當前仔豬腹瀉病病原學與防控關鍵技術研究

何啟蓋 （華中農業大學 教授）

1 腹瀉病常見的發病原因

1.1 環境溫度原因

我國2011年至2012年冬季平均氣溫創27年最低，這正是我國仔豬腹瀉出現新問題的階段。可見，極端的氣候是引發此次腹瀉的一個重要原因。

1.2 細菌學和寄生蟲學原因

細菌性因素主要考慮以下幾種細菌：一是大腸桿菌，其致病特點是產房中不同日齡的豬都發生腹瀉，糞便為黃白色或清亮的白色；二是魏氏梭菌，其引起仔豬紅痢，糞便的顏色是棕紅色；三是胞內勞森氏菌，由其引發的增生性回腸炎常發生于80～90日齡的生長育肥豬，患病豬出現腹瀉，糞便為醬紅色。寄生蟲因素主要考慮球蟲，一般7日齡之后出現臨床癥狀，2～3日齡出現的腹瀉一般不考慮球蟲的原因。2010年冬季 （11～12月）以來發生的仔豬腹瀉主要表現為水樣腹瀉，仔豬出生2天以后即出現腹瀉。因此，此次腹瀉病的發生可排除細菌和寄生蟲因素。

1.3 病毒性原因

傳統的腹瀉病毒主要有3個，即傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、流行性腹瀉病毒 （PEDV）、輪狀病毒 （RV）。 豬圓環病毒和豬偽狂犬病毒并不以腹瀉為主要癥狀。

2 當前腹瀉病的流行病學特點

2.1 仔豬發病情況

從2010年冬季 （11～12月）開始，我國開始發生非常嚴重的仔豬腹瀉，發病高峰持續到2011年5月，2012年仍有發生的案例。新生1～2天內的仔豬表現正常，3～10日齡以內相繼發生嘔吐、水樣腹瀉，死亡率高達50%～85%。10日齡以上仔豬若補液及時可以耐過，但易成為僵豬。仔豬脫水非常嚴重，一些豬場的仔豬甚至邊吃奶邊腹瀉，用抗生素、干擾素、細胞因子治療的效果不是很理想。由于干擾素的治病機理是誘導機體產生抗病毒物質、抑制病毒生長而不是直接殺死病毒。因此，其作用效果與體況有關，感染早期體況良好時使用效果較好。產房中的仔豬一起吃奶，發生水樣腹瀉時，互相沾染，使得豬身上很臟、很潮濕。接近康復的時候豬身上會出現很多污染的糞便變干后留下的黑斑。

2.2 母豬發病情況

母豬發生腹瀉后4～5天可自愈。有的母豬還表現發熱、泌乳量下降，常導致仔豬消瘦。初胎母豬發病率高于經產母豬，因此，要對初胎母豬多加關注。母豬返飼病死仔豬糞便或腸道內容物好轉后，又會反復。

圖1 不同日齡仔豬糞便中用RT-PCR定量所得的PEDV數量

3 病原學調查

3.1 腹瀉發生后24小時以內采樣

豬場將死于腹瀉的仔豬送往實驗室檢測，剖檢后發現死豬的腸黏膜脫落很嚴重，基本上檢測不到病毒，容易出現假陰性的情況。有研究表明，將PEDV口服接種仔豬后，仔豬糞便中PEDV的量在第二天達到高峰 （圖1）。因此，采集樣品檢測病毒應在腹瀉發生后24小時以內進行。

3.2 傳染性腹瀉病并非冬季專屬

傳統性腹瀉病主要發生在冬季，而此次腹瀉在夏季也有發生。對某豬場冬季和夏季的生產仔豬因腹瀉導致的死亡情況進行調查，發現該豬場2012年2月1日～6月16日期間，生產仔豬2 952頭，死亡1 551頭，平均死亡率52.5%；6月29日～7月7日，生產17窩仔豬共146頭，到7月22日，只存活39頭，死亡率為73.3%。可見，傳染性腹瀉病并非冬季專屬。

3.3 PEDV是主要致病原因

2011年1～8月，華中農業大學動物疾病檢測室共收集了來自12個省57家規?；i場的855份仔豬腹瀉樣品 （糞便或小腸）。檢測發現，PEDV在33個豬場 （占58%）中檢出；TGEV在8個場 （占14%）中檢出；PEDV和TGEV陽性豬場累計為41個，占送檢豬場71.9%；TGEV均為單獨感染；RV與PEDV為混合感染；三種傳統的腹瀉病毒檢出率累計為27.2%。可見檢測的豬場中，PEDV陽性的豬場最多，樣品中PEDV的檢出率也是最高。中國農業大學獸醫疫病檢測中心和哈爾濱獸藥研究所的同期檢測數據也顯示，其調查的豬場腹瀉發生的主要病原也是PEDV，具體數據見表1。

3.4 國際之間疫病的傳播在加劇

2002年至2005年期間，韓國首爾大學動物醫學院的研究人員采集了本國8個省472個牧場737份發生水樣腹瀉、脫水和高死亡率小豬的糞便和腸道樣品，2007年11月至2008年3月期間，泰國朱拉隆功大學和泰國農業大學獸醫診斷實驗室的研究人員采集了本國8個省24個豬場發生腹瀉的小豬糞便和腸道樣品，分析了其中PEDV的部分S糖蛋白基因序列，均發現部分毒株的序列與中國毒株的序列類似。2011年1～10月，華中農業大學的研究人員對來自中國9個豬場仔豬的嚴重腹瀉樣品中S糖蛋白基因全序列進行了分析，發現部分毒株序列與來自韓國的毒株序列類似?？梢妵H之間疫病的傳播在加劇。

4 其他與腹瀉相關的病原

4.1 輪狀病毒

庫旭鋼等 （2012）從來自湖北天門某豬場的A群輪狀病毒病原陽性糞樣中分離得到了3株豬輪狀病毒，經序列同源性分析發現，其與人源輪狀病毒具有高度相似性，推測它們之間可能發生基因重組。該病毒可能在人畜間交叉傳播，提示豬場產房中的女員工應注意生物安全，防止將輪狀病毒傳染給小孩。

4.2 圓環病毒

從以下四個案例可以確證圓環病毒可引起新生仔豬腹瀉。一是2011年2月28日至4月9日，對我國28個豬場的546份7～8日齡的仔豬腹瀉樣品進行PCR檢測，可檢測到圓環病毒2型感染；二是采用免疫組化方法經口鼻途徑將圓環病毒毒株接種給健康仔豬，接種仔豬從感染后14天開始出現間斷腹瀉；三是仔豬免疫圓環病毒疫苗可以得到保護，母豬免疫圓環病毒疫苗，仔豬也可以通過母源抗體得到保護；四是在母豬血清中檢測圓環病毒的抗體，血清做1:40稀釋，若OD值大于1.0，將稀釋的血清于仔豬腹瀉早期注射2～3 mL，可以達到一定的治療效果。

利用免疫組化方法發現PCV2在腹瀉仔豬的腦和小腸中均有分布，病毒見于神經元的胞核和胞質內，細胞核呈陽性，少量的小膠質細胞呈陽性，小腸黏膜固有層內淋巴細胞和樹突狀細胞胞漿呈陽性。

4.3 博卡病毒

博卡病毒是一種新型的細小病毒，網上曾傳言從腹瀉豬糞便中分離到此病毒，是此次腹瀉的主要致病病毒。華中農業大學動物醫學院的研究人員測定了博卡病毒的全基因組序列，同時利用分離到的博卡病毒毒株進行了人工感染試驗，發現仔豬并沒有出現水樣腹瀉癥狀。在腹瀉和非腹瀉樣品中博卡病毒的檢出率也沒有顯著差異。可見，博卡病毒與當前流行的腹瀉病沒有多大關系。

5 當前腹瀉病的防控建議

5.1 實施嚴格的生物安全措施

糞便傳播是此次腹瀉病的主要傳播途徑。要杜絕傳染源的引入，一旦發現病豬，迅速隔離。車輛用戊二醛消毒，產房空欄徹底消毒后再引入新的母豬。建議使用干粉消毒劑消毒，既可進行表面消毒，又能保持產房干燥。豬場內人員不準串欄，用具要嚴格分開。

表1 我國不同研究機構對仔豬病毒性腹瀉的流行病學調查

5.2 返飼僅能作為應急措施

返飼就是將含腹瀉仔豬糞便的腸道再感染母豬，應在仔豬出現癥狀后18小時內進行，1頭仔豬的腸道可感染15頭母豬。但要確保腹瀉樣品中沒有其他病毒感染，如豬瘟病毒、藍耳病病毒等。返飼易使傳染源在豬舍中循環傳播，不宜在豬場反復使用，僅能作為應急措施。只能在母豬進入產房前感染，接種母豬出現腹瀉癥狀，說明感染成功。

5.3 對癥治療

及時或盡早補充水分、電解質和維生素，防止酸中毒。卵黃抗體制品可以用來治療，但不宜作為常規免疫制劑，微生態制劑如乳酸桿菌、蠟樣芽孢桿菌等可改善紊亂的腸道微生物區系，進而有益于仔豬的腸道健康，利于康復。

5.4 加強免疫

每年11～12月，接種TGE-PED二聯滅活苗，初產母豬一定要完成兩次免疫，謹慎使用三聯活疫苗，活疫苗要注意劑量足夠及免疫保護期。目前研發的新型腹瀉病疫苗以提高黏膜免疫為指導原則，在使用此類疫苗時，應注意在母豬產前拌料使用，仔豬出生后口服1～2次。同時，仔豬滴鼻免疫偽狂犬病 （HB-98株）基因缺失疫苗，可以誘導產生干擾素，提升免疫力。疫苗使用前后3天，飼料中不能使用抗生素或抗菌中草藥。