黑莓RuMYB10基因在果實由紅變黑過程中大量表達

據(jù)《果樹學報》2012年第5期《黑莓RuMYB10基因的克隆和表達》（作者陳清等）報道，從黑莓中克隆RuMYB10的編碼區(qū)全長序列，并分析其在黑莓果實發(fā)育過程中的表達情況與果實花青素苷積累的關(guān)系。以黑莓基因組DNA為模板，通過同源克隆和SON-PCR技術(shù)獲得了RuMYB10基因全長編碼序列（Accession No.：JQ359611）；并以黑莓果實mRNA為模板進行驗證。采用實時定量PCR技術(shù)檢測該基因在果實不同發(fā)育階段的表達水平。結(jié)果表明，該基因編碼區(qū)全長共1 837 bp，編碼216個氨基酸，推導蛋白分子質(zhì)量為2 4863 Da。具有MYB轉(zhuǎn)錄因子家族特有的R2R3保守序列。含有兩個內(nèi)含子，第2個內(nèi)含子長度為750 bp，占全長40.8%；在R3重復單元中存在與bHLH因子互作的“[DE]L x 2[RK]x 3Lx6L x 3R”序列；而促進花青素苷合成的MYB轉(zhuǎn)錄因子3個特征氨基酸殘基中的丙氨酸被絲氨酸取代。RuMYB10基因在黑莓果實發(fā)育后期，即果實變紅到最后變黑的過程中大量表達，與花青素苷的積累相一致。從黑莓中克隆到包含完整ORF的轉(zhuǎn)錄因子基因RuMYB10，具有 MYB因子家族結(jié)構(gòu)特征和bHLH因子結(jié)合域，且在果實花青素苷積累高峰期表達量最高。