HPLC法測定鹽酸奧洛他定片的有關物質

北京四環科寶制藥有限公司（100070）曹相林 陳婧 陳懷鑫

鹽酸奧洛他定片可用于過敏性鼻炎及蕁麻疹的治療，可改善皮膚病伴瘙癢癥狀[1]。鹽酸奧洛他定原料有關物質的測定方法在USP34中有收載，我們通過大量實驗建立了一種有效控制鹽酸奧洛他定片有關物質的方法，并將自擬方法和USP34方法進行對比分析。檢測數據顯示兩種方法均能對各已知雜質進行較好地分離檢測，對未知雜質的檢測，USP方法相比于自擬方法對有些未知降解產物影響較小，檢測出來的雜質個數也較自擬方法少，因此選用自擬方法作為鹽酸奧洛他定片的有關物質檢測方法，并申請了專利。

1 儀器與試藥

島津LCSolution高效液相色譜儀（日本島津公司）； CP225D型電子天平（德國賽多利斯公司）；鹽酸奧洛他定對照品（批號：101001）常州市亞邦醫藥研究所有限公司；雜質（E）-異構體（批號：070712）常州市亞邦醫藥研究所有限公司；雜質B（批號：FOJ016）USP藥典委員會；乙腈為色譜純，水為純化水，其余試劑均為分析純。

2 HPLC測定方法的建立與驗證

2.1色譜條件的建立 參考相關文獻，初步確定采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，并進行了如下篩選：①離子對試劑：本品的保留隨離子對試劑的濃度增加而增加，但20mmol/L以上時增加不明顯。②磷酸鹽：本品的保留隨磷酸鹽濃度的增加而增加，但20mmol/L以上時增加不明顯。③pH值：因成離子對，pH值為酸性，3.0與3.5無明顯差別。綜合上述研究，確立了本品的色譜條件。

2.2檢測波長的確定 將鹽酸奧洛他定對照品、起始原料及合成中間體溶于流動相進行紫外掃描，結果表明起始原料和中間體均在230nm和275nm處有較大吸收，鹽酸奧洛他定在298nm和212nm處有較大吸收，在275nm左右為最小吸收，因此最終選擇230nm作為檢測波長。

2.3靈敏度試驗 通過試驗確立了本品的最小檢測限為0.4ng，最小定量限為2ng。靈敏度符合要求。

附表1 有關物質色譜條件的對比

附表2 自擬方法和USP方法檢測數據對比

附表3 自制樣品與原研樣品的對比檢測

2.4輔料干擾試驗 經試驗驗證選用本HPLC測定方法，空白輔料不干擾樣品的雜質檢測。

2.5系統適用性 取鹽酸奧洛他定對照品、（E）-異構體和雜質B用流動相配制成各約含0.02mg/mL的混合溶液，作為系統適用性溶液，進樣檢測，（E）-異構體與鹽酸奧洛他定的分離度為7.7；雜質B與鹽酸奧洛他定的分離度為1.9。

2.6自擬方法與USP方法對比檢測 我們分別采用USP34方法和自擬方法檢測經強酸、高溫、強堿、光照破壞和氧化破壞的原料及制劑樣品，結果表明采用自擬方法檢測破壞試驗的樣品，所產生的雜質峰分離度能達到要求，輔料、空白溶劑峰無干擾。對USP34方法和自擬方法的檢測數據進行對比可知，兩種方法均能對各已知雜質進行較好地分離檢測，對未知雜質的檢測，USP方法相比于自擬方法對有些未知降解產物響應較小，檢測出來的雜質個數也較自擬方法少。USP方法和自擬方法的色譜條件見附表1，制劑樣品破壞試驗具體數據見附表2。

2.7耐用性 為考察測定條件發生細小變動時，測定結果的承受程度，我們考察了以下因素：色譜儀（島津SPD-M20A和安捷倫1260）、色譜柱品牌（Agilent和DIKMA）。

取本品研細的粉末適量（約相當于含鹽酸奧洛他定5mg），精密稱定，加流動相配制成1mL中含鹽酸奧洛他定200μg的溶液，過濾，取續濾液作為供試品溶液，按測定法檢測，結果表明：色譜儀和色譜柱等有小的變動時，對檢測結果無明顯影響。

2.8自制樣品與原研樣品的對比檢測 取3批自制樣品與協和發酵麒麟株式會社富士工廠生產的原研制劑，采用修訂后的有關物質檢查方法進行對比檢測，數據見附表3。結果表明，三批自制樣品的雜質水平優于原研制劑。

3 討論

本文通過進行流動相的篩選、檢測波長的確定、靈敏度試驗、輔料干擾試驗、系統適用性、耐用性、破壞試驗及與美國藥典方法的對比檢測等相關研究，建立了鹽酸奧洛他定片的有關物質測定方法，經驗證該方法靈敏度高，快速準確，重現性好，輔料不干擾檢測，各雜質的分離度能達到要求，且對本品未知雜質的檢出能力優于美國藥典方法。本方法可以很好地控制鹽酸奧洛他定片的質量。