孫慶弟 王京昆 陸 瑛
1.云南省藥物研究所,云南 昆明 650101;2.昆明醫學院,云南 昆明 650101
扶正固本膏是中藥復方制劑,具有培元固本、扶正祛邪之功效,主治腎陽不足。臨床用于腎陽不足引起的腰膝酸軟、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲減退、夜尿頻多等癥。本研究采用正常小鼠連續灌胃給予扶正固本膏15天,觀察其對小鼠免疫功能的調節作用。
1.1 供試品
扶正固本膏,棕褐色稠厚半流體,批號20091227,10-15天為一個療程。供試品輔料對照:棕黃色流體,批號:20100201。由本所科研管理部提供;給藥時,高劑量組直接使用,低、中劑量組用滅菌純化水配成約0.34g/ml、0.68g/ml的藥液,使用前充分混勻。
1.2 實驗動物
SPF級昆明種小鼠60只,雌雄各半,體重29~32g,由昆明醫學院實驗動物中心提供,許可證號:SCXK(滇)2005-0008,發證單位:云南省科學技術廳。
1.3 環境條件
溫度范圍:20~26℃ (日溫差范圍≤4℃);濕度范圍:40%~70%;換氣次數:10-15次/h;氣流速度:0.1-0.2m/s;壓強梯度:20Pa;空氣潔凈度:10000級;氨濃度(動態):0mg/m3;照明:12h:12h明暗交替;動物照度:18Lx;工作照度:376Lx;噪音:52dB。實驗動物環境及設施檢測報告編號:J201003031,檢測單位:云南省醫療器械檢定所。實驗動物使用許可證:SYXK(滇)2005-0001,發證單位:云南省科學技術廳。
1.4 實驗儀器 L104型電子分析天平,梅特勒-托利多儀器 (上海)有限公司;JJ2000型電子天平,常熟雙杰測試儀器廠;1500全波長酶標儀,芬蘭Thermo electron corporation。
1.5 統計方法 用SPSS17.0 for Windows軟件進行統計分析。計量資料正態分布、方差齊用單因素方差分析,偏態分布或方差不齊用秩和檢驗。統計結果以x±SD表示,檢驗水準a=0.05。
用Excel進行隨機區組設計法,分為陰性對照組、輔料對照組、扶正固本膏低、中、高劑量組,每組10只,雌雄各半。陰性對照組給予滅菌純化水,輔料對照組給予扶正固本膏輔料,給藥組按6.8、13.6、27.2g/kg給予扶正固本膏,各組均按20ml/kg連續給藥15天。
SPF級昆明種小鼠50只,雌雄各半,隨機分為陰性對照組、輔料對照組、扶正固本膏低、中、高劑量組,每組10只。陰性對照組給予滅菌純化水,輔料對照組給予扶正固本膏輔料,給藥組按6.8、13.6、27.2g/kg給予扶正固本膏,連續給藥15天。末次給藥60min,按0.1 ml/10 g小鼠尾靜脈注射20%印度墨水,分別于注射后2、12 min用毛細管于小鼠眼眶靜脈叢取血10ul置于2ml 0.1%NaCO3溶液中混勻,用1500全波長酶標儀于波長680 nm處測定吸光度 (A);頸椎脫臼處死小鼠取肝、脾、胸腺稱質量,按公式計算廓清指數 (K)、吞噬系數 (a)和臟器系數。K=(lgA1-lgA2)/(t2-t1)=(lgA1-lgA2)/10,α =K1/3×體質量/(肝質量+脾質量),臟器系數=臟器質量/體質量[1]。

表1 對小鼠體重的影響 (n=10)

表2 對小鼠免疫器官的影響 (n=10)

表3 對小鼠碳粒廓清的影響 (n=10)
表1顯示,連續灌胃給予小鼠扶正固本膏15天,對小鼠體重無明顯影響,各組動物體重組間比較無顯著性差異(P>0.05);表2顯示,中、高劑量組脾臟指數與陰性對照組比較有顯著性差異 (P<0.05/P<0.01),說明扶正固本膏可增加小鼠脾臟指數;表3顯示,低、中、高劑量組廓清指數及吞噬系數與陰性對照組比較有顯著性差異 (P<0.05/P<0.01),說明扶正固本膏能增強巨噬細胞的吞噬功能,加速碳粒的清除。
隨著社會的發展,現代生活節奏的加快,人們面臨的壓力也日益沉重,激烈的社會競爭使人心理應激明顯增多。先天原因,后天原因:藥誤、久病、七情所傷、房勞、飲食等多種因素導致人群出現腎陽虛。
扶正固本膏具有培元固本、扶正祛邪之功效,主治腎陽不足。臨床用于腎陽不足引起的腰膝酸軟、畏寒肢冷、神疲乏力、性欲減退、夜尿頻多等癥。
中醫學認為,腎為先天之本,腎藏精是腎的主要生理功能之一。精是構成人體的基本物質,也是人體各種功能活動的物質基礎。精能化氣,腎精所化之氣稱為“腎氣”。腎的精氣盛衰,關系到生殖和生長發育的能力。故古代醫家認為腎為五臟之本[2]。腎臟有病必影響其他臟腑之功能,反之臟腑有病,久必及腎。因此,腎氣盛衰決定著人體的健康狀況。腎氣充盛,則五臟六腑功能正常,人體正氣充盛則健康無病[3]。所謂正氣就是人體的功能活動和對外界環境的適應能力,是抗病能力和康復能力,是機體識別和排除外源性異物維持自身生理平衡與穩定的能力。而現代免疫學認為,人體的免疫功能表現為防御、自穩、監視3個方面。因此,正氣與現代免疫理論密切相關。中醫學認為,腎為先天之本,為正氣之根,說明了腎與免疫功能關系更為密切。大量研究表明,腎虛患者常有免疫功能的紊亂,而補腎藥有一定的免疫調節作用[4]。
人體免疫是人體對外界的病原微生物等的防御機能,或者說是防御系統。在正常情況下,它能夠保證人體不受外界病原微生物的侵害。通常說的人體免疫力就是指人體的免疫系統抵御外來病原微生物等侵害的能力。在人體免疫力正常的情況下,人體自身能夠抵御相當多的病菌的侵害,避免對人體造成損傷[5]。
機體的免疫系統是由非特異性免疫、體液免疫和細胞免疫共同構成的防御系統,它通過識別、吞噬、呈遞和分泌細胞因子或形成抗體來清除外來病原微生物和體內的異常細胞,對于維護體內環境具有十分重要的意義[6]。脾、胸腺是小鼠重要的免疫器官,觀察其質量的變化,可以直接地反應小鼠免疫功能的變化;碳粒廓清實驗是通過靜脈注射一定大小的顆粒物質,其迅速被肝、脾等器官內網狀內皮細胞吞噬而使其在血漿濃度降低,從而可以了解整個單核巨噬細胞系統的吞噬功能[7]。
脾在胚胎期是重要的造血器官,出生后造血功能停止,但仍然是血細胞尤其是淋巴細胞的再循環場所,脾還是發生免疫應答的重要基地。此外,脾還有兩個顯著的特點:(1)產生抗體,脾富含B細胞和漿細胞,因此是全身最大的抗體產生器官,尤其是產生IgM和IgG,其數量對調節血清抗體水平起很大作用;(2)分泌體液因子,脾可以合成補體 (C5和C8等)和備解素等重要的免疫效應分子。長期以來人們對胸腺的功能不甚了解,直到60年代初Miller和Good分別用切除新生小鼠和家兔胸腺的辦法證明了胸腺的免疫功能。胸腺能訓化T細胞、分泌胸腺激素、促進肥大細胞發育、調節機體的免疫平衡,維持自身的免疫穩定性,是重要的中樞免疫器官,也是T淋巴細胞分化成熟的場所。
本實驗結果顯示,扶正固本膏可增加正常小鼠脾臟質量,能增強巨噬細胞的吞噬功能,加速碳粒的清除。提示,扶正固本膏對小鼠體液免疫和非特異性免疫均有一定增強作用。
[1]岑曉江,侯思名等.海楓藤水煎液對小鼠免疫功能的影響[J].細胞與分子免疫學雜志,2011,27(6).
[2]沈自尹.從腎本質研究到證本質研究的思考與實踐[J].上海中醫藥雜志,2000(4):44-47.
[3]顏亭祥,李震,陶漢華等.“勞倦過度房室不節”腎陽虛模型小鼠免疫功能的觀察[J].山東中醫藥大學學報,2007,31(1):79-81.
[4]魯珽,潘永明.抗衰老片對實驗性腎陽虛小鼠免疫功能的影響[J].甘肅中醫學院學報,2011,28(2).
[5]徐志毅.復方枸杞袋泡茶對免疫力低下小鼠免疫功能的影響[J].臨床合理用藥,2011,4(3C):27.
[6]韓峰,陳建萍,謝婷等.益甘顆粒劑對小鼠免疫功能的影響[J].時珍國醫國藥,2004,15(4):124-126.
[7]吳克楓等.不同劑量環磷酰胺對小鼠的免疫毒性研究[J].貴州醫藥,1999,23(2):92-93.