比較兩種抗凝劑對血小板測定結果的影響與分析

姜學慧 王英芳

血小板在體內主要參與止血和血栓形成，同時在動脈粥樣硬化和炎性反應中起著重要的作用[1]。EDTA-K2具有對紅細胞、白細胞形態影響極小，并可抑制血小板在體外聚集等優點[2]。臨床上普遍采用EDTA-K2作為血液分析的最佳抗凝劑。但近年來發現，EDTA-K2有時會引起血小板發生聚集，從而在血細胞分析儀檢測時出現血小板假性減少[3]。本文通過7例EDTA-K2抗凝的血小板數量減少的病例分析，并用枸櫞酸鈉作抗凝劑復查及用手工法計數血小板探討EDTA-K2和枸櫞酸鈉兩種抗凝劑對血小板測定結果的影響與分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年5月-2012年3月來本院就診的門診和住院患者中血小板減少7例，其臨床癥狀均無皮膚紫癜、牙齦出血等癥狀。

1.2 儀器與試劑 Sysmex-xs-800i全自動血細胞分析儀Sysmex-xs-800i全套試劑校準品等。EDTA-K2與枸櫞酸鈉真空抗凝管日本olympus公司生產雙目顯微鏡，人工計數血小板草酸銨稀釋液。

1.3 方法 將2011年5月-2012年3月本院門診和住院的患者采集用EDTA-K2抗凝的靜脈血標本用Sysmex-xs-800i進行測定，共發現7例無臨床癥狀的血小板減少患者，針對這7例患者第2天清晨重新抽取2 ml靜脈血分別由EDTAK2和枸櫞酸鈉抗凝用Sysmex-xs-800i全自動血細胞分析儀檢測，同時制備兩種抗凝血的涂片瑞士染色后鏡檢，觀察血小板的形態及聚集情況。然后采集患者末梢血10μl加入草酸銨稀釋液中顯微鏡下計數血小板數。

1.4 統計學處理 采用SPSS 13.0統計軟件，計量資料以（s）表示，采用t檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

7例EDTA-K2抗凝血液標本血小板均減少，檢測結果在25×109/L~82×109/L直接涂片染色鏡檢發現血小板存在聚集現象，而用枸櫞酸鈉抗凝的血小板結果均正常在112×109/L ~276×109/L直接涂片染色鏡檢發現血小板散在無聚集，末梢血手工法檢測血小板測定結果也在正常范圍之內116×109/L ~280×109/L，見表1。EDTA-K2抗凝的血小板測定結果（44±21）×109/L與枸櫞酸鈉抗凝的血小板結果（180±63）×109/L比較，差異有統計學意義（P<0.01）；末梢血手工法檢測血小板測定結果（185±63）×109/L與枸櫞酸鈉抗凝的血小板測定結果差異無統計學意義（P>0.05）。

表1 3種方法測定血小板結果比較

3 討論

EDTA-K2雖然是目前血液分析的最佳抗凝劑，但它引起血小板減少的病例也很多。據報道，EDTA依賴性血小板減少癥臨床發病率為0.09%~0.21%[4]。其發生機制是由于EDTA-K2作為抗凝劑的前提下出現的免疫介導血液中的冷抗血小板自身抗體，使血小板互相發生凝集[5]。血小板相互聚集成團形成圍繞在淋巴細胞周圍的血小板衛星現象。血細胞自動分析儀是依據血小板體積大小及通過微孔時產生的脈沖數計數的結果[6]。當血小板聚集時會使機器不能將其識別而導致血小板計數的減少。而枸櫞酸鈉很好的消除了血小板的聚集情況，手工法也能準確的計數血小板數量，雖然精密度差，但對于EDTA-K2所致的血小板減少的復查也是一種有效方便的方法。因此，在臨床工作中對于EDTA-K2抗凝的血液標本檢測到血小板減低時，可以改用枸櫞酸鈉抗凝血進行復檢，同時制備血涂片鏡下觀察血小板分布情況，以免誤診，盡量為臨床醫生提供準確有效的診斷信息。

[1]劉春生，柳發虎.不同抗凝劑對血小板檢測結果的影響[J]. 檢驗醫學與臨床，2011，8（8）:899-900.

[2]姜毅，劉甲辰.EDKA-K2抗凝劑導致血小板假性減少[J].當代醫學，2010，16（10）:113.

[3]邢忠海，劉東升.EDTA依賴型血小板減少的分析與對策[J].實用醫學雜志，2011，27（3）:507-508.

[4]Yoneyama A， Nakahara K. EDTA-dependent pseudothrombocytopenia differentiation from true thrombocytopenia [J]. Nippon Rinsho，2003，61（4）:569-574

[5]于波海，范艷玲，沈偉霞，等.乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少癥病例分析[J].中國自然醫學雜志，2007，9（1）：68-69.

[6]林粵.不同抗凝劑對血小板聚集的處理結果與分析[J].現代中西醫結合雜志，2010，19（34）:4466-4467.