維持性血液透析患者脂代謝因子水平初探

馬立萍，孟令權(quán)，鄧琳琪，邸志鵬

（中國石油天然氣集團公司中心醫(yī)院 血液凈化中心，河北廊坊 065000）

脂肪細胞通過分泌多種細胞因子對血糖水平和能量代謝進行調(diào)節(jié)，鋅α2糖蛋白 （zinc-α2-glycoprotein，ZAG）在2004年被確認為脂肪細胞分泌的一種新型脂質(zhì)動員因子[1]，相對分子質(zhì)量為43×103，在維持體質(zhì)量、調(diào)節(jié)脂肪代謝和能量平衡及胰島素抵抗方面都具有極其重要的作用。最近的研究多集中于ZAG與代謝性疾病的關(guān)系，關(guān)于終末期腎臟病患者血清ZAG的研究國內(nèi)尚未見報道，腎功能的衰竭對ZAG的影響可能與其他脂肪因子相似，即腎臟可能對ZAG的清除降低，為了驗證這一假設(shè)，我們檢測維持性血液透析（hemodialysis，HD）患者和正常對照組血清ZAG水平及血糖、血脂和脂肪因子的水平，以求了解維持性HD患者ZAG水平的改變及其對HD患者代謝的影響。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選擇中國石油天然氣集團公司中心醫(yī)院進行治療的維持性血液透析患者50例，其中男24例、女26例；透析時間均＞6個月，每周透析2～3次，每次4～4.5h。使用碳酸氫鹽透析液，透析液流量為 500ml/min，血流量為 180～300ml/min，透析液溫度36.5℃。原發(fā)病為：慢性腎小球腎炎15例、糖尿病腎病10例、高血壓腎病8例、多囊腎5例、慢性腎盂腎炎3例、痛風(fēng)腎3例、狼瘡性腎炎2例、慢性間質(zhì)性腎炎1例、藥物性腎病1例、原因不明2例。選擇30例門診健康體檢者建立正常對照組，其中男15例、女15例；均腎小球濾過率＞60ml/min，排除18歲以下或70歲以上、臨床有明顯感染、惡性腫瘤的患者。表1示，2組年齡、性別分布均無顯著性差異（均P＞0.05）。

1.2 臨床資料和生化數(shù)據(jù)

血液透析前空腹采集靜脈血，應(yīng)用美國R&D Systems公司ELISA試劑盒檢測ZAG、瘦素和脂聯(lián)素水平，檢測步驟按說明書操作。同時檢測尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、空腹血糖（FG）、空腹胰島素（FIns）、總膽固醇（TC）、游離脂肪酸（FFA）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL），胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）計算方法為：空腹血糖（FG）×空腹胰島素（FIns）/22.5。 并收集患者性別、年齡、透析持續(xù)時間和體重指數(shù)（BMI）等資料。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

全部數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析處理。組間計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson檢驗。以HD、年齡、性別、糖尿病、FIns、瘦素和脂聯(lián)素水平作為自變量，ZAG水平作為因變量，進行多元線性回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 2組基線水平及臨床生化指標(biāo)的比較

表1示，HD組血清ZAG水平顯著高于正常對照組（P＜0.01），約為正常對照組的 2倍，其中BMI、BUN、Cr、 腎小球濾過率 （GFR）、TG、FFA、HDL、LDL、瘦素和脂聯(lián)素水平2組間均存在顯著性差異（均 P＜0.01）。

表1 2組基線水平及臨床生化指標(biāo)的比較

2.2 相關(guān)性分析結(jié)果

Pearson相關(guān)性分析可見，正常對照組血清ZAG 水平與 FIns （r=-0.457，P=0.011）、HOMA-IR（r=-0.387，P=0.034）、瘦素（r=-0.461，P=0.010）呈負相關(guān)，與 TG（r=0.445，P=0.014）呈正相關(guān)；HD組ZAG水平與BMI（r=-0.332，P=0.022）和瘦素（r=-0.334，P=0.018）負相關(guān)，與脂聯(lián)素呈正相關(guān)（r=0.431，P=0.002），其余指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。

2.3 多元回歸分析結(jié)果

以HD組為研究對象，多元線性回歸分析顯示：瘦素（β=-0.226，P＜0.01）和脂聯(lián)素（β=0.301，P＜0.01）是血清ZAG水平的獨立影響因素。

3 討論

1961年由Burgi等[2]首次從正常人血清庫恩第6組分 （Cohn′s FractionⅥ）中用鋅鹽沉淀分離純化得到一種可溶性糖蛋白，電泳位于α2-球蛋白區(qū)，故稱為鋅α2糖蛋白。隨后又從腫瘤惡病質(zhì)患者的尿液中分離得到一種蛋白質(zhì)因子[3]，其氨基酸序列，電泳遷移率和生物功能方面與血ZAG完全一致[4]，均可促進脂肪分解，并與惡性腫瘤患者惡病質(zhì)密切相關(guān)。2004年發(fā)現(xiàn)ZAG在小鼠脂肪細胞大量表達，證明它是繼TNF-α、瘦素和脂聯(lián)素等之后由脂肪細胞 （包括皮下和內(nèi)臟脂肪細胞）分泌并參與能量代謝的脂肪因子[1]，引起了國內(nèi)外學(xué)者的高度關(guān)注。ZAG主要存在于血漿，正常人血漿ZAG濃度是25～140mg/L，并可能隨年齡的增加而增加。最近的研究多集中于ZAG與代謝性疾病關(guān)系，關(guān)于終末期腎臟病患者血清ZAG的研究國內(nèi)尚未見報道，我們的研究是國內(nèi)首次關(guān)于維持性HD患者ZAG水平的研究。在我們的研究中發(fā)現(xiàn)ZAG水平在HD組顯著高于正常對照組，與國外研究結(jié)果一致[5]。我們并未在HD組發(fā)現(xiàn)ZAG與GFR、BUN和Cr之間存在相關(guān)性，推測腎臟的清除在ZAG的代謝中具有重要的作用，即腎功能衰竭后，ZAG代謝清除降低，水平升高，因此未來關(guān)于ZAG的研究應(yīng)考慮腎功能對其水平的影響。

ZAG對脂代謝的影響可以分為2個方面，即ZAG可以促進脂肪的分解，同時促進脂肪的利用。腹腔注射ZAG后，小鼠血清中FFA和TG水平顯著增加[6]。Rolli等[7]研究發(fā)現(xiàn)給予滅活ZAG等位基因的小鼠高脂飲食后，也發(fā)現(xiàn)脂肪分解降低。ZAG通過上調(diào)解耦聯(lián)蛋白，進而激活細胞膜上β3腎上腺素受體，活化細胞內(nèi)cAMP信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，促進脂肪分解[8]。人體學(xué)研究發(fā)現(xiàn)中國人群的血清ZAG水平與血清TG呈顯著正相關(guān)，多元線性回歸分析顯示ZAG是TG的獨立影響因素[8]。我們發(fā)現(xiàn)正常對照組中ZAG與TG呈明顯正相關(guān)關(guān)系，但是HD組中ZAG與脂代謝各項指標(biāo)間均不存在相關(guān)性，我們猜測是否為腎衰竭后ZAG的升高對脂肪的分解和利用作用的影響程度不同所導(dǎo)致。

在我們的研究中正常對照組ZAG與FIns、HOMA-IR之間呈顯著負相關(guān)，HD組中未發(fā)現(xiàn)ZAG與FIns、HOMA-IR之間存在相關(guān)性，其原因可能是腎衰竭及HD治療對胰島素代謝和敏感性產(chǎn)生了影響，或者是明顯升高的ZAG水平導(dǎo)致其影響胰島素抵抗機制發(fā)生了改變。

脂肪組織作為一個內(nèi)分泌器官分泌多種脂肪因子，如瘦素、腫瘤壞死因子α、脂聯(lián)素、抵抗素等，大量研究已證實瘦素可以調(diào)節(jié)攝食中樞，抑制食欲，減輕體質(zhì)量；脂聯(lián)素具有調(diào)節(jié)脂代謝的作用；ZAG與瘦素和脂聯(lián)素之間存在密切聯(lián)系。研究[1]發(fā)現(xiàn)，移植能高分泌ZAG的MAC16腫瘤的小鼠，其脂肪組織中瘦素mRNA的表達被抑制了33倍。過度表達的ZAG蛋白可使脂聯(lián)素mRNA的表達增加2～3倍[9]，在肥胖癥人群中血清和脂肪組織中ZAG水平與脂聯(lián)素呈明顯正相關(guān)，與瘦素水平呈明顯負相關(guān)[10]。我們的研究結(jié)果也說明，ZAG與瘦素和脂聯(lián)素之間的相互作用機制在HD患者中依然存在。

[1]Bing C，Bao Y，Jenkins J，et al.Zinc-alpha2-glycoprotein，a lipid mobilizing factor，is expressed in adipocytes and is up-regulated in mice with cancer cachexia[J].Proc Natl A-cad Sci USA，2004，101（8）：2500-2505.

[2]Burgi W，Schmid K.Preparation and properties of Zn-alpha 2-glycoprotein of normal human plasma[J].J Biol Chem，1961，236：1066-1074.

[3]Beck SA，Mulligan HD，Tisdale MJ.Lipolytic factors associated with murine and human cancer cachexia[J].J Natl Cancer Inst，1990，82（24）：1922-1926.

[4]Hirai K，Hussey HJ，Barber MD，et al.Biological evaluation of a lipid-mobilizing factor isolated from the urine of cancer patients[J].Cancer Res，1998，58（11）：2359-2365.

[5]Philipp A，Kralisch S，Bachmann A，et al.Serum levels of the adipokine zinc-alpha2-glycoprotein are increased in chronic hemodialysis[J].Metabolism，2011，60（5）：669-672.

[6]RussellST，Zimmerman TP，Domin BA，etal.Induction of lipolysis in vitro and loss of body fat in vivo by zinc-alpha2-glycoprotein[J].Biochim Biophys Acta，2004，1636（1）：59-68.

[7]Rolli V，Radosavljevic M，Astier V，et al.Lipolysis is altered in MHC class I zinc-alpha （2）-glycoprotein deficient mice[J].FEBS Lett，2007，581（3）：394-400.

[8]Sanders PM，Tisdale MJ.Effect of zinc-alpha2-glycoprotein（ZAG）on expression of uncoupling proteins in skeletal muscle and adipose tissue[J].Cancer Lett，2004，212（1）：71-81.

[9]Gohda T，Makita Y，Shike T，et al.Identification of epistatic interaction involved in obesity using the KK/Ta mouse as a Type 2 diabetes model：is Zn-alpha2 glycoprotein-1 a candidate gene for obesity?[J].Diabetes，2003，52（8）：2175-2181.

[10]Marrades MP，Martinez JA，Moreno-Aliaga MJ.ZAG，a lipid mobilizing adipokine，is downregulated in human obesity[J].J Physiol Biochem，2008，64（1）：61-66.