鷹嘴豆肽抑制腫瘤作用和對免疫功能的影響

高 捷，王 華，寇曉虹，薛照輝*

(天津大學化工學院食品科學系，天津 300072)

鷹嘴豆肽抑制腫瘤作用和對免疫功能的影響

高 捷，王 華，寇曉虹，薛照輝*

(天津大學化工學院食品科學系，天津 300072)

目的：探討鷹嘴豆肽抑制肝癌H22細胞移植瘤的效果及對免疫功能的影響。方法：將小鼠隨機分為正常對照組、陽性對照組、腫瘤對照組和鷹嘴豆肽低、中、高劑量組(50、100、200mg/(kg·d))，除正常組外，其余各組小鼠均在皮下接種肝癌H22細胞，建立肝癌小鼠模型。建模后第2天開始灌胃給藥，連續給藥10d。末次給藥24h后拉托頸椎處死小鼠，測體質量、腫瘤大小、抑瘤率、胸腺指數、脾指數、巨噬細胞吞噬能力、脾細胞吞噬能力等。 結果：鷹嘴豆肽低、中、高3個劑量均可抑制H22腫瘤的生長，且沒有阻礙小鼠體質量和免疫器官的增長。與腫瘤對照組相比，鷹嘴豆高劑量組可以顯著提高小鼠遲發型超敏反應(DTH)的能力、淋巴細胞和巨噬細胞吞噬能力(P＜0.05)，鷹嘴豆低、中劑量組對其也有一定的改善作用，但是沒有表現出劑量依賴效應。 討論：鷹嘴豆肽可能是通過增強H22肝癌小鼠的免疫功能來抑制腫瘤的生長，具體的作用機制還需要更深入的研究。

鷹嘴豆肽；抗腫瘤；H22腫瘤；免疫功能

腫瘤是一類嚴重危害人類身體健康的常見病、多發病，其中惡性腫瘤對人類的危害尤為嚴重。肝癌是嚴重威脅我國人民健康的惡性腫瘤之一，而且具有起病隱匿、惡化程度高、易轉移復發和預后差的特點[1]。目前，化學藥物治療是治療肝癌的主要手段，但臨床常用的化療藥物具有嚴重的非特異性的細胞毒作用，在殺傷腫瘤細胞的同時對機體正常組織器官也會造成一定程度的損傷，在很大程度上限制了其應用，此外，許多腫瘤細胞對常規化療有了多重耐藥性[2]。因此，尋找對腫瘤細胞具有選擇性殺傷作用，而且對正常細胞有相對低毒性的藥物成為迫切的要求。

鷹嘴豆(Cicer arietinum L.)系豆科蝶形花亞科典型代表植物，原產于西亞土耳其一帶，2500年前即已傳入我國新疆，目前，在世界各地均有栽培，我國主要在西部、北部等干旱和半干旱地區種植[3]。鷹嘴豆是一種優良的植物蛋白質資源，其蛋白質含量占籽粒干基總量的15%～30%，含有人體所必需的8種氨基酸，含量高，組成均衡[4-5]。在我國它是一味維族民間藥和傳統中藥，可清熱解毒，主治消渴、肝炎、腳氣。此外，鷹嘴豆還具有抗骨質疏松[6]、抗氧化[7]、降低血糖、血脂和調節膽固醇水平[8-9]等藥理活性。鷹嘴豆異黃酮還可以防止癌細胞的增殖，促使癌細胞的死亡，尤其是與性腺相關的癌癥細胞，如乳腺癌[10-11]、前列腺癌[12-13]等。本研究通過抑瘤率、淋巴細胞吞噬能力、免疫器官指數等免疫抑制指標，探討鷹嘴豆肽抑制肝癌H22細胞移植瘤的效果及對免疫功能的影響，為鷹嘴豆肽的綜合利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

小鼠肝癌H22細胞、KM小鼠(18～20g)購于中國放射性醫學研究所；鷹嘴豆購于新疆市場；鷹嘴豆肽由實驗室自制[14-15]。

RPMI-1640培養基 美國Gibco公司。刀豆蛋白A (Con A) 美國Sigma公司；四氮甲基偶氮唑鹽(MTT) 美國Amresco公司；注射用環磷酰胺(Cy)(批號：10022321)江蘇恒瑞醫藥股份有限公司；印度墨汁 北京化學試劑公司；胎牛血清 美國MD 公司；紅細胞裂解液 碧云天生物技術研究所；其余試劑均為分析純。

72862-415 CO2細胞培養箱 美國Forma Scientific公司；普通光學顯微鏡 日本Olympus公司；電子分析天平 賽多利斯科學儀器(北京)有限公司；臺式高速離心機 上海安亭科學儀器廠；超凈工作臺 蘇州凈化設備有限公司；WH-1微型渦旋混合儀 上海滬西分析儀器廠有限公司；酶標儀 美國Thermo公司。

1.2 方法

1.2.1 接種方法

無菌獲取肝癌H22細胞，以無菌生理鹽水配制成細胞數為1×106個/mL 的細胞懸液，每只小鼠右腋皮下接種0.2mL。

1.2.2 動物分組與給藥劑量

實驗組動物隨機分為正常組(NC)、陽性對照組(PC)、腫瘤對照組(TC)、鷹嘴豆肽低劑量組(CPe-LD)、鷹嘴豆肽中劑量組(CPe-MD)、鷹嘴豆肽高劑量組(CPe-HD)共6組。除正常組，其他各組小鼠均接種肝癌H22細胞液，接種后第2天，按表1設計方案連續灌胃10d。

表1 實驗設計方案Table 1 Experimental design for mouse grouping

1.2.3 腫瘤抑制實驗

從接種肝癌H22細胞后第4天開始測量腫瘤的長徑和短徑，每隔2d測1次，按照式(1)計算腫瘤體積。

末次灌胃24h后，對小鼠眼窩取血，取血后拉托頸椎處死小鼠，并摘取腫瘤、胸腺和脾，經生理鹽水洗滌后用濾紙吸干稱質量，分別計算抑瘤率、胸腺指數和脾指數。

1.2.4 遲發型超敏反應(DTH)

接種肝癌H22細胞后第5天，小鼠腹部去毛，用1%二硝基氟苯(DNFB)丙酮麻油溶液在去毛處均勻涂抹致敏(每鼠25μL)，24h后重復操作加強致敏一次。加強致敏后第4天，用10μL DNFB溶液均勻涂抹右耳(兩面)進行攻擊，對照組同樣涂耳但未致敏。24h后處死小鼠，剪下左右耳殼，用打孔器在雙耳相應部分各取下直徑8mm的耳片，稱質量，以左右兩耳質量差表示腫脹程度。

1.2.5 巨噬細胞吞噬實驗(碳粒廓清實驗)

1)將稀釋的印度墨汁(0.1mL/10g 以體質量計)經尾靜脈注入體內，待墨汁注射完畢，立即計時。2)注入墨汁后的2min和10min，用血色素吸管分別從小鼠左右眼眶后靜脈叢取血滴于載玻片上，用微量移液器吸取20μL于裝有2mL 0.1% Na2CO3溶液的一次性塑料試管中，搖勻。3)以Na2CO3溶液為空白，于波長600nm處測光密度值(OD)。4)拉脫頸椎處死小鼠，取出脾臟和肝臟，用濾紙吸干其表面血液，稱質量。按式(5)、(6)計算吞噬指數：

式中：OD1為t1=2min血標本的光密度值；OD2為t2=10min血標本的光密度值。

式中：α為吞噬指數；m體為體質量/g；m肝為肝質量/g；m脾為脾質量/g。

1.2.6MTT法淋巴細胞轉化實驗

1)脾淋巴細胞懸液：將小鼠拉托頸椎處死，用75%酒精浸泡5～10min，剪開腹部皮膚和腹膜，無菌取出脾臟，放入有5mL PBS(pH7.4)的平皿中，用5mL注射器抽取平皿中PBS液體緩緩注入脾臟內，使脾細胞沖洗出來。反復沖洗，直到脾臟變白為止(約沖洗2～3次)，將細胞移入10mL無菌離心管中，1000r/min 5min離心，棄上清。加紅細胞裂解液(細胞體積的3～5倍)，裂解3min，1000r/min離心5min，棄去上清。用PBS重復洗脾細胞1次，以2mL 10%FCS-R/RPMI-1640培養液重懸細胞，臺盼藍染色檢測細胞存活率＞95%，調整細胞濃度至1×107個/mL。

2)孵育：每份細胞懸液按100μL/孔加入96孔培養板中，每個樣品設3重復，實驗組每孔加100μL 10μg/mL的ConA液，對照組加入100μL 10% FCS-R/ RPMI -1640培養液。置于37℃、5%CO2細胞培養箱中孵育72h。

3)MTT處理：培養結束前4h，每孔棄去上清100μL，加入MTT(5mg/mL)10μL/孔，繼續培養4h。

4)測定：培養結束后，離心去上清，每孔中加入150μL DMSO，微型振蕩器上800r/min振蕩5min，使紫色結晶完全溶解。30min內在酶聯檢測儀波長490nm處比色。

5)結果表示及評價：結果以波長490nm處的光密度值來表示。用加ConA孔的光密度值減去不加ConA孔的光密度值代表淋巴細胞的增殖能力。若實驗組的光密度值明顯高于對照組的光密度值，說明該實驗物對ConA刺激的淋巴細胞增殖功能有促進作用。

1.2.7 數據處理

應用SPSS 15. 0 for Windows 統計軟件包進行統計分析。數據用±s表示，組間比較采用t檢驗。

2 結果與分析

2.1 小鼠及腫瘤外觀表征

從整個實驗期間看，正常組小鼠：身體勻稱，生長旺盛、活躍、動作敏捷、反應靈活、被毛乳白色、濃密、整齊而且富有光澤。

腫瘤對照組小鼠：隨著腫瘤的增大，小鼠逐漸表現出活動力低下，反應遲鈍，喜歡蜷縮，毛發干枯、凌亂而且無光澤，個別小鼠表現出消瘦、發抖。

鷹嘴豆肽組小鼠：隨著腫瘤的增大，部分小鼠逐漸出現活動遲緩，個別小鼠被毛稀疏蓬亂，第9天后大多數小鼠狀態優于腫瘤對照組，且食欲有明顯改善。

腫瘤對照組腫瘤體積較大、顏色紅潤、質脆，瘤塊假膜不完整，部分浸潤生長至腿部肌肉，剝離時容易出血，也有部分腫瘤成灰黑色，切開后可見壞死組織，還有部分腫瘤發生液化，腫瘤形態不完整；鷹嘴豆肽灌胃后的腫瘤組織體積相對較小，顏色略蒼白、質韌，瘤塊假膜完整，剝離時基本無出血。

2.2 接種后不同時間各組腫瘤體積及腫瘤生長體積曲線

隨著實驗的進行，鷹嘴豆肽組小鼠腫瘤的生長呈現不同程度的抑制狀態(圖1)，其腫瘤體積與腫瘤對照組的差別逐漸增大，以鷹嘴豆肽中劑量組表現最明顯，腫瘤體積的增長速度最為緩慢，實驗結束時，鷹嘴豆肽中劑量組與腫瘤對照組腫瘤體積相比差異顯著(P＜0.05)。

圖1 接種后不同生長時間腫瘤生長體積曲線Fig.1 Effect of inoculation time on tumor growth

2.3 鷹嘴豆肽對H22肝癌小鼠的抑瘤作用和對小鼠免疫器官的影響

表2 鷹嘴豆肽對H22小鼠的抑瘤作用和對免疫器官的影響(±s，n=10)Table 2 Effect of chickpea peptides on tumor inhibition and immune organs in H22-bearing mice(±s，n=10)

表2 鷹嘴豆肽對H22小鼠的抑瘤作用和對免疫器官的影響(±s，n=10)Table 2 Effect of chickpea peptides on tumor inhibition and immune organs in H22-bearing mice(±s，n=10)

注：*. 與腫瘤對照組(TC)相比，有顯著性差異(P＜0.05)。下同。

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由表2可知，在飼喂期間，各組小鼠的體質量均表現出不同程度的增長趨勢。鷹嘴豆中劑量組生長速度最快，與腫瘤對照組體質量差異顯著(P＜0.05)，而鷹嘴豆低劑量組與腫瘤對照組差異不顯著。陽性對照組小鼠體質量增加較少，個別小鼠的體質量還出現降低現象。腫瘤對照組的腫瘤平均質量為(2.08±0.41)g，H22肝癌小鼠經不同劑量鷹嘴豆肽灌胃后，平均質量均有所減輕，低、中、高劑量組分別降為(1.33±0.32)、(0.97±0.17)、(1.06±0.22)g，其中，低、中、高劑量組與腫瘤對照組相比均有顯著性差異(P＜0.05)，而且中等劑量的效果最好，這表明可能存在抑制腫瘤生長的最佳濃度。另外，鷹嘴豆肽低、中、高劑量組的抑瘤率分別達到36.06%、53.37%、49.04%，但是均低于陽性對照組。

胸腺屬于中樞免疫器官，是T淋巴細胞發育和成熟的場所。脾臟是最大的淋巴器官，含有大量的B淋巴細胞、T淋巴細胞和巨噬細胞，也是重要的外周免疫器官之一，另外也是對血源性抗原產生免疫應答的場所，可以通過多種機制發揮抗腫瘤作用。當受到腫瘤抗原刺激后，B及T淋巴細胞經克隆擴增，數目明顯增多，致B及T淋巴細胞區體積擴大，這些免疫器官的體積和質量亦相應的增大。B淋巴細胞可以轉化為漿細胞，繼而分泌特異性抗腫瘤的免疫球蛋白，T淋巴細胞可以直接參與細胞免疫，并對外周血中T細胞亞群的分布有重要調節作用。因此，胸腺指數和脾指數可直接反應機體的免疫水平。鷹嘴豆肽各組與腫瘤對照組相比，脾臟指數顯著升高(P＜0.05)，胸腺指數也有略微升高。而在環磷酰胺的治療過程中，脾指數和胸腺指數均下降，表明環磷酰胺在治療過程中，雖然有較高的抑瘤率，但是對免疫器官造成了一定損傷，致使脾臟和胸腺明顯萎縮，導致免疫功能降低；而鷹嘴豆低、中、高3個劑量組，在抑制腫瘤的過程中均能促進脾臟和胸腺的生長，以提高機體的免疫功能。

2.4 鷹嘴豆肽對H22肝癌小鼠遲發型超敏反應的影響

二硝基氟苯(DNFB)是一種半抗原，與皮膚蛋白結合形成抗原，能刺激T淋巴細胞增殖成致敏淋巴細胞，再次攻擊后會誘發遲發型超敏反應。

表3 鷹嘴豆肽對H22小鼠遲發型免疫(DTH)的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of chickpea peptides on DTH of H22-bearing mice (±s，n=10)

表3 鷹嘴豆肽對H22小鼠遲發型免疫(DTH)的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of chickpea peptides on DTH of H22-bearing mice (±s，n=10)

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由表3可知，鷹嘴豆肽各劑量組均提高了肝癌小鼠DTH反應強度，與腫瘤對照組相比均有顯著性差異(P＜0.05)。其中，鷹嘴豆肽中劑量組效果最明顯，其左右耳質量差為腫瘤對照組的1.7倍。

2.5 脾淋巴細胞轉化實驗

表4 鷹嘴豆肽對H22小鼠脾淋巴細胞的影響(χˉ±s，n=10) Table 4 Effect of chickpea peptides on splenic lymphocytes in H22-bearing mice (χˉ±s，n=10)

由表4可知，脾淋巴細胞的增殖能力為：CPe-HD＞PC＞CPe-MD＞CPe-LD＞TC，說明鷹嘴豆肽能顯著提高脾淋巴細胞增殖能力，而且鷹嘴豆肽提高脾淋巴細胞的增殖能力呈明顯的劑量效應關系，隨著劑量的增加，脾淋巴細胞的增殖能力逐漸增強。實驗中，相對于鷹嘴豆肽低劑量組，高劑量鷹嘴豆肽可將脾淋巴細胞增殖能力提高1.7倍。說明鷹嘴豆肽高劑量組可以顯著提高H22肝癌小鼠的免疫功能。

2.6 碳粒廓清實驗

機體免疫系統在抗腫瘤方面起著非常重要的作用，巨噬細胞是體內抗感染和抗腫瘤的主要效應細胞。當巨噬細胞受到異物、腫瘤等激活后可直接殺傷腫瘤細胞，而不傷害正常細胞，還可分泌NO、TNF-α等細胞因子發揮抗腫瘤效應并參與免疫調節[16]。一定濃度的印度墨汁經小鼠尾靜脈注射進入血液，經血流帶到肝、脾等處，而被這些部位的巨噬細胞及整個單核巨噬細胞系統的其他巨噬細胞迅速吞噬而從血液中廓清，在一定濃度范圍內，碳粒的清除速率與其劑量成指數函數關系。因此，可借助測定血液中碳粒的消失速度來反映單核巨噬細胞系統吞噬異物的能力。

表5 鷹嘴豆肽對H22小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力的影響(±s，n=10)Table 5 Effect of chickpea peptides on peritoneal macrophage phagocytotic activity in H22-bearing mices，n=10)

表5 鷹嘴豆肽對H22小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力的影響(±s，n=10)Table 5 Effect of chickpea peptides on peritoneal macrophage phagocytotic activity in H22-bearing mices，n=10)

分組鷹嘴豆肽劑量/(mg/(kg·d))腹腔巨噬細胞吞噬指數TC3.082±0.200 PC204.007±0.310* CPe-LD503.919±0.658* CPe-MD1003.413±0.421 CPe-HD2004.258±0.581*

由表5可知，鷹嘴豆肽對H22小鼠巨噬細胞吞噬能力的影響：CPe-HD＞PC＞CPe-LD＞CPe-MD＞TC，鷹嘴豆肽高劑量組和低劑量組都與腫瘤對照組有顯著性差異(P＜0.05)，其中鷹嘴豆肽高劑量組效果最好，巨噬細胞的吞噬能力約為腫瘤對照組的1.4倍，而且高于化療藥物環磷酰胺的作用效果。表明鷹嘴豆肽對H22小鼠巨噬細胞的吞噬能力有促進作用，可以促進H22小鼠非特異性免疫功能，從而發揮抗腫瘤的作用。

3 討 論

免疫治療在抗腫瘤過程中有著特殊的地位和作用。一般認為，機體免疫機能的降低有利于腫瘤的形成和發展，而癌癥患者常有免疫機能受抑制及免疫器官萎縮[17]。現代醫學在惡性腫瘤的防治過程中，把增強機體免疫功能作為非常重要的防病策略和治病目標。但是，化療藥物如本實驗中環磷酰胺的使用，引起了機體免疫機能嚴重下降，脾臟明顯萎縮，胸腺指數也較腫瘤對照組有所下降。

本研究中，鷹嘴豆肽對H22肝癌小鼠的活動力、反應能力以及被毛的色澤和濃密情況等有一定的改善作用。與腫瘤對照組相比，鷹嘴豆肽低、中、高3個劑量組均可以顯著抑制H22腫瘤的生長，與陽性對照組相比，沒有阻礙小鼠體質量的增長，對免疫器官也沒有造成損傷，并在一定程度上促進了免疫器官脾臟和胸腺的增長。鷹嘴豆肽各劑量組均提高了肝癌小鼠DTH反應強度，與腫瘤對照組相比差異顯著；同時，鷹嘴豆肽亦能顯著提高脾淋巴細胞的增殖能力，增強肝癌小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力，鷹嘴豆肽低劑量組和高劑量組與腫瘤對照組相比差異顯著。

綜上所述，鷹嘴豆肽對H22小鼠的細胞免疫功能、非特異性免疫功能均有一定的促進作用，提示鷹嘴豆肽可作用于免疫系統的多個環節，明顯改善機體的免疫功能，逆轉因腫瘤生長而造成的免疫抑制狀態，這可能是其抑制H22腫瘤生長的重要機制之一。因此可以認為，鷹嘴豆肽在發揮抑癌作用時，并不損壞機體的免疫功能，可以作為一種天然的抗腫瘤成分。另外，鷹嘴豆肽3個劑量組均有不同程度的調節H22小鼠的免疫功能，但是免疫功能并沒有隨著鷹嘴豆肽劑量的增加而增加，高劑量時效果并不一定比低、中劑量好，因此是否更大劑量的使用會出現免疫抑制或雙向調節的作用，其關系機制還需進一步研究闡明。

近些年，國內外對鷹嘴豆肽的研究已經非常多，但都集中在體外實驗，包括鷹嘴豆肽的分離純化[14]、抗菌能力[18]、抗氧化活性評價[19]、ACE抑制肽[20]等。本研究是利用動物模型對鷹嘴豆肽的抗腫瘤作用進行體內評價，具有較高的說服力。為進一步將鷹嘴豆肽開發成為一種新型的功能性基料或食品添加劑應用于食品工業和醫藥行業奠定了基礎。

[1]TREVISANI F, CANTARINI M C, WANDS J R, et al. Recent advances in the natural history of hepatocellular carcinoma[J]. Carcinogenesis, 2008, 29(7): 1299-1305.

[2]KRISHNA R, MAYER L D. Multidrug resistance (MDR) in cancer. Mechanisms, reversal using modulators of MDR and the role of MDR modulators in infiuencing the pharmacokinetics of anti-cancer drugs[J]. Eur J Pharm Sci, 2000, 11(4): 265-283.

[3]姚正良, 劉秦. 鷹嘴豆種質資源鑒定及開發利用前景[J]. 甘肅農業科技, 2001(8): 17-18.

[4]KAUR M, SINGH N. Characterization of protein isolates from different Indian chickpea(Cicer arietinum L.)cultivars[J]. Food Chemistry, 2007, 102(1): 366-374.

[5]ZIA-UL-HAQ M, IQBAL S, AHMAD S, et al. Nutritional and compositional study of Desi chickpea (Cicer arietinum L.) cultivars grown in Punjab, Pakistan[J]. Food Chemistry, 2007, 105(4): 1357-1363.

[6]曾虹燕, 周樸華, 候團章. 紅車軸草有效成分的研究進展[J]. 中草藥, 2001, 32(2): 189-190.

[7]LI Yanhong, JIANG Bo, ZHANG Tao, et al. Antioxidant and free radical-scavenging activities of chickpea protein hydrolysate (CPH)[J]. Food Chemistry, 2008, 106(2): 444-450.

[8]肖輝, 張月明, 于亞鷺. 鷹嘴豆精粉對高脂大鼠的血脂代謝的影響[J]. 中國公共衛生, 2005, 21(7): 843-844.

[9]王玉芹, 陳娜, 阿吉艾克拜爾, 等. 維藥鷹嘴豆及活性部位降血糖作用研究[J]. 中成藥, 2007, 29(12): 1832-1834.

[10]MOON Y J, SHIN B S, AN G, et al. Biochanin A inhibits breast cancer tumor growth in a murine xenograft model[J]. Pharmaceutical Research, 2008, 25(9): 2158-2163.

[11]CAMPOS-VEGA R, LOARCA-PIN~A G, OOOMAH B D. Minor components of pulses and their potential impact on human health[J]. Food Research International, 2010, 43(2): 461-482.

[12]AUERBACH L. Complementary and alternative medicine in the treatment of prostate cancer[J]. The Journal of Men,s Health & Gender, 2006, 3(4): 397-403.

[13]RICE L, SAMEDI V G, MEDRANO T A, et al. Mechanisms of the growth inhibitory effects of the isoflavonoid biochanin A on LNCaP cells and xenografts[J]. The Prostate, 2002, 52(3): 201-212.

[14]薛照輝, 劉珊娜, 李勇, 等. 鷹嘴豆蛋白的制備及其抗氧化活性[J].中國油脂, 2008, 33(8): 24-26.

[15]KOU Xiaohong, YU Wancong, WANG Yifan, et al. Antihyperlipidemic effect of hydrolysates of chickpea protein isolate in hyperlipidemic rats [C.]// International Conference of Natural Products and Traditional Medicine, Xi,an, 2009.

[16]張靜, 單保恩. 中藥抗腫瘤的免疫學調節作用和作用機制研究進展[J]. 中國免疫學雜志, 2006, 22(4): 385-388.

[17]ISKENDER A, AHMET Y. Antioxidant activity of protein extracts from heat-treated or thermally processed chickpeas and white beans[J]. Food Chemistry, 2007, 103(2): 301-312.

[18]CHU K T, LIU K H, NG T B. Cicerarin, a novel antifungal peptide from the green chickpea[J]. Peptides, 2003, 24(5): 659-663.

[19]ZHANG Tao, LI Yanhong, MIAO Ming, et al. Purification and characterisation of a new antioxidant peptide from chickpea(Cicer arietium L.) protein hydrolysates[J]. Food Chemistry, 2011, 128(1): 28-33.

[20]BARBANA C, BOYE J I. Angiotensin I-converting enzyme inhibitory activity of chickpea and pea protein hydrolysates[J]. Food Research International, 2010, 43(6): 1642-1649.

Antitumor and Immune-Enhancing Activity of Chickpea Peptides in Hepatoma H22-Bearing Mice

GAO Jie，WANG Hua，KOU Xiao-hong，XUE Zhao-hui*
(Department of Food Science, School of Chemical Engineering and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, China)

Objective: To find out whether chickpea peptides has antitumor and immune-enhancing activity in hepatoma H22-bearing mice. Methods: KM mice were randomly divided to normal control group, positive control group (PC), tumor control group and chickpea peptide groups at the doses of 50, 100 mg/(kg·d) and 200 mg/(kg·d). The H22-bearing mice were treated with chickpea peptide and Cy by gavage at the volume of 0.2 mL/mouse per day for 10 consecutive days. Distilled water was used for the normal control group. The body weight, tumor growth, tumor inhibitory rate, thymus index, spleen index, cellmediated immune functions including lymphocyte proliferation, peritoneal macrophage phagocytosis and splenic lymphocytes were detected at 24 h after the last administration. Results: An inhibitory tend of tumor growth was observed in the chickpea peptide group. Compared with the tumor control group, a significant increase in relative spleen weight, delayed-type hypersensitivity (DTH), peritoneal macrophage phagocytotic activity and splenic lymphocyte in the chickpea groups was also observed. However, no dose-dependent effect was achieved. Conclusion: Peptides derived from chickpea have anti-tumor activity probably by enhancing immune functions in hepatoma H22-bearing mice. The detailed mechanism remains to be further studied.

chickpea；anti-tumor；hepatoma-H22；immune function

TS255.1

A

1002-6630(2012)03-0215-05

2011-03-07

天津大學創新基金項目(2010XJ-0216）

高捷(1986—），女，碩士研究生，研究方向為天然產物化學及活性。E-mail：gaojie_950814@163.com

*通信作者：薛照輝(1973—），男，副教授，博士，研究方向為天然產物化學及活性。E-mail：zhhxue@tju.edu.cn