猴頭菇多糖對TGF-β1抑制的T淋巴細胞增殖的影響

郭 焱，崔健麗，朱 娜

（1.長春中醫藥大學，吉林 長春 130117；2.吉林大學第四醫院）

猴頭菇多糖對TGF-β1抑制的T淋巴細胞增殖的影響

郭 焱1，崔健麗2＊，朱 娜1

（1.長春中醫藥大學，吉林 長春 130117；2.吉林大學第四醫院）

＊通訊作者

猴頭菇多糖對免疫系統的藥理作用已有報道［1－4］，但多是有關動物免疫功能的研究，而對人類免疫功能影響的報道尚不多見。本實驗從細胞水平研究猴頭菇多糖對TGF－β1抑制的T淋巴細胞的逆轉作用，為臨床輔助治療腫瘤提供實驗依據。

1 材料和方法

1.1 材料猴頭菇多糖、TGF-β1、淋巴細胞分離液、PHA、MTT等試劑均購自百賽生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 人外周血T淋巴細胞的分離 取正常人靜脈抗凝血10ml，淋巴細胞分離液分離外周血單個核細胞（PBMC）。PBMC經PBS洗滌3次后，加RPMI 1640完全培養液，于無菌培養皿黏附貼壁培養6 h，收集非貼壁細胞，即為淋巴細胞，用含100ml／L胎牛血清的RPMI1640培養液調整細胞密度為5×108／L，備用。

1.2.2 MTT法檢測猴頭菇多糖對TGF－β1抑制下T淋巴細胞增殖的作用 設對照組、TGF-β1組、猴頭菇多糖組。取密度為5×108／L的備用細胞，接種于96孔培養板，每孔100μl（含細胞數為5×104）。然后，對照組加100μl含100ml／L胎牛血清的RPMI1640培養液，TGF-β1組加入100μl含 TGF－β1的培養液，猴頭菇多糖組加入100μl含TGF-β1和含猴頭菇多糖的培養液，每組均設3個復孔，定容為200 μl，置CO2培養箱中分別培養24h、48h、72h，之后各組加PHA（終濃度5mg／L）繼續孵育42h。于實驗終止前每孔加入5g／L MTT10μl，繼續培養6h，棄上清液，每孔加入100μl DMSO，充分震蕩后，37℃孵育1h，用酶標儀于570nm波長測定A值。

細胞增殖率＝ （實驗組平均A值／對照組平均A值）×100%。

1.2.3 統計學分析 實驗數據用SPSS軟件進行方差分析兩兩比較，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

經TGF－β1作用不同時間后，T淋巴細胞的增殖受到抑制，猴頭菇多糖與TGF－β1共同作用后，T淋巴細胞的增殖率有了不同程度的回升（P＜0.01），但仍低于正常（圖1）。

圖1 猴頭菇多糖對TGF-β1抑制的T細胞增殖的影響

3 討論

多糖類成分抑制腫瘤生長已越來越受到人們重視。多糖作為藥物其細胞毒性小，在腫瘤治療時，它不像一般化學藥物直接殺傷腫瘤細胞，而是作為一種生物反應調節劑，促進細胞和體液免疫反應，達到抑制和消滅腫瘤細胞的效果。所以尋找高效生物反應調節劑是當今腫瘤免疫治療的主要方向之一［4］。本實驗結果顯示，猴頭菇多糖可使TGF-β1抑制的人T淋巴細胞功能有所恢復，增強機體的細胞免疫。

TGF-β1是介導腫瘤免疫逃逸最有效的免疫抑制分子，可明顯抑制T淋巴細胞增殖。T淋巴細胞介導的細胞免疫在抗腫瘤方面中起到很重要的作用，腫瘤細胞分泌的TGF－β1對T淋巴細胞的抑制成為腫瘤免疫逃逸的機制之一，如果能夠打破腫瘤對T淋巴細胞的這方面的抑制，就可以重新恢復機體一定的T淋巴細胞免疫功能，增強對腫瘤的殺傷作用［5，6］。

本研究結果可為猴頭菇多糖臨床輔助治療腫瘤的應用提供理論依據。

［1］樊偉偉，黃惠華.猴頭菇多糖研究進展［J］.食品科學，2008，29（1）：355.

［2］徐杭民，謝志慧，張蔚羽，等.猴頭菇多糖的免疫調節作用［J］.中國中西醫結合雜志.1994，14（7）：427.

［3］成 靜，祝壽芬.大刺猴頭（88）多糖的免疫調節功能［J］.衛生毒理學雜志，2001，15（3）：165.

［4］聶繼盛，祝壽芬.猴頭多糖抗腫瘤及對免疫功能的影響［J］.山西醫藥雜志，2003，32（2）：107.

［5］劉曉霞，陳劍華，陳育民，等.八珍湯對TGF－β1抑制的T淋巴細胞增殖及其活化影響［J］.細胞與分子免疫學雜志，2009，25（11）：1053.

［6］Kemeny DM，Macary PA.The growiong comp lexity of TGF2beta as aTcell regulator［J］.Immunology，2005，114 （4）：459.

1007－4287（2012）01－0048－02

2010－07－24）