感冒清毒顆粒中阿司匹林含量測定

楊巨華，夏忠祥

(湖北省中山醫(yī)院藥學(xué)部，武漢430033)

感冒清毒顆粒是我院自制制劑(批準(zhǔn)文號:鄂藥制字Z20082358)，主要由野菊花、二花藤、射干、阿司匹林等組成，具有清熱解毒、解熱鎮(zhèn)痛作用，用于治療感冒引起的頭痛發(fā)熱、鼻塞、流涕、咽痛、乏力、全身酸痛等，臨床療效良好。該藥為中西藥結(jié)合復(fù)方制劑，為保證制劑安全、穩(wěn)定、有效，筆者查閱了相關(guān)文獻(xiàn)資料[1-2]，建立了測定其中阿司匹林含量的高效液相色譜(HPLC)法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器UV-2100紫外分光光度計，DIONEX(P680)高效液相色譜儀，Precisa XR 205-SM-DR分析天平。

1.2 試藥阿司匹林對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，含量測定用，批號:100113-200302)，甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。樣品均為本院制劑室生產(chǎn)(批號:101009，101021，101103，101128，101226)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件Agilent C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動相:甲醇-1%醋酸溶液(40∶60);流速:1.0 mL·min－1;柱溫:室溫;檢測波長:276 nm;理論板數(shù)按阿司匹林峰計算不低于4 000，進(jìn)樣量:10 μL。

2.2 對照品溶液的制備取阿司匹林對照品適量，精密稱定，加1%醋酸的無水甲醇溶液制成每毫升含100 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備取本品適量，研細(xì)，取1.25 g(相當(dāng)于阿司匹林50 mg)，精密稱定，置50 mL量瓶，加1%醋酸的無水甲醇溶液約45 mL，超聲處理20 min，放冷，用1%醋酸的無水甲醇溶液稀釋至刻度，過濾，取濾液5 mL，置50 mL量瓶，用1%醋酸的無水甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，用孔徑0.45 μm的微孔濾膜濾過，即得。

2.4 線性關(guān)系考察精密稱取阿司匹林對照品適量，以1%醋酸的無水甲醇溶液配制成濃度分別為0.025 1，0.050 2，0.100 5，0.150 7，0.201 0 mg·mL－1的阿司匹林對照品溶液，分別進(jìn)樣10 μL，記錄色譜圖，以測得峰面積(A)對進(jìn)樣量(m)進(jìn)行線性回歸。回歸方程:A=－0.038 8+6.108 6m(r=0.999 6)。結(jié)果表明，阿司匹林的進(jìn)樣量在0.251～2.010 μg范圍內(nèi)時線性關(guān)系良好。

2.5 空白實驗參照感冒清毒顆粒制備方法，取處方中除阿司匹林之外的其余原輔料制成陰性樣品，再按供試品溶液制備方法制備陰性對照液，吸取陰性對照液10 μL，注入液相色譜儀，測定，結(jié)果空白對照無干擾。

2.6 樣品溶液的穩(wěn)定性考察取批號為101021的樣品，照供試品溶液制備方法制成供試品溶液，分別在0，2，4，6，8 h等不同時間點進(jìn)樣，進(jìn)樣量均為10 μL，測得阿司匹林峰面積的平均值為6.031，RSD為1.02%，結(jié)果表明，供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定，能保證含量測定的時間要求。

2.7 重復(fù)性實驗取批號為101021的樣品6份，照樣品含量測定項下的方法操作，測定阿司匹林的含量。平均含量為40.64 mg·g－1，RSD為1.42%。表明本方法重復(fù)性較好。

2.8 加樣回收率實驗取已知含量的樣品(批號:101021，阿司匹林含量為40.64 mg·g－1)6份，分別加入24.12 mg·mL－1阿司匹林對照品溶液各1 mL，按上述含量測定方法操作，計算，平均加樣回收率為101.91%，RSD=1.86%(表1)。

2.9 樣品含量的測定分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測定，按外標(biāo)法以峰面積計算含量，結(jié)果見表2。

3 討論

3.1 檢測波長的選擇取濃度為50 μg·mL－1的阿司匹林對照品溶液，在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在276 nm有最大吸收，參考2010年版《中華人民共和國藥典》[3]，將檢測波長定為276 nm。

表1 阿司匹林加樣回收率實驗結(jié)果

表2 樣品含量測定結(jié)果

3.2 流動相的選擇筆者比較了甲醇-1%醋酸溶液(40∶60)、乙腈-甲醇-0.01 mol·L－1磷酸二氫鉀-三乙胺(8∶38∶54∶0.11，用磷酸調(diào)pH至3.3～3.4)兩種流動相，結(jié)果采用甲醇-1%醋酸溶液(40∶60)時阿司匹林峰形對稱，分離度符合要求，另一流動相主峰略拖尾。故選用甲醇-1%醋酸溶液(40∶60)為流動相。

本方法簡便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，能準(zhǔn)確測定感冒清毒顆粒中阿司匹林的含量，為提高感冒清毒顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。根據(jù)實驗結(jié)果，擬確定感冒清毒顆粒中阿司匹林的含量為38～46 mg·g－1。

[1]王麗麗，李任，沈素，等.青翹片中阿司匹林的含量[J].中國藥師，2007，10(11):1109－1111.

[2]張慶紅，龐德，武毅，等.高效液相色譜法測定金羚感冒片中阿司匹林的含量[J].中國中醫(yī)藥學(xué)雜志，2007，27(2):282－283.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:385.