電化學發光法和ELISA法檢測HBsAb的結果分析

趙秀麗

沈陽醫學院奉天醫院檢驗科，遼寧沈陽 110024

乙型肝炎（hepatitis B，簡稱乙肝）是一種嚴重危害人類健康、傳播廣泛的病毒傳染性疾病，據世界衛生組織報道，全球約有20億人感染乙型肝炎病毒，每年有超過60萬人死于乙型肝炎病毒所致肝硬化或肝癌[1]。乙型肝炎病毒侵入人體后，刺激人體免疫系統中的B淋巴細胞分泌出一種特異的免疫球蛋白G，也就是常說的乙型肝炎病毒表面抗體（HB-sAb），它可以與表面抗原特異地結合，與人體的其他免疫功能共同作用消除掉病毒，保護人體不再受HBV的感染[2]。所以，乙型肝炎表面抗體（HBsAb）是一種中和抗體，具有保護作用，它的檢測是判斷疫苗接種效果的重要指標[3]。目前，乙型肝炎表面抗體的檢測主要還依賴于酶聯免疫吸附試驗（ELISA）來判斷是否陽性，并不能說明HBsAb是否能達到對機體的保護作用。電化學發光法（ECLIA）作為一種新型標記免疫分析技術，在臨床工作中也得到了越來越廣泛的應用。筆者2011年8～11月對本院536例HBsAb陽性的標本分別使用電化學發光法和ELISA方法進行檢測，并對檢測結果進行分析比較。

1 材料與方法

1.1 標本來源

選取沈陽醫學院奉天醫院2011年8～11月門診和住院患者HBsAb為陽性的血液標本536份。

1.2 儀器及試劑

ECLIA采用Roche E170型全自動電化學發光免疫分析儀，HBsAb試劑盒、校準品、質控品均由Roche公司提供。嚴格按照儀器和試劑說明書進行校準、質控、檢測等操作。ELISA法采用上海科華HBsAb試劑盒檢測，實驗儀器為安圖酶標儀和洗板機。所有試劑均在有效期內使用。

1.3 陽性標準

ECLIA法≥10 IU/L為陽性；ELISA法按照說明書確定臨界值：為2.1×陰性對照（陰性對照<0.05按0.05計算），每次標本測定值（S/CO）≥臨界值為陽性。

1.4 統計學處理

數據采用SPSS 11.0軟件進行四格表分析。通過ECLIA法和ELISA法檢測HBsAb的比較，以診斷敏感性、特異性、診斷符合率、陽性預測值、陰性預測值為評價指標。敏感性（%）=a/（a+b）×100%，實際患者被正確判為有病的百分率；特異性（%）=d/（c+d）×100%，即無病正確判為無病的百分率；診斷符合率（%）=（a+d）/（a+b+c+d）×100%，試驗診斷結果與金標準結果相比，二者相同的百分率；陽性預測值（%）=a/（a+c）×100%，被判陽性者患病的概率；陰性預測值（%）=d/（b+d）×100%，被判陰性者排除患病的概率。

2 結果

2.1 ECLIA法和ELISA法檢測HBsAb的結果

當 HBsAb為 10～50 IU/L時，ELISA的陽性率只有6.62%。見表1。

表1 ECLIA法和ELISA法檢測HBsAb的結果比較（n）

2.2 ECLIA法和ELISA法檢測HBsAb的方法學比較

ELISA方法的敏感性為41.24%，特異性為98.04%，符合率為46.64%，陽性預測值為99.50%，陰性預測值為12.99%。詳見表2。

表2 ECLIA法和ELISA法檢測HBsAb的方法學比較（n）

3 討論

HBsAb是判斷接種疫苗是否成功的血清學標志物，若HBsAb定量結果>10 IU/L，說明機體有免疫力，但只有當HBsAb定量結果>100 IU/L時，才會對機體有保護作用[4]。因此，對于HBsAb定量結果在10～100 IU/L的患者，可考慮加強免疫接種。對于未接種疫苗HBsAb陽性者，HBsAb是感染過乙型肝炎病毒的標志之一，機體已產生免疫力[5]。

本實驗中當HBsAb為10～50 IU/L時，ELISA的陽性率只有6.62%，說明ELISA方法的靈敏度不如電化學發光法高。ECLIA一方面使用鏈酶生物素親和素系統來提高檢測的靈敏度；另一方面，它使用兩種單克隆抗原（鏈酶生物素上連接針對ad/ay兩種亞型的HBsAg）-待測抗體-單克隆抗原（三聯吡啶釕標記的ad/ay兩種亞型的HBsAg）這種雙抗原夾心法的檢測模式來檢測HBsAb。而ELISA使用單克隆抗原（針對a抗原決定簇的HBsAg連接于固相載體上）-待測抗體-酶標抗原來檢測。HBsAb低于50 IU/L時，ELISA方法的漏檢率就很高，與吳婷婷等[6]報道的低于34 IU/L會發生漏檢的值高。

本實驗中ELISA方法的敏感性為41.24%，符合率為46.64%，均較低，這可能與實驗選擇的標本范圍有關。比劉云鋒等[7]報道的符合率要低。預測值的高低受試驗靈敏度與特異性的影響[8]，靈敏度越高的試驗，陰性預測值越高，而特異性越高的試驗，陽性預測值越高。與ECLIA方法相比，ELISA的陽性預測值為99.50%，陰性預測值為12.99%。說明ECLIA方法檢測HBsAb的敏感性和特異性要優于ELISA方法，ELISA方法的特異性較好，但靈敏度較低。

ECLIA法不受脂血、黃疸、溶血、生物素、類風濕因子和多種常用抗病毒藥物的干擾[9]，而ELISA法的影響因素則較多，如溶血、溫度、時間等都會對結果有影響，但ELISA法價格低廉，不需要特殊的儀器設備，普通實驗室均可開展，而ECLIA法需要特殊的儀器設備，價格較高。

預防乙型肝炎感染的最有效方式是進行乙肝疫苗接種，但接種疫苗后，大約有5%～10%的接種者不產生或不能產生足夠的HBsAb[10]，因此乙型肝炎疫苗三針后1個月是體內HBsAb含量最高的時段，之后逐年下降。因此，在接種疫苗后，要選擇合適的時間段來檢測HBsAb含量，當低于保護值時，要及時加強免疫，從而才能真正有效預防HBV感染，達到預防乙型肝炎的目的。

[1]Natalia M Araujo，Ricardo Waizbort，Alan Kay.Hepatitis B virus infection from an evolutionary point of view：How viral，host，and environmental factors shape genotypes and subgenotypes[J].Infection，Genetics and Evolution，2011，11：1199-1207.

[2]周冬日，郭慧玉，黃良光，等.大范圍檢測乙肝表面抗體的必要性[J].中國婦幼保健，2004，19（22）：35-36.

[3]郗愛華，張長菊.463例醫務人員乙肝表面抗體檢測結果分析[J].甘肅醫藥，2011，30（1）：37-38.

[4]藺承艷，姜莉.ELISA與TRFIA法檢測乙肝表面抗體的對比分析及應用[J].國際檢驗醫學雜志，2011，32（2）：254-255.

[5]李金明.乙型肝炎病毒標志物測定及結果解釋的若干問題[J].中華檢驗醫學雜志， 2006，29（5）：385-389.

[6]吳婷婷，鄭曉群.電化學發光與酶免疫分析檢測抗HBs的比較[J].中國醫師雜志，2003，5（9）：1273.

[7]劉云鋒，陳曲波，劉海英，等.127例乙肝表面抗體ELISA檢測與化學發光法的比較[J].國際醫藥衛生導報，2009，15（12）：85-87.

[8]黃永富，尹建波，曹興建.兩種HBVM診斷試驗ELISA檢測試劑盒的性能評價與比較[J].現代檢驗醫學雜志，2011，26（3）：76-84.

[9]楊一鳴，王紹波，徐曉玲.化學發光免疫分析在HBVM定量檢測的臨床應用[J].放射免疫學雜志，2005，18（1）：71-73.

[10]蘇希躍，林細池.接種乙肝疫苗后乙肝標志物的變化[J].國際檢驗醫學雜志，2007，28（6）：4.