底物因素對化學發光法檢測促甲狀腺激素的影響

田軍 權城 王麗彬 宋小海

在臨床實驗中，要求所有項目均應該嚴格按照標準化操作程序(SOP)進行操作，但實際工作中由于人為或外界因素，實驗進程往往會受到干擾，對結果造成一定影響。促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標，化學發光法因具有快速、準確、靈敏度高等特點而被臨床普遍接受，但在全自動儀器沒有普及的情況下，試劑加注過程通常會有人為因素的存在。底物加注為測量的最后一步，關系到最終的檢測結果，因此，筆者對本院部分甲狀腺疾病患者的血液標本進行了分組研究，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 試劑 北京科美東雅生物技術有限公司生產的化學發光促甲狀腺激素(TSH)定量試劑盒(批準文號，國藥準字S20040080)。兩個level質控由同一廠家提供。

1.2 儀器 GloRunner化學發光檢測儀(美國原裝);DEMII型自動酶標洗板機(北京產);BL－ZDQ－OA微量振蕩器(北京產)。

1.3 檢測 留取25份甲狀腺疾病患者血液，按不同方式分組，同時進行檢測。兩個level質控在控，證明本次試驗TSH檢測結果準確可靠。

1.4 統計學處理 由操作軟件自動得出TSH具體數值，組間差異由于數據不符合正態分布，采用秩和檢驗，所有結果均由SPSS 11.5軟件計算所得。

2 結果

測試階段的底物分別為1 h、30 min和10 min前配置，并各自在加注后5 min、10 min、30 min、1 h和 2 h檢測，得出各組促甲狀腺激素的結果，其檢測結果見表1。

以底物10 min前配置，加注后10 min檢測為標準組，各分組與其進行秩和檢驗，差異有統計學意義(P＜0.05)的部分檢測結果如下:底物配置時間1 h檢測延遲時間1 h(P=0.040);底物配置時間1 h檢測延遲時間2 h(P=0.000);底物配置時間30 min檢測延遲時間1 h(P=0.027);底物配置時間30 min檢測延遲時間2 h(P=0.000);底物配置時間10 min檢測延遲時間1 h(P=0.000);底物配置時間10 min檢測延遲時間2 h(P=0.000)。

表1 不同分組下TSH的檢測結果中位數(μIU/ml)

3 討論

TSH是垂體前葉分泌的一種糖蛋白激素，其主要作用是調控甲狀腺細胞生長和甲狀腺激素合成與分泌。甲狀腺功能改變時，TSH的波動較甲狀腺激素更迅速顯著，是反映下丘腦－垂體－甲狀腺軸功能的敏感指標。臨床上多用于甲狀腺功能亢進(甲亢)和減退(甲減)的診斷、原發與繼發性甲減的鑒別診斷、檢測甲亢和甲減的治療效果、亞臨床甲亢的診斷以及垂體TSH瘤的實驗室診斷等。特別是對甲低的診斷，其價值約等于 FT4，好于 TT4、FT3和 TT3。

通過對以上數據的比較不難看出，測定促甲狀腺激素時，加注底物后檢測延遲時間對測定結果的影響是顯著的。本實驗中，所有1 h和2 h檢測組，其結果與標準組比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。其余分組無論底物何時配置(≤1 h)均與標準組較為一致(P＞0.05)。因此，筆者認為，在化學發光法檢測促甲狀腺激素的實驗中，無論底物何時配置(≤1 h)，都應在底物加注后規定時間內(≤30 min)進行檢測，否則都將會對結果造成影響。

筆者所采用的試劑盒，其說明書中關于底物的內容是:“化學發光底物液A、B使用前根據需要量等體積(1∶1)混合，現用現配。”及“必須于加化學發光底物液后的第5～30 min內測量。”說法較為含糊，不利于標準化操作的執行。通過本次試驗，說明筆者在測試中不按操作規程進行，不注重保養及試劑的混勻準備，其結果的偏差顯著，有統計學意義(P＜0.05)。

化學發光免疫測定敏感度高，甚至超過放射免疫分析。操作上的微小誤差也會導致結果上的偏離［1］。因此，筆者認為應該嚴格按照標準化操作程序(SOP)去做，選擇適當的底物配置時機，盡量避免檢測中系統誤差的出現。

［1］陶義訓．免疫學和免疫學檢驗［M］．第2版．北京:人民衛生出版社，1997:174．