E—cadherin、Ki—67在乳腺髓樣癌中表達及臨床病理意義研究

[摘要]目的 探討E-cadherin、Ki-67在乳腺髓樣癌中表達及臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學方法檢測42例乳腺髓樣癌中E-cadherin、Ki-67的表達。結果 E-cadherin和Ki-67蛋白表達陽性率在乳腺髓樣癌中表達分別為81%（34/42）和76.2%（32/42）。E-cadherin表達陽性率與淋巴結轉移呈顯著相關（P<0.05），而與患者年齡、腫瘤大小及是否遠處轉移無關（P>0.05）；Ki-67表達及陽性程度隨著病理組織學分級、淋巴結轉移而增加。結論 E-cadherin和Ki-67蛋白的表達差異是影響乳腺髓樣癌預后的重要原因。

[關鍵詞] 乳腺髓樣癌；E-cadherin；Ki-67；臨床病理特征

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）19-123-03

乳腺癌中髓樣癌較為少見，據統計，髓樣癌占全部乳腺癌的2.25%～5%[1]，取決于診斷的嚴格程度。本研究通過免疫組織化學的方法檢測乳腺髓樣癌中E-cadherin、Ki-67蛋白的表達結合臨床病理特征，探討兩者的表達與乳腺髓樣癌臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集南昌市第三醫院2010～2013年收治的42例乳腺髓樣癌標本，這些標本均經手術切除，有完整的臨床病理資料。病例全部為女性，年齡30～69歲。患者術前未接受任何治療。

1.2 實驗方法

乳腺癌標本均經10%中性福爾馬林固定，常規石蠟包埋組織，切片厚度3μm，連續切片裱片于用多聚賴氨酸處理的玻片上，60℃烘烤4h備用。免疫組化標記采用EnVision二步法：常規石蠟切片脫蠟至水，高壓鍋抗原修復，每張切片滴加1滴3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10min，以消除內源性過氧化物酶；每張切片滴加1滴E-cadherin、Ki-67抗體，37℃孵育60min ，每張切片滴加1滴二抗，室溫孵育30min，DAB顯色，蘇木素復染，脫水，透明，封片。E-cadherin、Ki-67試劑盒均購自北京中杉金橋有限公司，用已知的陽性片作為陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判定

結果判定根據陽性細胞所占比例及著色強度，綜合制定免疫組化半定量計分標準。陽性細胞計分<10%，0分；11～25%，1分；26～50%，2分；51～75%，3分；>75%，4分。著色強度計分：弱，1分；中，2分；強，3分。兩個分值相加為最終判定結果：≤2分（-）；3分（+）；4～5分（++）；6～7分（+++）[2]。

1.4 統計學處理

應用SPSS16.0統計軟件進行數據處理，E-cadherin、Ki-67表達在研究對象組間的差異性采用x2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 臨床病理資料

發病年齡：患者發病年齡為30～69歲；發病部位為左乳19例，右乳23例。腫瘤大小分別為≤2cm 13例，2～5cm 25例，≥5cm 4例。臨床分期分別為Ⅰ期+Ⅱ期23例，Ⅲ期+Ⅳ期19例。腋下淋巴結轉移為率為19%（8/42）。組

織學分級為2級19例，3級23例。

2.2 鏡檢

乳腺髓樣癌組織學特征：（1）合體細胞結構在腫瘤組織中所占比例>75%，瘤細胞呈片狀分布，厚度常超過4或5個細胞，被少量疏松結締組織分隔，有時可見灶狀壞死和鱗狀上皮化生；（2）全部腫瘤組織均不具有腺樣或小管樣結構；（3）間質中彌漫的淋巴漿細胞浸潤為其顯著特點，但淋巴漿細胞密度在不同病例有所差別；單核細胞缺乏或顯著，可以掩蓋癌細胞，有時可見淋巴濾泡和（或）上皮樣肉芽腫形成；（4）癌細胞常呈圓形、胞質豐富，泡狀核，有1個或數個核仁；核多形性中度到顯著，核級屬于2或3級，核分裂多見，有時可見非典型巨細胞；（5）低倍鏡下，更容易觀察到腫瘤組織的完整邊界；腫瘤邊界呈推擠狀，在腫瘤外圍有清楚的纖維帶[3]。

2.3 E-cadherin、Ki-67在腫瘤組織中的表達及與臨床病理特征的關系

E-cadherin和Ki-67蛋白表達陽性率在乳腺髓樣癌中表達分別為81%（34/42）和76.2%（32/42）。見表1。E-cadherin蛋白表達陽性率與淋巴結轉移呈顯著相關（P<0.05），而與患者年齡、腫瘤大小及是否遠處轉移無關（P>0.05）；Ki-67表達率及陽性程度隨著病理組織學分級、淋巴結轉移而增加。E-cadherin和Ki-67蛋白免疫組化染色結果見圖1和圖2。

3 討論

髓樣癌是乳腺癌中的一種特殊類型，在2003版WHO腫瘤組織學分類中，當腫瘤的鏡下特征不能診斷為髓樣癌，但是當腫瘤有顯著的合體細胞特征和其他2項或3項標準時，通常被診斷為非典型髓樣癌。一般認為髓樣癌比常見的浸潤性導管癌預后要好[4-5]，但也有人對此質疑[6-7]。髓樣癌10年生存率報道結果為從50%到超過90%不等，其中有多方面的原因，其中重要的一點就是納入病例標準不一致。

上皮鈣依賴黏附素是一類依賴于鈣離子的細胞表面糖蛋白，主要參與同種細胞間的連接，分布于各種上皮組織中，對維持上皮細胞間的形態和組織以及完整性起著重要的作用，其編碼基因位于16q22～q23.1[8]。它的高表達使腫瘤呈膨脹性生長，瘤細胞之間保持密切的接觸，使腫瘤組織難以脫離原發病灶而侵入周圍的組織和血管，因此能起到抑制腫瘤細胞的侵襲及轉移的作用，所以預后相對較好。本實驗中，乳腺典型髓樣癌的E-cadherin與淋巴結的轉移率呈負相關，有淋巴結轉移者E-cadherin表達陽性率降低，提示E-cadherin表達陽性者淋巴結發生轉移的幾率降低，可以作為提示預后判斷的指標之一。

Ki-67位于10號染色體上，由相對分子量345kD和395kD的2條多肽鏈組成的核蛋白。除G0、G1早期以外的細胞周期中，Ki-67蛋白均可表達，在G2和M期表達最強，

在有絲分裂后期迅速降解或失去其抗原性，在日常工作及實驗中它被認為是能夠比較全面反映細胞群體增殖活性的較可靠的客觀指標之一。其陽性表達是細胞增殖活性的重要標記，常用來反映腫瘤細胞的增殖活性。本研究中，Ki-67表達陽性率及陽性程度隨著腫瘤病理組織學分級、淋巴結轉移而增加，與國內文獻報道一致，說明乳腺癌腫瘤細胞的增殖與腫瘤細胞分化和淋巴道轉移密切相關；Ki-67的高表達可能是導致乳腺癌生物學特性的重要原因之一。病理組織學分級和淋巴結轉移是評估病情嚴重程度、制定患者的治療方案、客觀評價療效以及幫助判斷預后的重要因素。Ki-67在乳腺癌中的高表達也說明乳腺癌患者進展更快、侵襲性更強、預后更差。因此，Ki-67的檢測已逐漸被作為反映腫瘤細胞增殖速度和提示腫瘤預后判斷的較好的生物學標記。

總的來說，典型髓樣癌有較好的預后，前提是診斷標準的嚴格把握，如何較好的鑒別髓樣癌和非典型髓樣癌，以便更準確的判斷預后，還需要資料的不斷積累。

[參考文獻]

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（收稿日期：2013-07-04）