接塵工人血清中人表皮生長因子受體3抗體的表達水平

晉曉飛，郝長付，姚 武

(鄭州大學公共衛生學院勞動衛生與職業病學教研室 河南鄭州 450001)

接塵工人血清中人表皮生長因子受體3抗體的表達水平

晉曉飛，郝長付，姚 武

(鄭州大學公共衛生學院勞動衛生與職業病學教研室 河南鄭州 450001)

目的:觀察人表皮生長因子受體3抗體在接塵工人血清內的表達水平及其與塵肺病的關系。方法:采集159例接塵工人和85例健康對照者的外周靜脈血，應用雙位點夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清中HER3-Ab的含量。結果:健康對照組血清HER3抗體含量為(1.29±1.83)mg/L，接塵工齡＜5年組和≥5年組人群血清HER3抗體含量分別為(3.72±7.17)mg/L和(9.96±21.86)mg/L，各組間人群血漿HER3-Ab的差異有統計學意義(P＜0.05)。結論:自身免疫抗體HER3-Ab的表達水平與接塵有關。

塵肺;抗體:人表皮生長因子受體3抗體

塵肺病是由生產性粉塵引起的肺組織彌漫纖維化為主的全身性疾病，長期以來我國已采取了大量措施來預防、控制生產性粉塵的危害，并取得了一定的成效，但塵肺病目前仍是我國職業病中發病率最高、死亡率較大、對勞動者危害最嚴重的一類［1］。塵肺病所致的肺纖維化是一個長期慢性的過程，目前尚無將其消除或是逆轉的根治方法，只能根據病情進行綜合醫治以減輕癥狀、延緩病情的進展。積極預防并盡早的診斷對于提高病人的生存質量及延長壽命尤為重要［2］。矽肺的發病機制目前雖尚無明確定論，為了認清塵肺病的發生發展和演進過程，國內外已有學者提出了多種研究策略［3］。早在六七十年代，有研究者已著手塵肺與機體免疫方面的研究，發現塵肺病患者體內存在多種免疫異常，其以不同的方式參與了粉塵與機體的相互作用，而且矽肺患者機體內存在自身抗體，即發生了自身免疫反應［4，5］。人表皮生長因子受體3(HER3)抗體在胃癌、口腔癌、前列腺癌、乳腺癌等腫瘤中常與 HER2一起出現過度表達［6，7］，參與自身免疫反應，但在肺纖維化方面的研究目前還很少。因此本研究對159名接塵人員和85名非接塵人員的血清的HER3-Ab含量進行了檢測，探討其與塵肺病的關系。

1 材料與方法

1.1 研究對象 中國平煤神馬集團體檢的、正在接塵的159例男性煤礦工人，年齡20～55歲，平均年齡(34.03±8.30)歲，均為掘進車間井工，接塵工齡1～38年，接塵工齡中位數為5年。根據接塵工齡分為兩組:接塵年限 ＜5年組年齡20～44歲，平均年齡為(29.14±5.688)歲，平均年限為(1.81±0.935)年;接塵年限≥5年組年齡22～55歲，平均年齡為(38.86±7.625)歲，平均年限為(13.35±9.736)。對照組:同期體檢的男性崗前人群85例，無粉塵接觸職業史，均排除心、腦、肝、腎等臟器的纖維化疾病以及免疫性疾病，年齡19 ～40歲，平均年齡為(27.52±4.95)歲。

1.2 樣品采集 全部研究對象取清晨空腹靜脈血2 ml，靜置 30 min后，離心分離血清(1000 r/min，10 min)，置－20℃保存待用。

1.3 血清HER3-Ab的檢測 采用雙位點夾心酶聯免疫吸附法即ELISA法，測定血清自身免疫抗體HER3-Ab的含量，人血清自身免疫抗體HER3-Ab試劑盒由安迪生物科技(上海)有限公司生產，分析儀器為TECAN SUNR ISE REMOTE型酶標儀。操作均嚴格按照說明書進行，質量控制和定標結果均在要求范圍內。

1.4 統計方法 采用SPSS 12.0統計軟件包對數據進行統計學處理，計數數據以(中位數±四分位數間距)表示，進行秩和檢驗，計量數據以四格表形式表示，進行 χ2檢驗，檢驗水準為 α=0.05。

2 結果

2.1 不同組別人群血漿中HER3-Ab抗體濃度的比較 接塵組人群按接塵時間進行分組，由于接塵中位時間為5年，所以分為≥5年組和＜5年組。表1可見，各組間人群血漿HER3抗體濃度的差異有統計學意義(P＜0.05)。兩兩比較可發現，＜5年組人群血漿HER3抗體濃度高于對照組，且差異有統計學意義(P＜0.017);≥5年組人群抗體濃度也高于對照組，且差異有統計學意義(P＜0.017);≥5年組人群血漿抗體濃度均高于＜5年組，且差異有統計學意義(P＜0.017)。

表1 不同組別人群血漿中HER3抗體濃度比較(中位數±四分位數間距)

2.2 接塵組不同年齡工人血清中自身免疫抗體HER3-Ab含量及其與年齡的相關性分析 表2可見各年齡組人群血漿HER3抗體濃度不同，差異有統計學意義(P＜0.05)。兩兩比較可發現，30～40年組與＜30年組比較血漿HER3抗體濃度無差異，差異無統計學意義(P＞0.017);≥40年組與＜30年組比較血漿抗HER3抗體濃度有差異，差異有統計學意義(P＜0.017);≥40年組與30～40年組比較比較血漿HER3抗體濃度不同，差異有統計學意義(P＜0.017)。

表2 接塵組不同年齡工人血清中HER3抗體含量比較(中位數±四分位數間距)

2.3 吸煙對接塵組血清中自身免疫抗體HER3-Ab含量的影響 采用二元logistic分析方法分析吸煙是否對接塵組的血清中的HER3-Ab含量是否有影響，由表3可見吸煙變量對接塵組的血清中的HER3-Ab含量的影響無統計學意義(P＞0.05)。

表3 logistic方程中的變量

3 討論

塵肺是一種以肺纖維化為主要病變的慢性疾病，它的發生發展與機體自身內外因素密切相關，纖維化實質上是機體對肺損傷的一種修復機制，與多種纖維化有關的自身免疫抗體密切相關，它們的表達反映了受損害程度的大小，預示了疾病發展的結局，在早期的異常表達亦可做為判斷預防控制疾病的預警信息。塵肺患者出現自身抗體，其機理可能與巨噬細胞的吞噬活動有關，煤塵細胞的毒作用使巨噬細胞吞噬煤塵后變性、壞死、崩解。巨噬細胞的自身崩解，使細胞核內多種抗體成分暴漏，產生自身免疫抗體。自身抗體含量的升高可反映機體免疫應答的失調。煤礦工人塵肺和進行性大塊肺纖維化的血清學變化顯示塵肺患者的自身免疫抗體水平比正常人高的多。本次研究的目的就在于探討自身免疫抗體HER3抗體在塵肺病早期變化中表達水平的變化及其意義，探討其做為肺纖維化早期診斷指標的可能性。

當EGFR的胞外區與之相應的配體如EGF等結合后，受體發生二聚化，激活胞內區的RTK，激酶使受體自身或底物蛋白上的酪氨酸磷酸化后引起一系列的信號傳導級聯反應，主要是通過PI3K途徑、MAPK途徑、STAT途徑等，最終引起DNA的復制、細胞的分裂與增殖等生物效應［6］。因此這次的研究有很強創新性和實用性。本研究結果表明接塵工人血清的HER3-Ab含量高于對照組，這表明，接塵工人血清的HER3-Ab可能與粉塵暴露之間存在一定的關系，有成為粉塵暴露生物監測指標的可能性，但其具體機制尚不明確，仍需進行進一步的研究。同時研究結果顯示接塵工人血清中HER3-Ab的含量與接塵工齡之間有關，但是還需要進一步的研究以證實這種相關性的存在，這對于粉塵的暴露及塵肺的診斷有十分積極的意義。接塵工人血清中HER3-Ab的含量與年齡之間有關，與工齡之間的結果一致。但未發現接塵工人血清中HER3-Ab的含量與吸煙之間存在相關性，這需要在以后的研究中收集詳細的粉塵暴露資料來闡明。

綜上本次研究提示，自身免疫抗體HER3-Ab表達水平與接塵有關，因此具有作為監測粉塵暴露的指標，亦可考慮作為作為早期篩查塵肺高危人群的指標的研究意義。

［1］ 李德鴻.我國塵肺防治工作55年［J］.現代職業安全，2005，(5):26-28.

［2］ Maestrelli P，Guarnieri.Diagnosis of occupational chronic pulmonary diseases［J］.G ital Med Lav Ergon.2010，32(4):1 33-436.

［3］ Okamoto T，Mukai Y，Yoshioka Y，et al.Optimal construction of nonimmune scFv phage display libraries from mouse bone marrow and spleen established to select specific scFvs efficiently binding to antigen［J］.Biochem Biophys Res Commun.2004，323(2):583-579.

［4］ Lee H W，Lee S H，Park K J，et al.Design and validation of a synthetic VH repertoire With tailored diversity for protein recognition［J］.2006，19(5):413-422.

［5］ Richard M，Perreault J，Gane P，et al.Phage-derived monoclonal anti-Lu［J］.Transfusion.2006，46(6):1011-1017.

［6］ Yarden Y，Sliwkowski M X.Untanling the ErbB signalling network［J］.Nat ReV MoI Cell Biol，2001，2(2):127.

［7］ Klapper L N ，Kirschbaum M H，Sela M，et al.Biochemical and clinical implications of the ErbB/HER signaling network of growth factor receptors［J］.Adv Cancer Res，2000，77:25-79.

HER3-Ab serum level in dust exposed workers

JIN Xiao-fei，HAO Chang-fu，YAO Wu
(Department of Occupational Health and Occupational Disease，Public Heath College，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001，China)

Objective:To observe the level of HER3-Ab in serum of coal workers，and to discuss the role in pneumoconiosis.Methods:159 exposed workers and 85 healthy subjects were selected.Then use ELISA to detect the serum HER3-Ab of all cases.Results:The serum HER3 antibody of healthy control group，＜5 years exposure group and ≥ 5 years group was(1.29±1.83)mg/L，(3.72±7.17)mg/L and(9.96±21.86)mg/L.There was significant differences in them(P ＜0.05).Conclusion:The expression of HER3-Ab was related to dust exposure.

pneumoconiosis;antibody;HER3-Ab

R 392

B

10.3969/j.issn.1004-437X2012.03.006

2012-08-12;

2012-09-13

國家自然科學基金資助課題(81072278)。

晉曉飛(1985－)，男，河南靈寶人，在讀碩士研究生，

研究方向:職業性肺部疾病的防治。

姚武(1962－)，男，教授，博士生導師，E-mail:yaowu@zzu.edu.cn。

1004-437X(2012)03-0274-03