2型糖尿病患者血清對(duì)氧磷酯酶1活性與肥胖的相關(guān)性分析

楊 慧 姜 海 譚子新 尚 可 孫亞威

1.河北省邯鄲市第一醫(yī)院門診部，河北邯鄲 056002；2.河北省邯鄲市第一醫(yī)院內(nèi)分泌二科，河北邯鄲 056002；3.河北工程大學(xué)醫(yī)學(xué)院病生教研室，河北邯鄲 056002

2型糖尿病（T2DM）與動(dòng)脈粥樣硬化性疾病密切相關(guān)，而肥胖是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的重要危險(xiǎn)因素，血清對(duì)氧磷酯酶（PON1）可能在肥胖相關(guān)的動(dòng)脈粥樣硬化疾病中起重要作用，本文主要研究T2DM肥胖患者血清PON1活性的變化，以探討T2DM患者血清PON1活性與肥胖的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇T2DM患者（參照1999年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)）76例，排除急慢性感染、惡性腫瘤及其他內(nèi)分泌疾病，肝功能正常。采用2002年2月WHO重新確定的西太地區(qū)肥胖標(biāo)準(zhǔn)將病例組分為：T2DM非肥胖組（體重指數(shù)BMI＜25 kg/m2）33例，T2DM肥胖組（體重指數(shù)BMI≥25 kg/m2）50例。 對(duì)照組（NC組）來(lái)自健康體檢者（體重指數(shù)BMI＜25 kg/m2），共36例。

1.2 研究方法

記錄患者及對(duì)照組的一般資料，測(cè)量血壓、體重、身高、腰圍（WC），計(jì)算BMI；晚餐后禁食次日清晨抽血全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定空腹血糖（FPG）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）顯著正相關(guān)，與高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）；以對(duì)氧磷為底物測(cè)定PON1活性。用血清10 μL、對(duì)氧磷應(yīng)用液0.4 mL、甘氨酸緩沖液1.2 mL、0.1 MEDTA在25℃分別配制對(duì)照管和PON1活性管。準(zhǔn)備完畢后于5 mL比色杯中，412 μm波長(zhǎng)處，以水為參比，讀取吸光度A值。由光密度換算為活性單位。PON1活性管A1與對(duì)照管A0差值查標(biāo)準(zhǔn)曲線得血清PON1活性單位。酶活性在0～1 600單位范圍內(nèi)與吸光度值呈線性。以每分鐘每升血清水解生成對(duì)硝基酚1 μmoL為1個(gè)國(guó)際單位（U/L）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件完成。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用方差分析，多組間兩兩比較采用LSD法，相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 三組血壓、血脂、血糖、對(duì)氧磷酯酶1比較（±s）

表2 三組血壓、血脂、血糖、對(duì)氧磷酯酶1比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，*P ＜ 0.05，**P ＜ 0.01；與 T2DM 非肥胖組比較，▲P ＜ 0.05，▲▲P ＜ 0.01

組別 SBP（mm Hg） DBP（mm Hg） TG（mmol/L）TC（mmol/L） LDL-C（mmol/L） HDL-C（mmol/L） FPG（mmol/L） PON1（U/L）對(duì)照組T2DM非肥胖組T2DM肥胖組123.03±10.17 130.18±12.82*134.40±14.16**73.75±7.50 79.79±7.56**84.66±10.74*73.75±7.50 79.79±7.56**84.66±10.74**4.79±0.93 5.43±0.64**5.84±1.33**2.88±0.61 3.47±0.74**3.76±0.54**▲1.15±0.22 1.00±0.16**0.89±0.16**▲4.98±0.56 7.42±2.79**8.32±2.50**▲▲4.98±0.56 7.42±2.79**8.32±2.50**▲▲

2 結(jié)果

2.1 三組基本資料比較

T2DM肥胖組的BMI、WC高于對(duì)照組和T2DM非肥胖組，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

表1 三組基本資料比較（±s）

表1 三組基本資料比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01；與T2DM非肥胖組比較，▲P＜0.01

組別 例數(shù) 男/女 年齡（歲） BMI（kg/m2） WC（cm）對(duì)照組T2DM非肥胖組T2DM肥胖組36 33 50 20/16 18/15 28/22 53.14±12.94 54.37±13.31 54.70±11.61 22.84±2.61 22.88±1.90 26.73±2.46*▲77.67±5.49 79.97±6.27 93.08±6.66*▲

2.2 三組血壓、血脂、血糖、對(duì)氧磷酯酶1比較

T2DM 肥胖組和 T2DM 非肥胖組的 SBP、DBP、FPG、TG、TC、LDL-C均明顯高于對(duì)照組，HDL-C低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）；T2DM肥胖組FPG、TG、LDL-C高于T2DM非肥胖組，和HDL-C低于T2DM非肥胖組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。T2DM肥胖組PON1顯著低于對(duì)照組，同時(shí)也低于T2DM非肥胖組，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；T2DM非肥胖組PON1明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 Pearson相關(guān)分析

Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，PON1與 BMI（r= －0.348，P ＜0.01）、WC（r= －0.397，P ＜ 0.01）、SBP（r= －0.274，P ＜ 0.01）、DBP（r= －0.287，P ＜ 0.01）、FPG（r= －0.375，P ＜ 0.01）、TG（r= －0.267，P ＜ 0.05）、TC（r= －0.226，P ＜ 0.01）、LDL-C（r= －0.289，P ＜ 0.01）呈負(fù)相關(guān)，與 HDL-C（r=0.253，P ＜ 0.01）呈正相關(guān)。

3 討論

PON1是一類鈣離子依賴的與高密度脂蛋白相關(guān)性芳香酯酶，PON1與高密度脂蛋白（HDL）緊密結(jié)合，通過(guò)水解脂質(zhì)過(guò)氧化物，保護(hù)HDL與LDL免受氧化修飾[1]。同時(shí)，PON1能破壞輕度氧化的LDL，從而保護(hù)動(dòng)脈壁細(xì)胞免受炎癥反應(yīng)的損傷，具有抗動(dòng)脈粥樣硬化形成和心血管保護(hù)作用[2]。本研究顯示T2DM患者PON1活性較對(duì)照組降低，與T2DM時(shí)患者長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)有關(guān)，長(zhǎng)期高血糖導(dǎo)致血中糖基化水平較高，PON1與HDL結(jié)合部位被不斷糖基化修飾，必然影響該位點(diǎn)的構(gòu)型，進(jìn)而降低PON1活性，使T2DM患者具有較高的動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)性。

肥胖是動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、糖尿病、高脂血癥、代謝綜合征的主要危險(xiǎn)因素，單純肥胖患者即有高TC、高TG和LDL、低HDL。有研究顯示，單純肥胖患者PON1活性已出現(xiàn)下降[3]，而肥胖T2DM患者同時(shí)存在糖代謝、脂代謝紊亂，本研究顯示PON1活性在肥胖T2DM患者降低更為明顯，且PON1活性與BMI、血脂相關(guān)，表明多重代謝紊亂并存對(duì)PON1活性影響更為嚴(yán)重。HDL可以防止LDL被氧化，減少黏附分子表達(dá)，從而防止動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，而在這一過(guò)程中，PON1起著關(guān)鍵的作用。同時(shí)PON1還能破壞ox-LDL中的溶血磷脂，通過(guò)減少溶血磷脂的量以降低其細(xì)胞毒性作用。LDL氧化修飾是早期動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)鍵，在動(dòng)脈粥樣硬化患者中可以觀察到ox-LDL增加，且與動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程相關(guān)。PON1活性下降時(shí)ox-LDL的增多可直接抑制一氧化氮合酶，使一氧化氮合成減少，這會(huì)使動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞抗血小板聚集的能力下降，從而使血小板活化增強(qiáng)，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞易形成附壁血栓，使肥胖T2DM患者具有更高的動(dòng)脈粥樣硬化風(fēng)險(xiǎn)。因此，有研究認(rèn)為PON1活性降低可能是一個(gè)預(yù)示動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展的抗氧化的參數(shù)[4]，并且PON1可能會(huì)成為藥物治療動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的最好的監(jiān)測(cè)靶標(biāo)分子[5]。

綜上所述，糖代謝及脂代謝紊亂導(dǎo)致PON1活性下降，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生，肥胖T2DM患者具有更高的動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)性，能否通過(guò)提高PON1活性來(lái)改善脂代謝異常、動(dòng)脈血管硬化有待今后進(jìn)一步研究。

[1]Topcuoglu A，Uzun H，Aydin S，et al.The effect of hormone replacement therapy on oxidized low density lipoprotein levels and paraoxonase activity in postmenopausal women[J].Tohoku J Exp Med，2005，205（1）：79-86.

[2]Mackness B，Mackness M.Anti-inflammatory properties of paraoxonase-1 in atherosclerosis[J].Adv Exp Med Biol，2010，660（3）：143-151.

[3]Mehmet Aslan，Mehmet Horoz，Tevfik Sabuncu，et al.Serum paraoxonase enzyme activity and oxidative stress in obese subjects[J].Pol Arch Med Wewn，2011，121（6）：181-186.

[4]Adnan BA，Ahmet C，Türkay O，et al.The relationship between paraoxonase-1 activity and coronary artery disease in patients with metabolic syndrome[J].Arch Turk Soc Cardiol，2011，39（5）：371-377.

[5]Soran H，Younis NN，Charlton Menys V，et al.Variation in paraoxonase-1 activity and athero-sclerosis[J].Curr Opin Lipidol，2009，20（4）：265-274.