(jī)特點，行“清利濕熱，消濁通淋，活血化瘀”之功，使?jié)袢崆澹錾⒔j(luò)通，促進(jìn)腺管暢通。

本實驗研究結(jié)果顯示，大火草提取物灌胃給藥，高劑量對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹有明顯的抗炎抑制效果，能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的增加、抑制對小鼠棉球肉芽腫、抑制角叉菜膠所致大鼠非細(xì)菌性前列腺炎。提示大火草有明顯的抗前列腺炎作用，通過抑制炎癥早期的滲出性改變、抑制白細(xì)胞的增加、趨化和抑制炎癥晚期增生性改變，改善前列腺組織的慢性炎性病理改變等途徑來發(fā)揮抗炎作用，為該藥物的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了藥效學(xué)依據(jù)。

［1］Krieger JN，Riley DE，Cheah PY，et al.Epidemiology of prostatitis:new evidence for a world－wide problem［J］.World J Urol，2003，21(2):70 －74.

［2］李炎唐.前列腺炎與相關(guān)疾病.泌尿外科學(xué)［M］.濟(jì)南:山東科學(xué)技術(shù)出版社，1993.

［3］國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草［M］.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999:1768，3166.

［4］郝吉雪，郭進(jìn)，陳奇斌，等.前列安顆粒治療慢性前列腺炎的藥效學(xué)研究［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2008，17(8):1152－1155.

［5］詹慧春，曹長恩，郝春梅，等.前列腺炎中醫(yī)藥治療的臨床研究近況［J］.中醫(yī)藥信息，2001，18(5):22 －25.