膜式液基薄層細胞制作技術

孫 雁 金壽同 陳淑云

(江蘇省金壇市中醫(yī)醫(yī)院病理科 213200)

液基薄層細胞制片技術是指薄層制片自動裝置制備細胞學標本的技術。薄層制片自動裝置如同病理組織切片機一樣，只是制片的機器，此裝置在恒定的面積上均勻地分布著很薄的一層細胞，克服了傳統(tǒng)的制片技術存在的材料太厚、細胞重疊、背景模糊和染色不佳等問題。具有代表性的液基薄層細胞制作技術是沉降式液基薄層細胞制片技術和膜式液基薄層細胞制作技術。現(xiàn)就膜式薄層細胞制作技術介紹如下。

1 制片機制與技術特點

1.1 通過過濾膜將細胞樣本過濾，使細胞貼附在濾膜上，再通過負壓作用將濾膜上的細胞轉(zhuǎn)移到載玻片上，最后將細胞涂片放入固定液中固定。整個過程在制片機自動完成。

1.2 制片機中的過濾器是一個直徑為25mm的真空柱狀容器，下面為過濾膜，濾膜孔徑通常為5μm和7μm，分別用于非婦科細胞樣本和較大的婦科細胞樣本，可制成直徑2mm的細胞薄層，方便在直徑2mm區(qū)域進行觀察。

2 主要制片操作步驟

2.1 根據(jù)采集的細胞樣本類型，選擇對應的運行程序，機器進行自檢。

2.2 機器進入程序自動操作，直到細胞片移到含95%的乙醇固定液的瓶中。

2.3 手工取出細胞片集中到另一含有固定液的容器存放待染色，然后繼續(xù)下一例樣本制片操作。

2.4 將涂片進行巴氏染色。

3 制片質(zhì)量控制

3.1 血性的細胞標本在上機前應先進行去紅細胞處理:(1)經(jīng)平衡后放入離心機以2000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘;(2)吸出清夜后將5ml1%的冰醋酸加入到沉渣，振蕩5分鐘;(3)棄去冰醋酸后將原標本上清液加到沉渣里，混勻后即可放入制片機制片。

3.2 若標本量較少則直接將其倒入標本瓶內(nèi)，靜止15分鐘后制片。

3.3 痰液等黏液性標本可加入消化液進行消化處理。

3.4 對于胸腹水標本應在取樣時加入抗凝劑，若標本量較多，在前期處理時應取自然沉淀后底部的標本10 ～15ml。

3.5 制片前必須檢測是否裝載好樣本瓶、過濾器和載玻片，根據(jù)樣本類型選擇合適孔徑的濾膜。

3.6 95%的乙醇固定液需每天更換。

4 小結

膜式液基薄層細胞制片技術可明顯提高癌癥確診率，能為臨床提供可靠的診斷依據(jù)。在篩查宮頸癌方面由于傳統(tǒng)的巴氏染色涂片技術，采用TBS報告系統(tǒng)國際診斷標準，以得到了普遍認可。該技術用于痰液、尿液、漿膜腔積液也能提高惡性細胞的檢出率，為臨床治療提供可靠的診斷依據(jù)。但該技術也有不足之處，成本較高，不能在基層醫(yī)院普及。在技術方面一些問題還有待改進，如細胞固縮等

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