L阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)便秘模型小鼠潤(rùn)腸通便作用的研究

楊子明，董仲璽，吳建璋，顏小捷，李典鵬，* ，陳海珊，張厚瑞

(1.廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣西植物研究所，廣西桂林541006;2.廣西師范大學(xué)，廣西桂林541004)

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、人們生活水平的提高和原有飲食習(xí)慣的改變，便秘已經(jīng)成為現(xiàn)代社會(huì)中的常見病。便秘常引起人們情緒的改變，心煩意亂，注意力渙散，影響日常生活與工作，并能導(dǎo)致肛結(jié)直腸并發(fā)癥。長(zhǎng)期的便秘可使腸道細(xì)菌發(fā)酵而產(chǎn)生的致癌物質(zhì)刺激腸黏膜上皮細(xì)胞，導(dǎo)致異形增生，易誘發(fā)癌變［1-3］。蔗糖作為人們常用食品添加劑，被人食用后，在胃腸中由轉(zhuǎn)化酶轉(zhuǎn)化成葡萄糖和果糖，有著潤(rùn)腸通便的效果。L-阿拉伯糖具有良好的生理活性與功能，目前，美國(guó)食品藥品監(jiān)督局(FDA)將L-阿拉伯糖列入抗肥胖的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑和非處方藥;日本厚生省將其列入專用特殊保健食品添加劑用于調(diào)節(jié)血糖;我國(guó)衛(wèi)生部于2008年批準(zhǔn)L-阿拉伯糖作為新資源食品。L-阿拉伯糖的生理功能:a.抑制蔗糖的代謝與吸收，控制血糖升高:天然存在的阿拉伯糖為L(zhǎng)-型，它在動(dòng)物體內(nèi)不能被代謝，有甜味但是無(wú)熱量。除此之外，它以非競(jìng)爭(zhēng)方式抑制腸道內(nèi)蔗糖酶，從而抑制蔗糖在小腸內(nèi)的吸收。b.抑制脂肪生成:L-阿拉伯糖阻礙蔗糖消化吸收，使機(jī)體獲得的能量減少，從而使體重增加的可能性減少，有利于控制體重［4-6］。許多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明L-阿拉伯糖有較好的減肥、降血糖等效果［7-9］，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)組也發(fā)現(xiàn)阿拉伯糖具有較好的減肥作用［10］。另外通過(guò)人群服用L-阿拉伯糖實(shí)驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)組發(fā)現(xiàn)其對(duì)中老年便秘病人有較好的通便效果，本文擬通過(guò)嚴(yán)格的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物的潤(rùn)腸通便的功能，并確定其最佳劑量。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

昆明種小鼠 SPF級(jí)，體重18～22g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(湘)2009-0004;ZL-0601電子天平 湖南湘儀實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;L-阿拉伯糖(純度99%)唐傳生物科技(廈門)有限公司，批號(hào)1009081;麻仁丸武漢太福制藥有限公司，批號(hào)20110407;鹽酸洛哌丁胺 西安楊森制藥有限公司，批號(hào)20110407;羧甲基纖維素鈉 中國(guó)醫(yī)藥上海試劑公司，批號(hào)20100405;其余試劑 均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 小鼠小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn) 取健康昆明種小鼠80只，雌雄各半，體重18～22g，隨機(jī)分為8組，每組10只:即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、阿拉伯糖組(按1.62g/kg灌胃給藥，下同)、蔗糖組(1.38g/kg)、阿拉伯糖+蔗糖復(fù)配物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(3.0g/kg，其中的配比分別為Ⅰ組:阿糖54%+蔗糖46%;Ⅱ組:阿糖18%+蔗糖82%;Ⅲ組:阿糖6%+蔗糖94%)、陽(yáng)性對(duì)照組(麻仁丸4.5g/kg)。小鼠禁食不禁水12h后除正常對(duì)照組外的各給藥組分別灌胃給予鹽酸洛哌丁胺(3.0mg/kg)，正常對(duì)照組給予相應(yīng)體積的蒸餾水。30min后各劑量組分別灌胃給予含有墨汁混懸液(2%墨汁100mL+1g羧甲基纖維素鈉)相應(yīng)劑量的藥物，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予相應(yīng)體積墨汁混懸液，灌胃體積均為0.2mL/10g。30min后頸椎脫臼法處死小鼠，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門，下端至回盲部的腸管，測(cè)量腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”，測(cè)量幽門至碳汁推進(jìn)前沿的距離為“碳汁推進(jìn)長(zhǎng)度”，計(jì)算碳汁推進(jìn)率。碳汁推進(jìn)率(%)=碳汁推進(jìn)長(zhǎng)度(cm)/小腸總長(zhǎng)度(cm)×100。

1.2.2 小鼠排便實(shí)驗(yàn) 取健康昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重18～22g，隨機(jī)分為6組，每組10只，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、阿拉伯糖組(1.62g/kg)、蔗糖組(1.38g/kg)、阿拉伯糖+蔗糖復(fù)配物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(3.0g/kg，其中的配比分別為Ⅰ組:阿糖54%+蔗糖46%;Ⅱ組:阿糖18%+蔗糖82%;Ⅲ組:阿糖6%+蔗糖94%)、陽(yáng)性對(duì)照組(麻仁丸4.5g/kg)。小鼠隔夜禁食12h(飲水不限)后除正常對(duì)照組外的各給藥組分別灌胃給予鹽酸洛哌丁胺(3.0mg/kg)，正常對(duì)照組給予相應(yīng)體積的蒸餾水。30min后各劑量組分別灌胃給予含有墨汁混懸液相應(yīng)劑量的藥物，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予相應(yīng)體積墨汁混懸液，灌胃體積均為0.2mL/10g。從給予墨汁混懸液開始計(jì)時(shí)，每只小鼠單獨(dú)放入帶隔層小鼠籠(籠底鋪上吸水紙)，正常飲水、進(jìn)食，分別觀察記錄每只小鼠首次排出黑便的時(shí)間，6h內(nèi)排便次數(shù)、重量及糞便性狀。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以±s表示，兩個(gè)獨(dú)立樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多個(gè)樣本之間的兩兩比較采用單因素方差分析，p＜0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 L－阿拉伯糖對(duì)便秘模型小鼠小腸推進(jìn)的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。L-阿拉伯糖組、蔗糖組、糖復(fù)配物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與便秘模型對(duì)照組比較，小鼠小腸內(nèi)碳汁的推進(jìn)率均明顯提高，其中以糖復(fù)配物Ⅰ組效果最為明顯。L-阿拉伯糖能夠抑制蔗糖的代謝，在糖復(fù)配物組中可能充分抑制了蔗糖在小腸的消化吸收，而L-阿拉伯糖本身很難被消化道吸收，在小腸不被吸收的L-阿拉伯糖和蔗糖可通過(guò)減少鹽酸洛哌丁胺的吸收來(lái)拮抗其抑制小腸蠕動(dòng)。從表1中可以知道阿拉伯糖、蔗糖都有促進(jìn)便秘模型小鼠小腸蠕動(dòng)的功能，其中L-阿拉伯糖組小腸內(nèi)容物推進(jìn)率高于正常組，說(shuō)明L-阿拉伯糖本身有很好的促進(jìn)小鼠腸道蠕動(dòng)的功能。實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)促進(jìn)便秘模型小鼠腸道蠕動(dòng)以糖復(fù)配物Ⅰ組效果最好，原因可能是阿拉伯糖、蔗糖促進(jìn)便秘模型小鼠小腸蠕動(dòng)功能產(chǎn)生了相加或協(xié)同的功效。

表1 L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)便秘模型小鼠小腸推進(jìn)的影響(±s，n=10)Table 1 Effect of L-arabinose and sucrose mixture on small intestinal propelling in constipation mice(±s，n=10)

表1 L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)便秘模型小鼠小腸推進(jìn)的影響(±s，n=10)Table 1 Effect of L-arabinose and sucrose mixture on small intestinal propelling in constipation mice(±s，n=10)

注:與正常組相比，*p＜0.05，＊＊p＜0.01;與模型組相比，Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01;與糖復(fù)配物Ⅰ組相比，#p＜0.05，##p＜0.01;表2同。

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2.2 L－阿拉伯糖對(duì)便秘模型小鼠排便的影響

從表2中可以得到，L-阿拉伯糖組、蔗糖組、糖復(fù)配物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與便秘模型對(duì)照組比較，小鼠首次排便時(shí)間均明顯縮短，排便次數(shù)和排便重量均明顯增加，其中以糖復(fù)配物Ⅰ組效果最為明顯，其機(jī)制可能是糖復(fù)配物能夠促進(jìn)小鼠腸道蠕動(dòng)，縮短腸內(nèi)容物的通過(guò)時(shí)間，從而縮短便秘模型小鼠首次排便時(shí)間;糖復(fù)配物通過(guò)縮短食物在小腸中的停留時(shí)間，減少水、電解質(zhì)及葡萄糖等物質(zhì)的吸收，L-阿拉伯糖能夠抑制蔗糖的代謝，在糖復(fù)配物中，被抑制分解的蔗糖組分在大腸里被微生物分解產(chǎn)生出大量的有機(jī)酸和CO2、H2等氣體，在腸內(nèi)導(dǎo)致滲透壓升高、發(fā)酵顯著亢進(jìn)、腸蠕動(dòng)增強(qiáng)等，所以會(huì)加快糞便的排放，增加排便次數(shù)及重量。

2.3 L－阿拉伯糖對(duì)便秘模型小鼠糞便性狀的影響

從表3中可以得到，L-阿拉伯糖組、蔗糖組、糖復(fù)配物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與便秘模型對(duì)照組比較，小鼠排出的糞便性狀明顯變軟變稀，其中以糖復(fù)配物Ⅰ組效果最為明顯，其原因可能是在糖復(fù)配物中，被抑制分解的蔗糖組分在大腸里被微生物分解產(chǎn)生出大量的有機(jī)酸和CO2、H2等氣體，有濕潤(rùn)及軟化糞便的作用。

表2 L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)小鼠排便的影響(±s，n=10)Table 2 Effect of L-arabinose and sucrose mixture on defecation in constipation mice(±s，n=10)

表2 L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)小鼠排便的影響(±s，n=10)Table 2 Effect of L-arabinose and sucrose mixture on defecation in constipation mice(±s，n=10)

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表3 L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)便秘模型小鼠糞便性狀的影響(n=10)Table 3 Effect of L-arabinose and sucrose mixture on stool shape in constipation mice(±s，n=10)

表3 L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對(duì)便秘模型小鼠糞便性狀的影響(n=10)Table 3 Effect of L-arabinose and sucrose mixture on stool shape in constipation mice(±s，n=10)

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3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)鹽酸洛哌丁胺成功建立了便秘模型小鼠。鹽酸洛哌丁胺是一種極強(qiáng)的長(zhǎng)效止瀉藥，其造成便秘的作用機(jī)制為直接作用于腸壁的阿片受體，阻止納洛酮及其他配體與阿片受體結(jié)合，阻止乙酰膽堿和前列腺素的釋放，抑制腸道縱行和環(huán)行平滑肌收縮，從而抑制腸蠕動(dòng)，延長(zhǎng)腸內(nèi)容物的通過(guò)時(shí)間，并通過(guò)延長(zhǎng)食物在小腸中的停留時(shí)間，促進(jìn)水、電解質(zhì)及葡萄糖的吸收［11］。本實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性藥采用麻仁丸，麻仁丸為治療便秘的傳統(tǒng)中藥，為黃褐色的水蜜丸，可以潤(rùn)腸通便，用于腸熱津虧所致的便秘。本文在糖復(fù)配物對(duì)小鼠小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)糖復(fù)配物能有效促進(jìn)便秘模型小鼠腸道的蠕動(dòng);在糖復(fù)配物對(duì)小鼠排便影響的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)糖復(fù)配物有明顯縮短便秘模型小鼠首次排便時(shí)間、增加6小時(shí)內(nèi)排便次數(shù)和重量、軟化糞便的作用，其中都以糖復(fù)配物Ⅰ組效果最好，所以糖復(fù)配物Ⅰ組可做為一種有效的潤(rùn)腸通便保健食品。

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