2型糖尿病合并腦梗死患者血清內脂素與HCY和CRP的相關關系研究

朵慧敏 梁瑋 張眾 王春雷

2型糖尿病合并腦梗死患者血清內脂素與HCY和CRP的相關關系研究

朵慧敏 梁瑋 張眾 王春雷

目的 探討2型糖尿病合并腦梗死患者血清內脂素水平及臨床意義。方法 共選取研究對象116名，用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清內脂素水平以及同型半胱氨酸(HCY)、C反應蛋白(CRP)水平。全自動生化儀測定空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(T-ch)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血尿酸(UA)等生化指標，高壓液相法測定糖化血紅蛋白(HbA1c)。結果 2型糖尿病合并腦梗死組血清內脂素水平較正常對照組明顯升高。其中HCY和CRP升高的2型糖尿病組血清內脂素水平較HCY和CRP正常的2型糖尿病合并腦梗死組明顯升高，內脂素與HCY和CRP均呈正相關。結論 內脂素與HCY和CRP呈正相關，并且是導致動脈粥樣硬化的重要因素。

2型糖尿??；腦梗死；內脂素；HCY；CRP

內脂素是近年來新發現的一種脂肪細胞因子，具有降糖、降脂和促炎的作用。目前認為，肥胖、DM和動脈粥樣硬化均屬于慢性低度的炎性疾病，但內脂素具體作用機制還有待于進一步闡明。本研究收集正常人群、2型糖尿病和2型糖尿病合并腦梗死患者的一般資料，觀察其生化、糖化血紅蛋白及血清內脂素等指標變化，分析2型糖尿病合并腦梗死患者血清內脂素的水平及臨床意義，為進一步研究內脂素的分子機制和作用機制提供依據，也為內脂素的臨床應用和糖尿病并發癥的防治提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入選標準：⑴健康對照組：20例，均是來自我院體檢中心的健康體檢者，無糖尿病家族史；⑵2型糖尿病合并腦梗死組：96例，經CT證實存在腦梗死，并經TCD、MRI或CTA證實有動脈粥樣硬化性狹窄。所有入選者均為黑龍江省漢族人，年齡、性別相匹配，BM I<25kg／m2。

排除標準：排除近期嚴重的心、肝、腎、腦及肺功能不全者；感染、出血、惡性腫瘤和其他內分泌疾??；近期服用過影響糖脂代謝藥物者。

1.2 研究方法 以上所有入選者均需隔夜空腹10h后采集靜脈血，用血清分離管收集血標本，凝結30m in后立即離心，1000 r/m in，離心15m in后分離出血清，用全自動生化分析儀測定血脂、空腹血糖、血尿酸等生化指標；將剩余的血清倒入EP管中封好，置于-20℃冰箱中保存。同時記錄入選者的身高、體重、家族史等一般資料。 酶聯免疫吸附法（ELISA）測血清內脂素、HCY、 CRP水平。以上試劑盒購自美國R&D公司。

1.3 統計學方法 應用SPSS15.0軟件，計量資料以均數±標準差（）描述，兩組間比較采用t檢驗，以多元回歸分析內脂素與各影響因素之間的相關性。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 2型糖尿病合并腦梗死組和正常對照組兩組間單變量分析 從表1可以看出，兩組間年齡、BM I、T-ch、HDL-C、FPG等指標皆無統計學意義。2型糖尿病合并腦梗死組內脂素、TG、HCY和CRP水平較正常對照組明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 病例組和對照組單變量的t檢驗：均數±標準差

2.2 2型糖尿病合并腦梗死組組內單變量分析

2.2.1 根據血清HCY水平將2型糖尿病合并腦梗死組分成HCY正常的2型糖尿病合并腦梗死組和HCY升高的2型糖尿病合并腦梗死組。結果后者的血清內脂素、CRP、TG、LDL-C和UA水平較前者明顯升高，差異有統計學意義 (P< 0.05 )。兩組間年齡、T-ch、HDL-C、FPG和HbA 1C等指標比較差異均無統計學意義，見表2。

表2 H cy升高的病例組和H cy正常的病例組單變量的t檢驗 (均數±標準差)

2.2.2 根據血清CRP水平將2型糖尿病合并腦梗死組分成CRP正常的2型糖尿病合并腦梗死組和CRP升高的2型糖尿病合并腦梗死組。結果后者的血清內脂素、HCY、TG、LDL-C和UA水平較前者明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)。兩組間年齡、T-ch、HDL-C、FPG和HbA 1C等指標比較差異均無統計學意義，見表3。

表3 CRP升高的病例組和CRP正常的病例組單變量的t檢驗（均數±標準差）

2.3 多因素分析

2.3.1 內脂素的多因素分析：以內脂素為因變量，年齡、BM I、FPG、T-ch、HDL-C、LDL-C、TG、UA和HbA 1c為自變量進行多元線性回歸分析。結果顯示，內脂素與HCY和CRP呈正相關，說明HCY和CRP可以影響內脂素的生成；而內脂素與其它指標皆不相關，見表4。

2.3.2 HCY和CPR的多因素分析：以甘油三酯為因變量，年齡、BM I、FPG、T-ch、HDL-C、LDL-C、UA、H bA 1c和內脂素為自變量進行多元線性回歸分析。結果顯示，內脂素、T-ch 和LDL-C進入回歸方程，即內脂素影響了HCY和CRP的生成。見表5和表6。

表4 內脂素的多因素分析的回歸系數及P值

表5 同型半胱氨酸的多因素分析的回歸系數及P值

表6 CRP的多因素分析的回歸系數及P值

2.4 相關性分析 以上統計結果顯示，內脂素與HCY和CRP呈正相關，有統計學意義(r=0.7497，P=0.0249；r=0.6182，P=0.0327），而與其它指標皆不相關。HCY和CRP與內脂素、TG、T-ch 和LDL-C呈正相關，而與其它指標不相關。

3 討論

本研究證實，2型糖尿病患者血清內脂素水平高于正常對照者，循環血中脂質的異位過度沉積具有脂毒性，可導致許多組織細胞或臟器的脂肪變性，如脂肪肝、動脈硬化等。Dah l等[1]研究頸動脈不穩定粥樣硬化病變中發現氧化的低密度脂蛋白等增加,由此上調了人單核細胞中THP-1單核細胞中visfatin的表達；而且visfatin和不穩定斑塊損害之間的關系同樣存在于冠狀動脈粥樣硬化性心臟病患者中。提示visfatin可能在斑塊失穩定性中發揮一定作用。Mon talescot等[2]研究發現，游離脂肪酸能顯著抑制3T3-L1脂肪細胞visfatin m RNA 表達水平，并首次發現油酸和棕櫚酸的這種抑制作用最高分別達44%與47%。

Fukuhara等[3]發現血漿visfatin水平與內臟脂肪含量呈正相關，與皮下脂肪含量關系不大。動物實驗發現肥胖的2型糖尿病小鼠在體重迅速增加的同時伴有內脂素水平的明顯增加，而皮下脂肪中的內脂素表達無變化。以上研究不但說明肥胖患者體內visfatin水平升高而且肥胖還和血清visfatin的表達密切相關。而Pagano等[4]的研究結果與上述研究相反，發現肥胖患者內脂素水平下降，Rongvaux等[5]在中國人群的研究中也得到同樣的結果。而Berndt等[6]研究發現血漿visfatin濃度與內臟脂肪量無明顯相關性，但是與內臟visfatin m RNA表達水平、體重指數、體脂指數呈正相關，與皮下脂肪visfatin mRNA表達水平呈負相關。Sam al[7]等在實驗中發現，visfatin與腰臀比呈正相關,同時腰臀比是血漿visfatin水平的獨立相關因素，而與體重指數無關。國內研究發現，WH tR與初診2型糖尿病患者血漿visfatin水平呈明顯正相關，同時是血漿visfatin水平的獨立相關因素。以上研究均提示visfatin與內臟脂肪之間存在緊密聯系。

研究表明，內脂素參與動脈粥樣硬化的形成，其機制可能與缺氧、易損斑塊破裂、內皮功能紊亂、血管增生、炎癥和糖脂代謝紊亂等有關。內脂素能促進脂肪組織的分化與合成，參與脂肪細胞周期的調節；抑制中心粒細胞的凋亡，增加黏附因子的表達，促進血管炎癥反應；調節NAD依賴的蛋白乙酰轉移酶活性，促進血管平滑肌細胞成熟。此外，內脂素主要來源于巨噬細胞，巨噬細胞是參與炎癥反應的主要細胞之一，故認為內脂素很可能是一個重要的促炎癥因子參與動脈粥樣硬化的形成。近年來有研究發現，內脂素有一定預測動脈粥樣硬化嚴重程度的作用，急性心肌梗死患者破裂斑塊局部表現出更顯著的內脂素免疫染色，提示內脂素可能介導了動脈粥樣硬化的形成及斑塊穩定性的降低。在動脈粥樣硬化的病理過程中，炎癥反應起著重要作用，許多炎癥因子與心血管事件密切相關。CRP和HCY是炎癥反應的標志物。研究發現，CRP是心血管事件發生的獨立預測因子[8]。CRP是一種由細胞因子如IL-6、TNFa等誘導的急性時相反應蛋白，是反映進行性炎癥的敏感標志物。HCY是一種含巰基氨基酸,是蛋氨酸代謝的中間產物，其引起動脈粥樣硬化性血管疾病的確切機制尚未完全闡明，有證據提示，Hcy可直接或間接損傷血管內皮細胞,造成血管內皮細胞功能障礙、促進平滑肌細胞增殖,改變血液凝固狀態及血小板功能等多方面機制而引起血管疾病。HCY可上調黏附因子的表達，促進血管內皮細胞增生，與動脈粥樣硬化的形成和發展有較強的相關性。HCY可損傷內皮細胞使其修復延遲；激活炎性細胞如單核巨噬細胞、中性粒細胞和內皮細胞，使炎癥因子釋放增多；同時通過氧化應激作用促進動脈粥樣硬化的發生和發展[9]。本研究結果顯示，2型糖尿病合并腦梗死患者的血漿內脂素、CRP和HCY水平較對照組明顯升高，與曾經的報道[9]內脂素在腦梗死患者中表達增加相一致，提示血漿內脂素水平升高可能是動脈粥樣硬化的一項新的預測指標，同時也證實了炎癥因子CRP、HCY與冠心病密切相關。2型糖尿病合并腦梗死患者隨著病變程度的加重，血漿內脂素、CRP和HCY水平明顯升高，提示上述指標的水平變化反映了動脈粥樣硬化病變的嚴重程度。相關分析顯示，血漿內脂素水平與腦梗死的危險因素（如BM I、FPG、TG、LDL-C等）呈明顯正相關。

綜上所述，細胞因子內脂素與炎癥因子CRP、HCY共同參與或介導了動脈粥樣硬化的形成，對2型糖尿病合并腦梗死的發生和發展起著重要的作用。血漿內脂素、CRP和HCY水平可以預測動脈病變的嚴重程度。血漿內脂素水平變化可作為動脈粥樣硬化的一項新的預測指標，為心腦血管疾病的臨床篩查、早期診斷和病變評估提供一定的理論依據。

[1] Dahl,Refsum H,Morris R,et al.Prospeitive and risk of stoke in middleage British men [J].Lancet,1995,346(25):1395-1398.

[2] Montalescot G,Ankri A,Chadefaux-Vekemans B,et al.Plasma homocysteine and the extent of atherosclerosis in patients with coronary disease[J]. Int J Cardiol,1997,60(3):295-300.

[3] Fukuhara A,MatsudaM,NishizawaM, et al. Visfatin: a protein secreted by visceral fat that mimics the effects of insulin [J]. Science, 2005, 307 (5708) : 426-430.

[4] Pagano C, Pilon C, OlivieriM, et al. Reduced p lasma visfatin / p re - B cell colony -enhancing factor in obesity is not related to insulin resistance in humans [J]. J Clin EndocrinolMetab, 2006, 91: 3165 -3170.

[5] Rongvaux A, Shea RJ,MulksMH, et al.Pre-Bcellcolony-enhancing factor,whose expression is up-regulated in activated lymphocytes,is a nicotinamide phosphoribosyltransferase, a cytosolic enzyme involved in NAD biosynthesis[J]. Eur J Immunol, 2002, 32(11) : 3225-3234.

[6] Berndt J, Kloting N, Kralisch S,etal.Plasma visfatin concentrations and fat depot-specific mRNA expressioninhumans[J].Diabetes, 2005, 54 ⑽ : 2911-2916.

[7] Samal B, Sun Y, Stearns G, et al. Cloning and characterization of the cDNA encoding a novel human pre-B cell colony-enhancing factor[J]. Mol Cell Biol, 1994, 14 ⑵ : 1431-1437.

[8] Biasucci LM,Liuzzo G,Grillo RL,et al.Elevated levels of Creactive protein at discharge in patients with unstable angina predict recurrent instability[J].Circulation,1999,99⑺:855-860.

[9] Hoogeveen EK,Kostense PJ,Beks PJ,et al.Hyperhomocysteinemia is associated with an increased risk of cardiovascular disease,especially in non insulin dependent diabetes mellitus:A population Based study[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,1998,18(1):133-138.

O bjective To study the Type 2 diabetic patients w ith cerebral infarction visfatin levels and clinical signi fi cance. Methods 116 subjects were selected.Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in serum visfatin levels, same-sex cysteine (HCY) and C-reactive protein (CRP). Automatic biochem ical analyzer fasting plasma glucose (FPG), triglyceride (TG), total cholesterol (T-ch), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), uric acid (UA).measured in HPLC determ ination of glycosylated hemoglobin (HbA 1c). Results Cerebral infarction in type 2 diabetes serum visfatin levels were signi fi cantly higher than the normal control. HCY and CRP elevated serum levels of type 2 diabetes was signi fi cantly higher than HCY and CRP levels normal cerebral infarction in type 2 diabetes. Visfatin with HCY and CRP were positively correlated.Conclusion Visfatin w ith HCY and CRP were positively correlated, and lead to an important factor in atherosclerosis.

Type 2 diabetes; Cerebral infarction; Visfatin; HCY; CRP

book=1,ebook=26

10.3969/j.issn.1009-4393.2012.26.001

150000 哈爾濱醫科大學附屬第二醫院內分泌科 （朵慧敏梁瑋 張眾 王春雷）

王春雷 E-mail:oems@qq.com