降鈣素原協(xié)同C-反應(yīng)蛋白和白介素-6檢測對新生兒細菌感染的診斷價值

陳巧紅 葛 勤 陳珊珊

廣東省深圳市鹽田區(qū)鹽港醫(yī)院檢驗科，廣東深圳 518083

在早產(chǎn)兒和新生兒期，細菌感染是引起嬰兒死亡的主要原因。目前各大醫(yī)院采用的相關(guān)實驗室指標(biāo)，如血細胞計數(shù)、C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、血清淀粉樣蛋白 A、降鈣素原（procalcitonin，PCT）以及 TNF-α、IL-6 等是輔助診斷新生兒細菌感染（neonatal bacterial infection，NBI）的重要指標(biāo)[1]。為了增加對NBI的敏感性和陰性預(yù)測值，多種指標(biāo)聯(lián)合檢測經(jīng)常被采用。CRP是最早用來輔助診斷NBI的標(biāo)記物之一，和其他指標(biāo)（如白細胞計數(shù)、未成熟與總中性粒細胞）相比，CRP具有更大的參考價值。除此之外，IL-6和IL-8也常被采用[2-3]。PCT是近年研究非常熱門的生物學(xué)標(biāo)記物，僅需獲取0.3 mL血液即可檢測，因此非常適用于新生兒。有研究顯示，新生兒出生18～30 h和非感染的早產(chǎn)兒體內(nèi)PCT均增高，在分娩后48 h內(nèi)，PCT均處于動態(tài)變化當(dāng)中，且與感染與否無關(guān)[4-5]，此后，嬰兒體內(nèi)PCT水平趨于恒定[6-7]。PCT在診斷NBI中的價值依然存在爭議，因此，本研究旨在探討常規(guī)檢測CRP和IL-6后聯(lián)合PCT能否進一步提高對NBI的診斷水平。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2008年2月～2009年12月我院兒科收治的出生后4 d疑為細菌感染的新生兒108例為研究對象。患兒均有不同程度的臨床癥狀或體征，如體溫異常（肛溫＜36.5℃或＞38℃）、喂養(yǎng)不耐受（嘔吐或胃殘留量 ＞20%喂養(yǎng)總體積）、心血管功能異常（如心率＜80次/min、持續(xù)心動過速、毛細血管充盈＞2 s、動脈壓過低）、呼吸功能障礙（新發(fā)或加重的窒息或氣促和/或需氧量增加）等。本研究開展之前與患兒家屬簽署知情同意書，所有操作均符合我市相關(guān)部門倫理委員會標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測內(nèi)容 所有疑為NBI的患兒，均密切觀察其臨床癥狀和體征，并及時獲取血液標(biāo)本用于PCT、CRP和IL-6檢測以及細菌培養(yǎng)。NBI的確診根據(jù)血液、腦脊液、尿液、咽拭子細菌培養(yǎng)或影像學(xué)檢查加以證實。血液、腦脊液、尿液細菌培養(yǎng)陽性判定為細菌感染。

1.2.2 PCT、CRP和 IL-6檢測 PCT檢測操作按照德國BRAHMS公司提供的酶聯(lián)免疫法定量試劑盒操作進行，檢測下限為 0.09 μg/L，＜ 0.46 μg/L 的變異系數(shù)＜ 5.5%，＜ 0.25 μg/L的變異系數(shù)＜7.5%。CRP定量檢測采用顆粒增強免疫透射比濁法在全自動生化分析儀上測定，試劑購自寧波美康生物科技有限公司，檢測下限為1.1 mg/L。IL-6采用ELISA檢測，試劑盒購自加拿大YES生物技術(shù)有限公司，按照試劑盒操作流程由專人完成檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，CRP、PCT和IL-6等指標(biāo)采用中位數(shù)（M）表示，組間比較采用秩和檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。同時，計算CRP、IL-6、PCT以及聯(lián)合檢測時的特異性、敏感性、陽性預(yù)測值（positive predictive value，PPV），陰性預(yù)測值（negative predictive value，NPV），并根據(jù)接受者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）計算 PCT 的臨界值。

2 結(jié)果

2.1 患兒各實驗室指標(biāo)檢測情況

108例可疑患兒當(dāng)中，最終確診NBI 38例，非感染患兒70例。各實驗室檢測指標(biāo)如表1所示，NBI患兒與未感染患兒相比，CRP、IL-6和PCT水平顯著增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜ 0.01）。

表1 NBI患兒與非感染患兒實驗室指標(biāo)檢測情況（M）

2.2 各指標(biāo)敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值情況

單獨PCT檢測的敏感性和特異性分別為80.1%和74.8%，PPV為64.2%，NPV為88.5%，其敏感性高于單獨CRP和IL-6檢測，但特異性較低。CRP聯(lián)合IL-6檢測敏感性為91.7%，特異性為79.9%，PPV為70.8%，NPV為 93.9%，而PCT、CRP和IL-6三者對NBI的敏感性為98.5%，特異性為66.7%，PPV和NPV分別為58.5%和98.8%。見表2。

表2 各標(biāo)記物單獨或聯(lián)合應(yīng)用檢測NBI的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值情況（%）

2.3 PCT的接受者工作特征曲線分析

根據(jù)ROC顯示，當(dāng)PCT達到最高敏感性和特異性時，其臨界值為0.84 μg/L；根據(jù)此臨界值，得出敏感性為98.2%，特異性為66.4%，PPV為61.0%，NPV為98.6%。

3 討論

在診斷NBI時，呼吸暫停和心動過緩是兩個重要的臨床診斷指標(biāo)，但在部分非感染患兒當(dāng)中，也具有類似的敏感性。因此，這種非特異性臨床癥狀的出現(xiàn)，很難判斷新生兒是否感染。PCT在診斷NBI時的應(yīng)用價值一直存在爭議，這主要是由于在新生兒出生后3 d內(nèi)其生理性變異很大[4-5]。因此，為了避免干擾，本研究選擇了出生4 d后新生兒為研究對象。本研究旨在探討對NBI而言，除了IL-6和CRP之外，額外的PCT檢測能否進一步提高NBI感染診斷的準(zhǔn)確性。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IL-6、CRP和PCT聯(lián)合檢測后，對NBI檢測的敏感性和NPV幾乎接近100%。

迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)理想的感染性標(biāo)記物具有足夠的敏感性和特異性來指導(dǎo)兒科醫(yī)生使用抗生素。但從本文研究結(jié)果來看，聯(lián)合檢測PCT、IL-6和CRP可能具有重要的指導(dǎo)意義。PCT、IL-6和CRP的動力學(xué)不同，與CRP相比，PCT出現(xiàn)更早、更快，但比IL-6出現(xiàn)晚，峰值更寬，消退更慢。事實上，聯(lián)合檢測PCT后，對NBI的診斷敏感性從91.7%增加到98.5%，NPV從93.9%增加到98.8%。對于新生兒而言，尤其是早產(chǎn)兒，往往是細菌感染的高發(fā)人群，因此聯(lián)合PCT后，敏感性的增高對及時治療感染患兒具有重要意義。PCT聯(lián)合CRP和IL-6檢測后，NPV也進一步增高，因此有利于及時停止經(jīng)驗性治療所使用的抗生素，這對于新生兒而言具有非常重要的意義，因為有研究顯示隨著抗生素使用時間的延長，壞死性小腸結(jié)腸炎的風(fēng)險也大大增加。另一方面，與IL-6和CRP相比，聯(lián)合PCT檢測特異性和PPV有所降低，因此，對于為了降低耐藥菌的出現(xiàn)而停止使用抗生素的行為，本研究并無指導(dǎo)意義。但對于新生兒高危人群和那些為了追求高敏感性而非特異性，且緊急情況的疾病而言，可能仍有一定的價值。

診斷NBI的另一個重要方面是定義指標(biāo)的臨界值。臨界值的定義直接影響到指標(biāo)的敏感性、特異性、NPV以及PPV。有報道顯示，正常情況下PCT臨界值在0.5～1.0 μg/L之間，但也有研究顯示將其定義為2.0 μg/L或7.0 μg/L[8-9]。在本研究的最初，筆者將PCT臨界值定義為0.7 μg/L，但在計算PCT最高敏感性和特異性時，其閾值為0.85 μg/L。因此，在臨床工作時，必須根據(jù)實際需要調(diào)整PCT臨界值以防止NBI的漏診。

綜上所述，在檢測CRP和IL-6的基礎(chǔ)上，另外對PCT的濃度加以檢測，是早期診斷NBI的有益補充。由于三者聯(lián)合檢測的敏感性接近100%，因此，在高危新生兒人群中，對避免假陰性的診斷具有重要意義。此外，高NPV也能為臨床醫(yī)生停止使用抗生素提供參考。

[1]Laborada G，Rego M，Jain A，et al.Diagnostic value of cytokines and C-reactive protein in the first 24 hours of neonatal sepsis[J].Am J Perinatol，2003，20（8）：491-501.

[2]Kocabas E，Sarikcioglu A，Aksaray N，et al.Role of procalcitonin，C-reactive protein， interleukin-6，interleukin-8 and tumor necrosis factoralpha in the diagnosis of neonatal sepsis[J].Turk J Pediatr，2007，49（1）：7-20.

[3]Kurt AN，Aygun AD，Godekmerdan A，et al.Serum IL-1beta，IL-6，IL-8，and TNF-alpha levels in early diagnosis and management of neonatal sepsis[J].Mediators Inflamm，2007，31： 397.

[4]Turner D，Hammerman C，Rudensky B，et al.Procalcitonin in preterm infants during the first few days of life：introducing an age related nomogram[J].Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed，2006，91（4）：283-286.

[5]呼新建，常曉悅.降鈣素原的研究進展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2010，16（12）：1795-1797.

[6]馮震，鄧歷.降鈣素原在感染性疾病中的臨床應(yīng)用[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2010，8（20）：185.

[7]董暉，楊穎.血清降鈣素原水平檢測在感染性疾病診斷中的價值[J].醫(yī)學(xué)綜述，2010，16（11）：1741-1742.

[8]Ballot DE，Perovic O，Galpin J，et al.Serum procalcitonin as an early marker of neonatal sepsis[J].Safr Med J，2004，94（10）：851-854.

[9]Turner D，Hammerman C，Rudensky B，et al.Procalcitonin in preterm infants during the first few days of life：introducing an age related nomogram[J].Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed，2006，91（4）：283-286.