化學發光法與酶聯免疫吸附法檢測血清抗結核抗體的比較研究

陽幼榮 吳雪瓊 張俊仙 梁 艷 王 蘭

解放軍第309醫院全軍結核病研究所 軍隊結核病防治重點實驗室，北京 100091

據全國第五次結核病流行病學抽樣調查結果顯示，目前我國結核病疫情仍非常嚴重，每年新發病例約為130萬，占全球發病總數的14.3%[1]。結核分枝桿菌在感染并增殖的過程中會激活人體的免疫系統，使機體產生相應的抗體，因此，檢測血清中特異性抗體水平可反應受檢者感染情況[2]。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是應用最為廣泛的一種血清學檢測手段[3-5]，但由于普通ELISA法普遍采用TMB進行顯色，其檢測靈敏度一般在“ng”水平，對于特異性抗體水平低的血清標本檢測效果不佳。理論上說，采用更為靈敏的化學發光檢測方法會提高檢測的靈敏度。為比較化學發光免疫分析（chemiluminescence immunoassay，CLIA）與ELISA法對結核病輔助診斷效果，本文以360例不同來源的血清作為檢測對象對兩種不同的試劑盒進行對比評價，比較二者在結核病實驗室檢測中的檢測效果情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料

健康人血清標本來自于本院2011年8～9月經體檢無疾病的健康人群，共100例；活動性肺結核患者血清標本來源為本院結核科2011年5～9月經過臨床確診并住院患者的首次采血血清標本，共260例。

1.2 檢測儀器

恒溫孵育箱、DM-3全自動洗板機、KPS-KM型微孔板發光分析儀。

1.3 檢測試劑及方法

化學發光法檢測試劑盒和酶聯免疫法檢測試劑盒分別由北京科美東雅生物技術有限公司和北京萬泰生物藥業股份有限公司提供。檢測操作嚴格按試劑盒說明書進行。

1.4 統計學方法

應用SPSS 10.0統計學軟件進行數據分析，計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

兩種試劑盒對血清標本的檢測結果見表1。由表1可見，活動性肺結核組中，化學發光檢測試劑盒的陽性符合率為 71.2%（185/260），ELISA檢測試劑盒的陽性符合率為58.5%（152/260），兩者差異有統計學意義（χ2=9.18，P ＜ 0.05）；健康人群組檢測中，兩者的陰性符合率分別為89.0%（89/100）和 93.0%（93/100），差異無統計學意義（χ2=0.98， P ＞ 0.05）。

3 討論

結核分枝桿菌感染人體后，機體內會產生針對結核分枝桿菌的抗體，利用血清學方法檢測體內抗結核抗體是發現結核病的有效手段。膠金體法雖具有操作簡便、快速、成本低廉等優點，但其靈敏度較低，只適用于定性檢測。經典酶聯免疫吸附試驗（ELISA）應用范圍較為廣泛，還可用于半定量檢測，但對于低抗體水平標本表現欠佳。化學發光法對于標本的檢測限達到了0.06 ng/mL[6]靈敏度，遠高于傳統ELISA法1 ng/mL的靈敏度，該方法在其他疾病檢測領域己見相關報道，且具有較高的靈敏度[7-8]，但國內尚未見其用于結核抗體檢測方面的報道。由于發學發光法檢測靈敏度高，本試驗中應用CLIA法檢測試劑盒檢測活動性肺結核患者血清中抗結核抗體的陽性標本檢出率顯著高于普通ELISA法，對于普通ELISA法檢測中的“灰區”部分可進行有效區分，達到提高靈敏度的目的，且CLIA法在明顯提升陽性標本檢出率的同時，假陽性率升高不明顯。在本實驗中CLIA法檢測試劑盒較普通ELISA法檢測試劑盒在陽性檢出率提高了12.69%的同時，假陽性發生率只提高了4.0%，提示其適合用于結核病的實驗室檢測。

表1 兩種試劑盒檢測血清標本中抗結核抗體情況

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