四子種王膠囊藥效學考察

閆國強 陳淑蘭 王旭初 董晶晶

(河北省滄州中西醫結合醫院，河北省滄州市黃河西路31號，061001)

四子種王膠囊是我院中藥制劑室研制的中藥復方制劑，具有溫陽益陰，補腎填精的功效，用于腎陽不足，陰精虧少，精冷虛弱，陽痿遺精，用于治療男性不育癥，精子數量少，活動力弱，成活率低，獲得了較好的臨床療效。我們設計四子種王膠囊對幼年大鼠睪丸曲細精管內精子數量影響的實驗，雌性大鼠妊娠率影響的實驗，以及觀察去勢大鼠附性腺器官包皮腺、精液囊+前列腺指數，對陽虛小鼠耐疲勞游泳時間，低溫存活能力的觀察，以期為四子種王膠囊的臨床應用提供實驗依據。

1 材料

1.1 藥物與試劑 四子種王膠囊(0.5g/粒，2.79g生藥/g干粉，河北省滄州中西醫結合醫院提供，批號20041119)由淫羊藿、鹿角膠、韭菜子、肉蓯蓉、熟地黃、枸杞子、菟絲子等藥材組成，臨用前將膠囊去殼，內容物用純水配成混懸液;五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠，批號4030099);氫化可的松注射液(山西晉新雙鶴藥業有限責任公司，批號200202144)。

1.2 儀器 JA3003電子天平，上海天平儀器廠;海爾電冰箱。

1.3 動物 SD大鼠，雌雄兼用，體重60～70g，由河北省實驗動物中心提供，許可證號為SCXK(冀)2003-1-003;昆明種小鼠，雄性，體重18～20g，由河北省實驗動物中心提供，許可證號為SCXK(冀)2003-1-003;動物飼料亦由該中心提供。

2 方法

2.1 幼年雄性大鼠生育能力的影響實驗 將雄性大鼠，隨機分為5組，每組10只，分別為空白對照組、四子種王膠囊小劑量組(0.45g·kg-1，相當于人臨床用量的3.5倍)、四子種王膠囊中劑量組(0.9g·kg-1，相當于人臨床用量的7倍)、四子種王膠囊大劑量組(1.8g·kg-1，相當于人臨床用量的14倍)及陽性藥五子衍宗丸組(2.8g/kg，相當于人臨床用量的14倍)。各組每日灌胃給藥(水)1次，容量為1mL/100g體重，連續28d，末次給藥后與雌鼠合籠(1∶2)，5d后取出雌鼠，分別觀察交配后雌鼠是否妊娠，以雌鼠妊娠百分率表示雄鼠生育能力，處死雄鼠，取一側附睪放入5mL生理鹽水中剪碎，研過80目銅篩。取0.5mL混懸液加入0.5mL精子稀釋液，用血球計數板計數各組大鼠精子數。

2.2 去勢雄鼠附性器官重量的影響實驗 將大鼠在乙醚麻醉下，消毒陰囊皮膚，摘除陰囊皮膚，摘除雙側睪丸，術后，肌注青霉素G鉀2萬U/kg，手術3d后，將50只去勢大鼠隨機分為5組，每組10只，分別為去勢模型組、四子種王膠囊小劑量組(0.45g·kg-1)，四子種王膠囊中劑量組(0.9g·kg-1)，四子種王膠囊大劑量組(2.8g·kg-1)及陽性藥五子衍宗丸組(2.8g·kg-1)。另取10只正常大鼠為空白對照組。各組大鼠均灌胃給藥(水)，容量為1mL/100g體重，每日1次，連續28d，末次給藥后2h，處死動物，分取包皮腺、前列腺及精液囊，稱其濕重，并計算包皮腺指數、精液囊+前列腺指數［1］。

2.3 陽虛小鼠抗疲勞能力 將60只小鼠隨機分為6組，每組10只，分別為正常對照組、陽虛模型組、四子種王膠囊小劑量組(0.6g·kg-1)、四子種王膠囊中劑量(1.2g·kg-1)、四子種王膠囊大劑量組(2.4g·kg-1)及陽性藥五子衍宗丸組(3.6g·kg-1)，各組每日灌胃給藥(水)1次，容量為0.2mL/10g體重，連續給藥7d，同時肌注氫化可的松0.75mg/只(正常對照組除外)，末次給藥后1h，進行游泳試驗，試驗時，分別將小鼠負重5g，投入水中，記錄小鼠開始游泳到沉入水底的時間，采用t檢驗比較各組間差異情況［1］。

2.4 陽虛小鼠低溫存活能力 將120只小鼠隨機分為6組，每組20只，分別為正常對照組、陽虛模型組、四子種王膠囊小劑量(0.6g·kg-1)、四子種王膠囊中劑量(1.2g·kg-1)、四子種王膠囊大劑量(2.4g·kg-1)及陽性藥五子衍宗丸組(3.6g·kg-1)，各組每日灌胃給藥(水)1次，容量為0.2mL/10g體重，連續給藥7d，同時肌注氫化可的松0.75mg/只(正常對照組除外)，末次給藥后1h，進行低溫存活試驗，試驗時，將小鼠放入溫度-14℃的冰箱中，2.5h后取出小鼠，記錄各組存活動物數［1］。

2.5 統計學處理計算資料以(ˉx±s)表示，采用SPSS10.0統計軟件包單因素方差分析SNK法(q檢驗)比較各組間差異情況。

3 結果

3.1 對幼年雄性大鼠生育能力的影響 四子種王膠囊(0.45g·kg-1、0.9g·kg-1、1.8g·kg-1)組精子數目明顯較空白對照組大鼠多，雌性大鼠妊娠率明顯高于空白對照組(P＜0.05)，表明其可提高雄性大鼠生育能力。結果見表1。

表1 四子種王膠囊對雄性大鼠生育能力的影響(ˉx±s，n=10)

3.2 對去勢雄鼠附性器官重量的影響 四子種王膠囊(0.45g·kg-1、0.9g·kg-1、1.8g·kg-1)組大鼠包皮腺指數、精液囊+前列腺指數均明顯高于去勢模型組(P＜0.01)。結果見表2。

3.3 對陽虛小鼠抗疲勞能力的影響 四子種王膠囊(0.6g·kg-1、1.2g·kg-1、2.4g·kg-1)組小鼠游泳時間均明顯較陽虛模型組長(P＜0.05或P＜0.01)。結果見表3。

表2 四子種王膠囊對去勢大鼠重要附性器官的影響(ˉx±s，n=10)

表3 四子種王膠囊對陽虛小鼠游泳時間的影響(ˉx±s，n=10)

3.4 對陽虛小鼠耐寒能力的影響 四子種王膠囊(0.6g·kg-1、1.2g·kg-1、2.4g·kg-1)組存活動物數明顯較陽虛模型組多(P＜0.05或P＜0.01)。見表4。

表4 四子種王膠囊對陽虛小鼠低溫存活能力的影響(ˉx±s，n=10)

4 討論

由于生活方式的改變以及環境污染的加重，男子不育患者近年來呈上升的趨勢，近20年來人類精子數量平均每年以2%的速度下降［2］。男性不育中醫學稱之為“無子”“男子艱嗣”或“絕育”。《黃帝內經》記載了男性不育的“精少”“精時自下”“陰痿”“白淫”等癥，從中醫辨證分析，男性不育患者大多為腎虛之證。腎藏精，主生殖，腎陽為用，腎陰為體，陽生則陰長，腎之元陽虧虛則腎精不足，而致不育。四子種王膠囊中淫羊藿溫補腎陽，鹿角膠乃血肉有情之品，既溫腎陽，又益精血，二者共為君藥;韭菜子、肉蓯蓉溫陽補腎，固精;熟地黃、枸杞子滋陰養血，菟絲子陰陽并補，共為臣藥;桑寄生、覆盆子、石斛補腎養陰固精而為佐藥;牛膝補肝腎，行血脈，引藥入腎為使藥。諸藥配伍，共達陽生陰長，陰陽互補，互生，此精之所由生也。現代藥理學研究證明淫羊藿中主要成分為淫羊藿苷，屬黃酮類化合物，具有調節內分泌和提高雄激素水平的作用［3］;鹿角膠有性激素樣作用，能明顯增強雄鼠交配能力［4］;菟絲子水提物能顯著提高精子懸液SOD活力，降低MDA含量，抑制精子膜脂質過氧化反應，對精子膜結構和功能具有明顯的保護作用［5］。本實驗證明，四子種王膠囊能使幼年大鼠睪丸曲細精管內精子數目明顯增多，并使雌性大鼠妊娠率明顯提高;能顯著增加去勢大鼠附性腺器官包皮腺、精液囊+前列腺指數;明顯延長陽虛小鼠耐疲勞游泳時間，提高陽虛小鼠低溫存活能力，為四子種王膠囊治療精子數量少、活動力弱、成活率低造成的男性不育提供了必要的藥理學依據。

［1］陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京:人民軍醫出版社，2006:717，719.

［2］江魚.男性不育癥診斷和治療進展［J］.中國男科學雜志，2000，14(3):53.

［3］章振寶，田生平，楊鏡秋，等.淫羊藿苷與睪酮治療亞急性衰老雄性大鼠的實驗研究［J］.中國男科學雜志，2006，20(8):13.

［4］聶淑琴，梁愛華.鹿角膠新老劑型壯陽、補血作用的比較研究［J］.中國中藥雜志，1996，21(10):625.

［5］楊欣，丁彩飛，張永華，等.菟絲子水提物對人精子膜結構和功能氧化損傷的干預作用［J］.中國藥學雜志，2006，41(7):515.