拉曼光譜技術在肉品科學研究中的應用

陳 倩，李沛軍，孔保華

拉曼光譜技術在肉品科學研究中的應用

陳 倩，李沛軍，孔保華*

(東北農業大學食品學院，黑龍江 哈爾濱 150030)

拉曼光譜技術作為新穎的光譜檢測技術在物質理化結構分析方面得到了廣泛應用。該技術能實現對肉的快速、無損檢測，是肉品成分分析的技術之一，并且其光譜對水等極性物質極其不敏感，因此在肉品研究中具有良好的應用前景。本文簡述拉曼光譜技術的基本原理及分類，綜述其在肉品成分分析和品質評定方面的應用，并對該技術在今后肉品科學研究中的應用進行展望。

拉曼光譜；肉品科學；成分分析；品質鑒定

拉曼光譜(Raman spectroscopy)技術是一門基于拉曼散射效應而發展起來的光譜分析技術，可提供分子的振動或轉動信息。拉曼光譜技術同化學分析技術和其他光譜技術相比，具有快速原位無損傷檢測，樣品不需處理，使用樣品量少等特點[1]。隨著拉曼光譜技術的發展[2]，其已被廣泛應用到石油化工[3]、生物醫藥[4]、考古藝術[5]和法醫鑒定[6]等領域。基于拉曼光譜技術的諸多優點，其在肉品中也得到了應用。本文從拉曼光譜技術的原理出發，綜述該技術在肉品成分分析和品質評定中的應用，為將來開發相應的在線檢測設備提供基礎。

1 拉曼光譜技術的原理

拉曼光譜原理是拉曼散射效應，它是分子對光子的一種非彈性散射效應。處于基態的樣品分子受到能量為hv0外來光子的激發后，其能態上升至一個不穩定的中間狀態，樣品分子在離開這個中間狀態時隨機輻射光子。激發光的光子與物質分子相碰撞，可產生彈性碰撞和非彈性碰撞。在彈性碰撞過程中，二者未發生能量交換，光子頻率保持恒定，這種散射現象稱為瑞利散射，如圖1a所示。在非彈性碰撞過程中，光子與分子有能量交換，光子轉移一部分能量給散射分子，或者從散射分子中吸收一部分能量，從而使其頻率改變，它取自或給予散射分子的能量只能是分子兩定態之間的差值△E＝E1－E2，而不同的化學鍵或基團有不同的振動能級，△E可反映指定能級的變化。因此，與之相應的光子頻率變化也是具有特征性的，根據光子頻率變化就可以判斷出分子中所含有的化學鍵或基團，這就是拉曼光譜可以分析分子結構的基礎。當光子把一部分能量交給分子時，光子則以較小的頻率散射出去，稱為斯托克斯散射，散射分子接受的能量轉變成為分子的振動或轉動能量，從而處于激發態E1，如圖1b所示，這時的光子的頻率為ν＇＝ν0－Δν；當分子已經處于振動或轉動的激發態E1時，光子則從散射分子中取得了能量ΔE(振動或轉動能量)，以較大的頻率散射，稱為反斯托克斯散射，這時的光子的頻率為ν＇＝ν0＋Δν。這兩種散射均屬于拉曼散射。

表1 蛋白質結構中有用的拉曼振動模式[7]Table 1 Raman modes useful in interpretation of protein structure[7]

由于斯托克斯散射比反斯托克斯散射強的多，因此光譜儀檢測的主要是斯托克斯散射。其拉曼頻移、拉曼強度及線寬反映的是拉曼樣品池中散射物質的特性，與物質分子的振動和轉動有關。從特征拉曼頻率可以確定分子中的原子團和化學鍵的存在，從相對強度的變化能夠確定化學鍵的含量，而物質化學環境的變化則會引起拉曼特征頻率的微小位移，從特征頻率位移的大小和方向能判定原子團和化學鍵所處化學環境的變化[7]。拉曼光譜對對稱結構分子檢測很有效，與紅外光譜在分析分子結構中互相補充，一些基團紅外吸收很弱，但拉曼散射卻很強，如C—C、C＝C、N＝N和S—S等基團。另外，水的紅外吸收很強，但它的拉曼散射卻很弱，因此拉曼光譜技術特別適合水溶液體系[8]。

隨著激光技術的發展，拉曼光譜技術也發展了多種分析技術，如傅里葉變換拉曼光譜技術、表面增強拉曼光譜技術、激光拉曼光譜技術和共焦顯微拉曼光譜技術等[9]。

2 拉曼光譜技術在肉品成分分析中的應用

從肉的化學組成上分析，主要有蛋白質、脂肪、水分、浸出物、維生素和礦物質6種。其中蛋白質和脂肪對肉的品質影響較顯著，如肌肉蛋白對肉品的質地和保水性有直接影響，肌肉內脂肪的含量會影響肉的風味和嫩度。

2.1 對肉中蛋白質的檢測

蛋白質對肌肉食品的組織特性及功能特性有著重要的貢獻，決定著終產品的品質。蛋白質的功能特性(溶解性、凝膠性和持水性等)和組織特性與其高級結構有關，主要包括二級結構(α-螺旋、β-折疊和無規則卷曲等)、三級結構(二級結構的空間作用)和四級結構(亞基間的相互作用)。這些結構通過不同類型的相互作用來維持氫鍵、疏水相互作用、靜電力以及范德華力等[10]。

圖1 瑞利和拉曼散射示意圖Fig.1 Schematic diagram of Rayleigh and Raman scattering

2.1.1 蛋白質拉曼光譜譜帶的指認

拉曼譜帶可以提供蛋白質化學基團變化的信息，利用這些信息可以預測溶液、固體、凝膠或結晶狀態的蛋白質二級結構和微環境。Li-Chan[7]、Herrero[10]等基于早期的研究結果對蛋白質拉曼光譜圖中的譜帶進行了指認與分析，酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ的骨架振動模式和氨基酸側鏈(胱氨酸和半胱氨酸的S—S和S—H伸縮振動)以及C—C伸縮振動等模式反映了二級結構的變化；酪氨酸、色氨酸雙峰以及和苯丙氨酸等芳香族氨基酸殘基的振動可以反映微環境的變化，相關各個譜帶指認見表1。在肌肉食品體系中，蛋白質這些結構的變化可為研究其腐敗變質的機理提供信息，進而改善其處理、加工和貯藏條件。

2.1.2 從肌肉中分離出的蛋白質的檢測

拉曼光譜技術已經應用到了分離出的肌原纖維蛋白和基質蛋白結構的測定中，這些蛋白對肌肉的組織和功能特性有著重要的貢獻，但是特別易受加工處理以及貯藏條件的影響。肌肉中的肌原纖維蛋白主要包括肌球蛋白、肌動蛋白、肌原蛋白和原肌球蛋白等。其中肌球蛋白占主導，它是一種非對稱蛋白，由頭部和一部分尾部構成的重酶解肌球蛋白和尾部的輕酶解肌球蛋白兩部分構成。Carew等[11]利用拉曼光譜技術確定并研究了從兔肉中分離出的肌球蛋白結構。酰胺Ⅲ區域(1265cm-1和1304cm-1)中α-螺旋構象的譜帶對應肌球蛋白的尾部結構，1244cm-1處指認為β-折疊和無規則卷曲結構的譜帶以及1265cm-1處的肩峰譜帶對應肌球蛋白的頭部結構。Sultanbawa等[12]從鱈魚中提取了肌動球蛋白，研究其在添加抗凍保護劑后結構的變化。拉曼光譜結果表明，添加抗凍保護劑后進行凍藏的肌動球蛋白，其酰胺Ⅰ、酰胺Ⅲ以及C—C伸縮振動有變化，表明了其二級結構發生了變化。這些結果為利用拉曼技術研究肌原纖維蛋白的構象提供了信息。

膠原蛋白是結締組織中主要的蛋白，含有大量的甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸，它的結構對肌肉的質構特性有影響。Badii等[13]分別從新鮮的和解凍后的鱈魚結締組織中提取膠原蛋白，研究凍藏條件、甲醛以及魚油對膠原蛋白的影響。結果表明，凍結的膠原蛋白添加甲醛或者魚油后貯藏在－10℃條件下，酰胺Ⅰ區域(1660cm-1)強度的增加表明了其二級結構發生了變化。

2.1.3 肌肉中蛋白質的檢測

基于拉曼光譜可以進行無損原位檢測的特點，可將其直接應用到未經處理的肉樣上，研究食品體系中天然蛋白質的相互作用以及構象改變。Careche[14]、Herrero[15]等利用拉曼光譜技術對凍藏期間的魚肉蛋白結構進行了原位檢測。Careche等[14]研究表明新鮮狗鱈魚(hake)魚肉與在－10℃和－30℃條件下凍藏10個月后的Hake魚肉的拉曼光譜存在差異，在－10℃條件下蛋白結構變化更顯著。比較新鮮的和凍藏的魚肉酰胺Ⅰ譜帶(1650～1680cm-1)發現，冷凍的魚肉拉曼光譜波峰向高波數方向移動，推測這與α-螺旋結構含量的減少有關，同時伴隨著酰胺Ⅲ譜帶(1240～1225cm-1)強度的增加，說明β-折疊構象含量增加，另外759cm-1強度的減弱，說明包埋的色氨酸殘基暴露了。Herrero等[15]也研究了在同樣的凍藏溫度(－10℃和－30℃)下狗鱈魚肌肉蛋白的結構變化，圖譜結果顯示，酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ在940cm-1處譜帶發生了變化以及色氨酸譜帶(759cm-1)強度的減弱，這些現象說明了α-螺旋向β-折疊構象的轉化，這與Careche等[14]的研究結果一致。

2.1.4 凝膠特性的分析

由于凝膠對肌肉食品的品質起著關鍵性的作用，所以研究其在加工和貯存過程中，因外界環境的改變而引起的變化是很必要的。以下是拉曼光譜技術在肌肉蛋白質凝膠和肉糜凝膠特性測定中的應用。

2.1.4.1 蛋白質凝膠特性的分析

肌肉蛋白凝膠是決定肉品品質的關鍵因素，對產品的質構、組織結構、保水性和與食品中其他成分的交互作用有重要作用[16]，因此許多研究將肌肉蛋白從肌肉中分離出來并制備成凝膠，利用拉曼光譜技術研究分離出的蛋白的凝膠特性。Xu Xinglian等[17]研究了溫度對豬肉肌原纖維蛋白凝膠特性的影響，并確定了凝膠結構變化與功能特性間的關系，結果表明，隨著溫度的升高α-螺旋含量降低，伴隨著β-折疊含量的顯著增加，同時二硫鍵構象發生變化，疏水相互作用也參與其中，這些變化對形成較硬而具有不可逆性的凝膠有很大的貢獻，并且確定了50～60℃是豬肉肌原纖維蛋白熱誘導凝膠的關鍵區域。此外，Chen等[18]采用了拉曼光譜研究了微生物轉谷酰胺酶對豬肉肌原纖維蛋白凝膠結構的變化，添加轉谷酰胺酶后凝膠光譜圖表明，α-螺旋含量減少，伴隨著β-折疊、β-轉角和無規則卷曲含量的增加，這些變化會形成強而不可逆的熱誘導凝膠。

豬血是屠宰廠中的主要副產物，其中血漿蛋白因其良好的凝膠特性而受到重視Davila等[19]借助拉曼光譜分析技術研究了存在于血漿中的3種主要蛋白質(纖維蛋白原、白蛋白和球蛋白)熱誘導凝膠過程中的相互作用，通過圖譜可知，在凝膠過程中纖維蛋白原和白蛋白發生了相互作用，造成纖維蛋白原二硫鍵構象變化，疏水基團包埋以及β-折疊構象含量減少等變化；同時發現，纖維蛋白原可以減少熱誘導凝膠過程中α-螺旋含量減少程度；白蛋白與球蛋白間的相互作用使得二硫鍵增多，疏水殘基暴露，并且當混合物中球蛋白含量居多時，其構象受白蛋白的影響，盡管其他質構特性會有所改變，但熱力學性質不受影響。

2.1.4.2 肉糜凝膠特性的分析

隨著肉糜制品的發展，對肉糜凝膠特性的研究也逐漸多了起來。Liu Ru等[20]采用拉曼光譜技術研究了魚肉和豬肉兩種不同肉糜經不同溫度處理后其熱誘導凝膠的構象及分子間相互作用的變化。通過光譜圖中指認為二硫鍵的譜帶(500～550cm-1)、酪氨酸雙峰比值的變化，對應二級結構酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ譜帶的變化，以及脂肪族氨基酸C—H振動等變化說明隨著溫度的升高，疏水交互作用先升高后降低。對于魚肉而言，二硫鍵的形成主要是在70～80℃范圍內，而豬肉是在50～60℃范圍內；對于魚肉而言，4～40℃誘導可以形成大量的非二硫共價交聯，而豬肉不能形成。此外，Sanchez-Gonzalez等[21]研究了魚肉由肉糜變成溶膠再到凝膠的過程中蛋白質結構的變化，表明其變化主要表現在酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ中α-螺旋、β-折疊構象變化、酪氨酸雙峰比值改變以及脂肪族氨基酸C—H波峰的移動等方面，這些變化對形成黏而有彈性的凝膠有貢獻。

膳食纖維具有很強的吸水能力或與水結合的能力，可以賦予肉制品很好的質構特性，并且具有預防心血管疾病和癌癥等疾病的作用。Sanchez-Gonzalez等[22]通過向魚糜中添加小麥膳食纖維(WDF)，研究其對魚糜凝膠的影響。結果圖譜中—CH峰波向高波數方向移動，并且伴隨著峰強度的降低，這些表明WDF發生了水合作用，因為在魚糜形成凝膠過程中，WDF結合了凝膠中的水。由于WDF的水合作用，纖維既獲得了蛋白凝膠中的水分，使蛋白質形成了β-折疊以及疏水相互作用，又做了脫水劑。另外，經添加WDF和加熱協同作用，易于形成β-轉角，這對形成非特異性聚集有貢獻。另外，膳食纖維使得溶膠狀態的蛋白三級結構發生了變化，特別是疏水側鏈的微環境的變化，使其暴露在溶液中的量增多，同時—CH強度的減弱也表明了蛋白質和纖維素間發生了疏水相互作用。這些結果對添加纖維素的重組魚糜制品的研究具有一定的意義。

2.2 對肉中脂肪的檢測

脂肪是影響肌肉食品品質的重要因素，它不僅是風味物質的前體，也是引起氧化變質的主要成分。肉的氧化變質取決于脂肪酸的不飽和程度[23]，具有高不飽和度脂肪酸的肉制品容易發生脂肪氧化，形成腐敗味。因此控制不飽和脂肪酸的含量可以有效地避免在貯藏和加工過程中肉品的氧化問題。Lo Fiego等[24]指出，腌肉制品對原材料的要求很嚴格，需要控制原材料的碘值，否則會引起終產品的酸敗。因此，要對脂肪含量以及脂肪酸組成進行研究。

在拉曼光譜中，脂肪結構的變化主要通過以下一些譜帶來反映[25]:—CH伸縮振動、C＝O伸縮振動、—CH2剪切振動以及C—C伸縮振動等。脂肪的氧化以及脂肪同其他成分(比如蛋白質)作用等都會引起結構的變化。另外，可以通過1660cm-1處的C＝C伸縮譜帶與1750cm-1處的C＝O伸縮譜帶或者1445cm-1處的—CH2剪切振動譜帶的比值來定量分析脂肪的不飽和度。

3 拉曼光譜技術在肉品品質評價中的應用

肉在加工、貯藏過程中，其主要成分蛋白質和脂肪等大分子都會發生變化，伴隨著其功能性和組織特性的變化，進而影響其風味、色澤、質地和保水性等品質方面的變化，通過拉曼光譜圖可以定性地分析肉品中這些成分的分子結構和各種基團之間的關系，進而檢測肉品的品質，此外還可以根據拉曼光譜峰強度與被測物質濃度成正比的關系進行半定量分析。

3.1 肉色成分分析

肉色是肉質評定的重要指標之一。肉色主要取決于肉中肌紅蛋白(myoglobin，Mb)和血紅蛋白(hemoglobin，Hb)兩大色素蛋白的含量及化學狀態。在放血充分的條件下，肌紅蛋白的比例可達到80%～90%，是構成肉色的主要因素。肌紅蛋白由一條珠蛋白多肽鏈和一個血紅素輔基(heme group)結合而成的復合蛋白質，它的呈色作用源于其分子內的亞鐵血紅素。肌紅蛋白與血紅蛋白的主要差別是前者只結合一分子的血色素，而血紅蛋白結合四分子的血紅素[26]。肌紅蛋白在可見區420nm波長處有一個很強的storet吸收帶，以及在500～600nm區域有弱的Q帶吸收，因此是共振拉曼光譜研究的一種很好的目標分子[27]。因此，可利用拉曼光譜技術來研究肌肉中這些色素蛋白的結構變化，為提高肉品的色澤品質提供信息。

3.1.1 肌紅蛋白及其衍生物的測定

腌肉制品因其特殊的風味與色澤深受消費者喜愛，其特征性的粉紅色是腌制劑亞硝酸鹽與肌紅蛋白作用生成的一氧化氮肌紅蛋白(MbNO)所致。李濤等[28]利用納秒瞬態拉曼光譜技術研究小分子配體NO與肌紅蛋白Mb結合的動力學過程，通過考察MbNO光解后產物脫氧肌紅蛋白與反應物MbNO的ν4特征振動峰的強度比值隨激光激發功率的變化，闡述了利用納秒瞬態拉曼光譜技術研究MbNO體系中NO與脫氧肌紅蛋白結合過程的可行性。可見拉曼光譜技術為研究MbNO的形成過程以及檢測提供了新途徑。

腌肉色素MbNO加熱后珠蛋白變性，隨后與血紅素分離，由鮮肉的MbNO變成了蒸煮腌肉的亞硝酰血紅素化合物，對這種化合物的結構一直存在爭議。Sun等[29]通過比較煮制后腌肉色素(CCMP)氧化前后拉曼光譜的變化，研究了它的結構和氧化特性。CCMP提取物經自然光和過氧化氫氧化后，鑒定其結構是五位配位-亞硝酰血紅素化合物。圖譜的變化表明在自然光氧化過程中—NO基團并沒有從Fe卟啉環分子中解離出來，但是其共振共軛結構發生了變化。

隨著高壓處理技術在肉制品中的廣泛應用，使得其作用后的肉品品質也得到了相應的研究。Wackerbarth等[30]采用共振拉曼光譜技術研究了經600～700MPa高壓處理后豬肉中的肌紅蛋白結構的變化。結果表明，無損傷未加壓處理的肉組織光譜圖呈現出Fe2+去氧肌紅蛋白的共振拉曼光譜，但是經過加壓處理后形成了六位配位的Fe2+低自旋態的新的Mb種類，指認這種蛋白是雙組氨酸復合物，這種結構上的變化與血紅素電子躍遷的改變有關，這樣會影響肉色；相反，提取并經過壓力和非加壓處理的豬肉的Mb，其水溶液的共振拉曼光譜圖中氧合肌紅蛋白的特征峰增加，這是由于溶液中有能結合O2的蛋白質存在，經加壓處理后提取的肌紅蛋白水溶液，氧合形式部分轉化為高鐵形式，表明了高壓使血紅素發生氧化。因此，結構的變化不僅引起了顏色的變化，而且可能誘發不希望發生的氧化副反應，涉及到更進一步肉成分的變化。他們提出在氧合肌紅蛋白/去氧合肌紅蛋白比值很小之前進行加壓處理，可以很大程度上避免以上現象。Tintchev等[31]也用拉曼光譜技術研究了600MPa高壓處理后的大馬哈魚(salmon)的肌紅蛋白和血紅蛋白結構的變化，高壓處理后Met-Mb和Met-Hb發生了氧化還原反應。

3.1.2 血紅蛋白及其衍生物的測定

亞硝酸鹽也會與血紅蛋白反應生成亞硝基血紅蛋白，它可以代替亞硝酸鹽作為肉品的著色劑。沈高山等[32]采用顯微拉曼光譜技術研究了NaNO2與氧合血紅蛋白(HbO2)在水溶液中的相互作用，監測到不同濃度的NaNO2對不同濃度的HbO2的反應，血紅蛋白分子的結構發生了改變且其濃度降低，表現在HbO2特征峰570cm-1與水合高鐵血紅蛋白特征峰495cm-1強度的比值I570/I494，以及鐵離子低自旋態與高自旋態特征峰強度比值I1586/I1555均減少，對Hb氧化態敏感的特征峰向低波數方向移動，對卟啉環中心孔徑大小敏感的峰向高波數方向移動。該研究為氧和血紅蛋白和水合高鐵血紅蛋白的結構分析與反應機理提供了有效參考。

目前，拉曼光譜技術主要是應用到各種色素蛋白的結構鑒定與分析方面，并沒有實現對肉色的直接檢測，如果在進行肉質的感官特征評定時，拉曼光譜技術與其他技術結合，則在一定程度上可能提高在線檢測效率和實際的經濟效益。

3.2 肉的保水性評價

保水性是肌肉受外力作用下其保持原有水分與添加水分的能力，它對肉的品質有很大的影響，是肉質評定時的重要指標之一。保水力的高低可直接影響到肉的風味、顏色、質地和嫩度等。與傳統測定保水性的方法相比，拉曼光譜技術雖不能準確地測定出肉的保水性，但是能夠快速地分析推測出保水性。

Pedersen等[33]利用拉曼光譜PLSR建模方法預測新鮮豬肉的滴水損失，發現具有良好的相關性(r＝0.95～0.98)。拉曼圖譜表明，保水性與位于876～951cm-1和3071～3128cm-1附近的譜帶有關。此外，關于凍藏對魚肉保水性的影響也有報道，Herrero等[34]研究不同凍藏溫度(－10℃和－30℃)條件下的狗鱈(hake)魚肉微觀結構的變化與水的拉曼譜帶(3100～3500cm-1和50～600cm-1)特征，通過研究這些變化來確定其保水性。結果表明，160cm-1處譜帶增強與肌肉蛋白質的構象轉化有關，與肌肉中的水分子結構也有關。在凍藏的過程中，νs(OH)強度增加可能為水分子提供了更大的結構空間。利用拉曼光譜技術測定肉品的保水性從而實現屠宰當天鮮肉的分級，具有廣闊的應用前景。研究結果顯示，拉曼光譜對宰后早期肉的保水性具有較好的相關性。

3.3 肉中脂肪氧化的測定

拉曼光譜技術在肉品脂肪檢測方面的應用較少，研究多集中在脂肪酸組成問題上，并通過建立數學模型來進行定量分析。Olsen等[35]利用拉曼光譜技術快速分析并定量檢測了豬肉脂肪組織中的和處理后融化狀態的脂肪中的飽和、單不飽和、多不飽和脂肪酸以及碘值。其采用了多種建模方法進行了定量分析和辨別。另外，他們指出拉曼技術有望用于豬肉胴體的在線檢測，在60s內完成脂肪酸不飽和度的檢測。隨后Olsen等[36]又研究了檢測豬肉脂肪組織碘值的拉曼儀的長期穩定性。結果表明，可在同一臺儀器上完成3年后測量的光譜的模式轉化。劉德燕等[37]采用多種建模方法對4種不同的動物食品(雞肉、牛肉、羊肉和豬肉)中脂肪酸進行了定量分析和判別。

此外，利用拉曼光譜技術還可以研究經凍干和凍藏后的肉中脂質的結構。Sarkardei 等[25]利用傅里葉拉曼光譜定量的分析了馬鮫魚(horse mackerel，Trachurus trachurus)和大西洋馬鮫(Atlantic mackerel，Scomber scombrus)這兩種魚的脂質。從凍干和貯藏12周的馬鮫魚和大西洋馬鮫中提取油，圖譜中指認為—CH2伸縮和C＝O酯伸縮的譜帶強度均有顯著減少。3011cm-1和2960～2850cm-1處的譜帶強度增加證明了上述結果，這就表明了脂質結構發生了變化，涉及到了—CH基團和疏水相互作用的變化。與馬鮫魚相比， 大西洋馬鮫脂質結構變化更明顯，這可能是因為其二十碳五烯酸（EPA）含量較高的緣故，另外大西洋馬鮫中多不飽和脂肪酸含量較高，也使得其更容易發生氧化。他們也指出了脂質的氧化會影響魚肉肌原纖維蛋白的溶解性和提取性，這是由于分子間發生交聯作用以及疏水相互作用使得蛋白質二級結構發生了變化。

3.4 肌肉嫩度與多汁性評價

肉的嫩度是重要的食用品質之一，它是指肉在食用時口感的老嫩，反應了肉的質地。Beattie等[38]通過拉曼光譜技術對煮制后的牛肉進行原位檢測，研究其蛋白結構的變化，建立了嫩度和多汁性與拉曼光譜數據之間的聯系，結果表明其具有良好的相關性。牛肉的酰胺Ⅰ(1669cm-1)和酰胺Ⅲ(1235cm-1)兩處譜帶強度增加與β-折疊含量的增加有關；1445cm-1處譜帶對微環境和疏水相互作用很敏感，該處譜帶強度的增加表明牛肉疏水相互作用力增強。以上結果表明了蛋白質中α-螺旋和β-折疊的比值以及蛋白質環境的疏水性等對煮制牛肉的感官和質構特性有重要影響。同時發現，反應疏水相互作用的1460～1483cm-1(—CH2和—CH3彎曲振動)區域譜帶與多汁性密切相關。

4 結 語

拉曼光譜技術在肉品領域中的應用雖然起步較晚，但是憑借著其無需樣品前處理、快速、操作簡便無損傷等優點在肉品成分分析中取得了一定進展。在食品分析檢測研究中，由于激光光源照射樣品時，有機分子吸收光子轉化為熒光分子產生的熒光效應，進而影響對拉曼光譜分析，因此對熒光背景扣除技術的研究可拓寬拉曼光譜技術的應用范圍。另外，拉曼光譜儀器仍以高精密度、價格昂貴的實驗儀器為主，難以適應肉類行業的發展，因此今后的研究重點在于研發低成本、可與其他分離、檢測設備聯用的在線檢測設備，應用于實際的生產中，以期提高在線檢測肉品品質的效率。先進的物理化學技術在拉曼光譜以及分子生物等學科方面的應用、拉曼光譜軟硬件技術的提高以及圖譜數據庫的建立和完善，必將推動拉曼光譜技術在肉品科學研究中的應用。

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Application of Raman Spectroscopy Technique in Meat Science: A Review

CHEN Qian，LI Pei-jun，KONG Bao-hua*
(College of Food Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China)

As a novel spectral detection method, Raman spectroscopy technique has been widely used in analysis of physicochemical structure of materials. Raman spectroscopy technique is also promising for component analysis of meat with the advantages of quickness and nondestructive detection. Meanwhile, Raman spectroscopy technique has good application prospect in meat science for its spectra being extremely insensitive to polar materials such as water. In this paper, the principle and classification of Raman spectroscopy technique are introduced briefly, component analysis and quality discrimination of meat by Raman spectroscopy technique are reviewed, and finally, perspective applications of this technique in further meat research is prospected.

Raman spectroscopy；meat science；component analysis；quality discrimination

TS207.3

A

1002-6630(2012)15-0307-07

2011-07-15

國家公益性行業(農業)科研專項(200903012-02)；東北農業大學創新專項基金(CXZ011)

陳倩(1988—），女，碩士研究生，研究方向為農產品加工及貯藏。 E-mail:chenqianego7@163.com

*通信作者:孔保華(1963—），女，教授，博士，研究方向為農產品加工及貯藏。E-mail:kongbh@163.com