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(1.浙江大學動物科學學院,浙江杭州 310058;2.嘉興市畜牧獸醫局,浙江嘉興 314050)
目前,豬瘟(HC)、口蹄疫(FMD)、豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)仍是威脅養豬業最嚴重的傳染病,為國家規定強制免疫的生豬病種[1]。按照傳統免疫程序,一般采用首免注射豬繁殖與呼吸綜合征疫苗,7~10 d后注射豬瘟、口蹄疫疫苗,2個月后二免。這種程序比較復雜,特別是反復捕捉和注射,造成人力浪費,而且會對豬只造成很大應激反應,免疫效果不佳。為提高免疫工作效率和HC、FMD、PRRS三種疫苗同時分點免疫的免疫效果,特進行本試驗。
1.1試驗動物 試驗在嘉興市某自繁自養規模豬場進行,該豬場常年存欄母豬300頭,經檢測供試仔豬均為HC、FMD、PRRS抗體陰性。
1.2試驗疫苗 HC活疫苗(細胞苗,由杭州薦量生物藥廠生產,批號201004108);FMD油乳劑滅活苗(中牧蘭州生物藥廠生產,批號201101002);PRRS油乳劑滅活疫苗(由中牧公司生產,批號201006002)。
1.3檢測試劑 HC和FMD O型正向血凝抗原檢測試劑和稀釋劑均由中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產(批號分別為20110515和20110520),PRRS抗體檢測ELISA試劑盒由法國LSI公司生產(批號2-VETPRA-008)。
1.4檢測方法 采用正向間接血凝試驗和ELISA[2-3]。
1.5安全試驗 隨機選擇健康狀況良好、飼養條件一致、體重15~25 kg斷奶仔豬20頭,分為A、B兩組,每組10頭,A組注射HC、FMD和PRRS疫苗,B組注射HC、FMD疫苗。嚴格按疫苗說明書操作,注苗后每1 h測量一次體溫,共測3~4次,同時觀察注射局部的反應和全身反應。供試疫苗均順利通過安全試驗。
1.6試驗設計
試驗一:選擇日齡相近、飼養條件一致,健康狀況良好的斷奶仔豬150頭,分成A、B、C三組,每組50頭。A組按照傳統免疫程序注射HC和FMD疫苗;B組按照傳統的免疫程序分別注射HC、FMD、PRRS疫苗;C組按照同時分點注射HC、FMD、PRRS疫苗,具體免疫程序詳見表1。
免疫注射后20~30 d采集血液分離血清,進行抗體檢測。HCV、FMDV抗體用正向間接血凝試驗法檢測;PRRSV抗體用ELISA法檢測(PRRSV抗體效價≥1∶32,HCV抗體效價≥1∶32為免疫合格,ELISA法合格率見試劑盒說明書)。
試驗二:豬場PRRSV感染情況監測:隨機選擇3頭未經PRRS疫苗免疫母豬所產仔豬15頭(日齡為50日齡)進行PRRSV感染情況檢測。

表1 仔豬接種不同疫苗的免疫程序
1.7飼養管理 按試驗設計,各組單獨一圈,隔離飼養。飼養管理程序按常規進行,臨床觀察記錄不同試驗時期試驗豬群的母豬繁殖障礙(返情、流產、早產、死胎、木乃伊)和仔豬成活、死亡、淘汰等情況。
2.1試驗期間各組試驗豬只均未見明顯免疫副作用 該項結果與相關文獻報道[4-5]基本一致。
2.2試驗A組、B組50~60日齡HC、FMD 2種疫苗同時免疫后28 d豬瘟抗體檢測結果 詳見表2。

表2 HC疫苗二免后28 d抗體檢測結果
由表2可見,HC二免后28 d,免疫注射過FMD疫苗的B組HC抗體水平明顯高于A組(未注射PRRS疫苗的豬瘟抗體水平),免疫抗體的合格率達到90.0%,與A組(合格率24.0%)相比,差異顯著(P<0.05)。
2.3C組HC、FMD、PRRS三種疫苗同時分點免疫后的抗體檢測結果 詳見表3、表4、表5。

表3 三種疫苗同時分點免疫后HCV抗體檢測結果
由表3可見,C組HC、FMD、PRRS三種疫苗同時分點注射后,對HC抗體水平未見明顯抑制作用,首免20 d后抗體合格率達到68.0%,平均抗體滴度為25.4,二免28 d后抗體合格率達到91.7%,平均抗體滴度為28.9,具有良好的免疫保護作用。

表4 三種疫苗同時分點免疫后FMDV抗體水平
由表4可見,HC、FMD、PRRS三種疫苗同時分點注射后,對FMDV抗體水平未見明顯抑制作用,首免20 d后抗體合格率達到80.0%,平均抗體滴度為27.2,二免28 d后抗體合格率達到81.3%,平均抗體滴度為28.0,具有良好的免疫保護作用。

表5 三種疫苗同時分點免疫后PRRSV抗體水平檢測結果
由表5可見,C組豬的PRRS母源抗體陽性率為16.0%,經PRRS首免、二免后的抗體陽性率雖略有提高,分別為26.0%和31.3%,但抗體水平仍然不高。通過跟蹤觀察,該批仔豬均未出現PRRS臨床癥狀。
2.4豬場PRRSV感染情況監測結果 詳見表6。

表6 豬場PRRSV感染情況
由表6可見,經ELISA檢測,隨機選擇3頭未經PRRS疫苗免疫母豬所產仔豬15頭,經PRRSV感染情況檢測,PRRS陽性率達到60.0%。
2.5免疫前后PRRS發病情況比較 根據豬場2008~2011年的連續跟蹤調查,進行HC、FMD、PRRS三種疫苗同時分點免疫后,乳豬PRRS發病率由2008年的18.7%降至2009年0.4%,2010年和2011年則未見發病;斷奶仔豬發病率則由2008年的21.8%降至2009年的1.5%和2010年的0.7%,死亡率由原來的17.2%降至2009年的0.9%和2010年的0.2%,2011年則未見發病死亡。PRRS得到了有效控制(詳見表7)。

表7 三種疫苗免疫前后PRRS發病情況調查
3.1經本次試驗,HC、FMD、PRRS三種疫苗同時分點免疫注射后,未見產生相互間的抑制和干擾作用。仔豬30~35日齡、60~65日齡兩次同時接種PRRS、HC、FMD三種疫苗,抗體檢測均超過免疫合格水平,表明三種疫苗同時分點免疫注射是可行的,這與國內其他相關報道基本一致[6]。
3.2本次試驗PRRS母源抗體陽性率達到16.0%,說明該豬場還存在隱性感染情況,總體抗體陽性率普遍較低,原因可能與目前采用的PRRS抗體檢測ELISA試劑盒只對豬血清中抗PRRSV的N蛋白敏感有關。且不能定性定量檢測PRRS免疫抗體,故檢測方法有待進一步改進[7]。
3.3PRRS感染豬對呼吸系統和淋巴系統影響較大[8,9],對HC等疫苗的免疫效果可產生抑制作用,可能引起HC免疫失敗情況。從試驗情況看,已感染PRRSV的仔豬,不接種PRRS疫苗,HC二免后28 d,平均抗體水平為22.8,只有24.0%的仔豬免疫抗體滴度達到有效免疫保護水平;而接種PRRS疫苗,HC二免后28 d,平均抗體水平為27.5,仔豬免疫抗體滴度超過有效免疫保護水平,HC免疫抗體合格率達90.0%。
3.4檢測結果顯示,HC和FMD二免后抗體水平普遍高于一免后抗體水平,并能達到國家規定的群體合格率在70%以上的要求。因此,HC和FMD嚴格實施二次免疫能有效提高機體的抵抗力,防止重大疫病發生。
3.5在實際生產中,原來三種疫苗分別免疫注射,必須多次抓豬給豬只造成反復應激;本試驗采用三種疫苗同時分點免疫,省工省力,可減少不良應激。根據相關文獻報道,已有部分地區將此種免疫程序運用到生產實踐,效果良好[10-11]。
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