S100B蛋白在高間接膽紅素血癥新生兒中的水平及意義

李紅新1，徐美玉，屠文娟1，吳尤佳

(1南通大學附屬常州市兒童醫(yī)院，江蘇常州 213003;2南通大學第一附屬醫(yī)院)

S100B蛋白是一種酸性鈣結(jié)合蛋白，主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的膠質(zhì)細胞、周圍神經(jīng)系統(tǒng)的雪旺細胞以及某些神經(jīng)元細胞、黑色素細胞、脂肪細胞中。當神經(jīng)細胞受到損傷時，大量的S100蛋白釋放入體液，因而成為腦損傷后的主要神經(jīng)化學標志物之一［1］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，膽紅素(TB)可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，導致神經(jīng)元細胞線粒體腫脹和蒼白，還可明顯破壞星形膠質(zhì)細胞功能。近年研究發(fā)現(xiàn)，TB的神經(jīng)毒性不僅與血清TB水平有關，還與患兒血腦屏障成熟度、游離TB梯度密切相關;而溶血、感染、酸中毒、小日齡等因素均為高間接膽紅素血癥的危險因素［2］，無上述高危因素的高間接膽紅素血癥患兒盡管血清TB水平很高，但腦脊液中TB的水平并不一定高，其神經(jīng)系統(tǒng)損傷并不一定嚴重。2008年6月～2011年6月，我們觀察了86例高間接膽紅素血癥新生兒血清S100B蛋白的水平，并探討其與膽紅素性腦損傷高危因素的關系。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇常州市兒童醫(yī)院收治的重度高間接膽紅素血癥新生兒86例，均符合沈曉明主編的《臨床兒科學》中關于新生兒黃疸干預推薦標準，將達到換血加光療的血清TB水平定義為新生兒重度高間接膽紅素血癥［3］。其中42例重度高間接膽紅素血癥新生兒，同時又伴有高危因素包括溶血(溶血三項試驗陽性16例)、感染(血清C反應蛋白或血培養(yǎng)異常但無中樞感染6例)、酸中毒(pH≤7.25 2例)、小日齡(≤3 d 11 例)、低蛋白(白蛋白≤30 g/L 7例)，符合其中一項或多項者為高危因素組(不包含早產(chǎn)兒、圍生期窒息缺氧以及有HIE、顱內(nèi)出血、中樞感染等其他腦損傷的新生兒)。另有44例重度高間接膽紅素血癥新生兒，但不伴有高危因素者為無高危因素組，其中母乳性黃疸29例、頭皮血腫導致的黃疸15例。高危因素組中，男22例、女20 例，胎齡(37.7 ±3.56)周，月齡(3.26 ±2.20)d，體質(zhì)量(2.78±0.93)kg;無高危因素組男 24 例、女 20例，胎齡(38.04±2.47)周，月齡(8.29±2.80)d，體質(zhì)量(3.37 ±0.65)kg。另選擇 2008 年 6月～2010年6月在我院住院的無黃疸新生兒30例(不包含早產(chǎn)兒、圍生期窒息缺氧以及有HIE、顱內(nèi)出血、中樞感染等其他腦損傷的新生兒)作為對照組，男17 例、女13 例，胎齡(38.09 ±2.97)周，月齡(9.29 ±2.70)d，體質(zhì)量(3.33 ±0.55)kg，先天性梅毒(需行腰穿以排除是否合并有神經(jīng)梅毒，結(jié)果正常者)12例、新生兒臍炎(需行腰穿以排除細菌性腦膜炎，結(jié)果正常者)18例。三組性別、年齡等具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 TB、S100B蛋白水平檢測 患兒入院后在家屬同意的情況下，于治療開始前，按照腰椎穿刺常規(guī)操作方法采集腦脊液0.5 mL，并于30 min內(nèi)送檢，應用日本產(chǎn)OLYMPUS AU400型全自動生化儀測定腦脊液TB水平，試劑為日本大阪和光純藥株氏會社產(chǎn)品;同時抽取股靜脈血2 mL，3 600 r/min離心15 min，取血清0.5 mL，放入－40℃冰箱保存待測，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中S100B蛋白水平，試劑盒由上海天呈生物醫(yī)學有限公司提供，操作按說明書進行。

1.2.2 聽力篩查及新生兒行為神經(jīng)測定(NBNA評分) 采用GSI AUDIOscreener聽力篩查儀，由專人進行瞬態(tài)誘發(fā)耳聲發(fā)射測試，以4個頻帶中3個頻帶信噪比≥3 dB為正常。新生兒NBNA測定及評分方法按照鮑秀蘭教授制定的方法［4］進行，測定均在患兒吃奶后1 h，從睡眠狀態(tài)開始進行，室溫控制在22～27℃，室內(nèi)保持半暗、安靜。檢查工具有手電筒、長方形紅色塑料盒和小紅球各一個，檢查者參加過NBNA學習班并考核合格。20項滿分為40分，≤35分為異常。治療方案參照中華醫(yī)學會兒科學分會2010年制定的新生兒黃疸診療原則［5］。所有患兒采用該治療原則，故對結(jié)果影響較小。

1.2.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，結(jié)果比較采用單因素方差分析、q檢驗;計數(shù)資料比較采用χ2檢驗;相關性分析采用直線相關分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組TB、S100B、NBNA評分、聽力篩查結(jié)果比較 見表1。

2.2 TB與血清S100B、NBNA評分的相關分析高危因素組血清與腦脊液TB水平呈正相關(r=0.63，P ＜0.05)，無高危因素組血清與腦脊液 TB 水平無相關性(r=0.13，P ＞0.05)。高危因素組腦脊液TB水平與血清S100B、NBNA評分均呈負相關(r分別為 －0.55、－0.58，P 均 ＜0.05)，無高危因素組腦脊液TB水平與血清S100B、NBNA評分無相關性(r分別為0.05、0.08，P 均 ＞0.05)。

表1 各組TB、S100B、NBNA評分及聽力篩查結(jié)果比較(±s)

表1 各組TB、S100B、NBNA評分及聽力篩查結(jié)果比較(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;與無高危因素組比較，#P ＜0.05

組別 n TB(μmol/L)血清 腦脊液S100B(μg/L)NBNA評分(分)聽力篩查異常［例(%)］高危險因素組 42 305.0 ±35.2＊＊ 10.8 ±3.9*# 1.28 ±0.23*# 35.07 ±1.26*# 10(23.8)*#無高危因素組 44 295.9±47.8＊＊ 6.1±0.8* 0.38±0.04 37.82±1.28 2(4.7)對照組 30 59.2 ± 7.7 3.9 ±0.6 0.33 ±0.05 38.09 ±0.97 1(3.3)F 5.49 4.45 4.74 3.86 10.20 P ＜0.01 ＜0.05 ＜0.01 ＜0.05 ＜0.01

3 討論

TB是一種極性化合物，在血漿中有三種不同形式存在，即單價陰離子、二價陰離子、TB酸鹽。生理情況下，低濃度的間接TB通過一個穩(wěn)定的血腦屏障后在腦細胞沉積，往往完全可逆且無害。但在某些病理情況下，血腦屏障受損，二價陰離子與白蛋白連接的復合物也可通過血腦屏障，并與神經(jīng)細胞膜的極性基因結(jié)合。當機體處于低pH值、低白蛋白、缺氧、低溫等時，可使中樞神經(jīng)細胞內(nèi)氧化酶活性下降，TB沉淀率加大，最終引起不可逆性腦損害。近幾年，TB對神經(jīng)元突觸傳遞的研究發(fā)現(xiàn)，其毒性作用可分為聚集、結(jié)合、沉積三個步驟，在早期可出現(xiàn)亞臨床型TB神經(jīng)中毒癥，到后期病變轉(zhuǎn)為不可逆，臨床可出現(xiàn)典型神經(jīng)系統(tǒng)異常癥狀，即為TB腦病，多留有后遺癥。膽紅素神經(jīng)毒性在新生兒期的臨床表現(xiàn)有的非常不典型，即使發(fā)生膽紅素腦病的患兒也有15%沒有明顯神經(jīng)系統(tǒng)癥狀［6］，而TB對神經(jīng)的毒性既有劑量依賴，又有時間依賴，及時預防和治療，可以減輕或消除膽紅素神經(jīng)毒性。因此，對膽紅素神經(jīng)毒性的早期監(jiān)測尤為重要。國內(nèi)外學者大量研究發(fā)現(xiàn)，低血漿白蛋白、小日齡、溶血、膿毒癥、酸中毒等都是加重膽紅素神經(jīng)毒性的高危因素［7］，并建議對存在高危因素的黃疸患兒進行密切監(jiān)測。

當腦組織受損時，一些神經(jīng)特異性的生化物質(zhì)可以從損傷的神經(jīng)細胞中釋放并通過血腦屏障進入體循環(huán)，觀察高膽紅素血癥患兒血液中神經(jīng)生化指標的變化，對早期直接而準確地了解腦損傷程度，具有重要的臨床意義。S100蛋白是一種酸性鈣結(jié)合蛋白，是腦損傷后的主要神經(jīng)化學標志物，在動物實驗和臨床研究中已得到證實［8］。神經(jīng)生化指標檢測在缺氧缺血性腦病等腦損傷中已有較多應用，而用來評價膽紅素神經(jīng)毒性仍處于初步階段［9］。本研究顯示，高危因素組血清及腦脊液TB、血清S100B均高于無高危因素組、對照組，表明新生兒期重度高間接膽紅素血癥合并有高危因素的患兒可造成神經(jīng)系統(tǒng)損傷，而不伴有高危因素的高間接膽紅素血癥患兒神經(jīng)系統(tǒng)損傷不明顯。相關分析顯示，高危因素組血清與腦脊液TB水平正相關，而無高危因素組血清與腦脊液TB水平無相關性。因此，對合并有高危因素的高間接膽紅素血癥患兒血清S100B蛋白和腦脊液TB水平的檢測，不僅可以更好地指導臨床治療和神經(jīng)系統(tǒng)的早期干預，還可以避免對無高危因素的高間接膽紅素血癥患兒的過度治療［10］。

本研究結(jié)果顯示，高危因素組血清及腦脊液TB、血清S100B、聽力篩查異常率均高于無高危因素組、對照組。這表明新生兒期重度高間接膽紅素血癥會對同期合并有高危因素的患兒神經(jīng)系統(tǒng)造成損傷，而不伴有高危因素的高膽紅素血癥患兒神經(jīng)系統(tǒng)損傷不明顯，如果僅靠血清TB水平來干預黃疸的治療，顯然是不合理，如果需要找尋更合理的干預指標，可以結(jié)合腦脊液TB水平，但是這需要對患兒進行有創(chuàng)傷的腰穿檢查，也難以讓家長接受，這時可在入院抽血時，同時檢測血清S100B蛋白水平，可以更好地指導臨床治療和神經(jīng)系統(tǒng)的早期干預［11］。目前判斷新生兒神經(jīng)損傷多用NBNA評分，但是受到時間的限制和主觀因素較多，評分難以保證其準確性和客觀性。本研究通過培訓的專人進行NBNA評分，結(jié)果顯示，高危因素組NBNA評分低于無高危因素組、對照組，且其腦脊液TB、血清S100B水平與NBNA評分均呈負相關，而無高危因素組無相關性，提示腦脊液TB、血清S100B水平對預測足月新生兒高間接膽紅素血癥腦損傷有一定的參考價值。另外，對高間接膽紅素血癥患兒進行聽力篩查檢測也可發(fā)現(xiàn)，有高危因素的高間接膽紅素血癥患兒聽力篩查的異常率明顯高于無高危因素組、對照組。研究還發(fā)現(xiàn)，高危因素組中有12例血清S100B蛋白水平明顯高于其他30例，其中有8例為溶血性黃疸，可能與該病發(fā)生日齡較小，且常合并有低蛋白血癥有關，但由于例數(shù)較少未做進一步分析。

綜上所述，有高危因素的高間接膽紅素血癥新生兒可引起神經(jīng)系統(tǒng)損傷，應早期干預治療。

［1］王效德，郭素香.NSE、S100B蛋白在CNS損傷中的研究進展［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2011，13(9):121-124.

［2］姜敏，羅潔，邵芳，等.新生兒重癥高膽紅素血癥臨床危險因素分析［J］.中國新生兒科雜志，2009，24(1):18-21.

［3］沈曉明.臨床兒科學［M］.3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:197.

［4］張偉忠，張維芳，熊素勤，等.新生兒行為測定在治療高膽紅素血癥的指導意義［J］.航空航天醫(yī)藥，2010，21(6):896-897.

［5］劉義，杜立中.新生兒黃疸診療原則的專家共識解讀［J］.中華兒科雜志，2010，48(9):685.

［6］余楠.新生兒膽紅素腦病早期診斷的研究進展［J］.重慶醫(yī)學，2010，39(17).2381-2384.

［7］王巖，韓進天，蘇萍.新生兒膽紅素腦病臨床危險因素研究［J］.中國全科醫(yī)學，2010，13(27):3032-3034.

［8］趙振林，趙曉勇，黃富，等.腦脊液中S100B蛋白與昏迷患者預后的關系［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2010，12(6):15-17.

［9］段江，梁琨，楊蕊，等.高膽紅素血癥足月新生兒血清S100BB蛋白的變化及意義［J］.醫(yī)學信息，2007，20(1):125-129.

［10］黃瑛.新生兒病理性黃疸對機體的損害及其防治研究進展［J］.實用兒科臨床雜志，2011，26(2):83-86.

［11］李紅新，趙靜，屠文娟，等.新生兒期重度高間接膽紅素血癥對神經(jīng)系統(tǒng)損傷的早期家庭干預［J］.中國婦幼保健，2011，26(8):1170-1171.