骨髓間充質干細胞移植改善腦梗死患者神經功能機制研究

何振東

（南京市溧水縣中醫院，江蘇 南京 211200）

隨著分子生物學和生命科學的發展，干細胞移植已成為醫學研究和治療的一種重要途徑，它是用細胞替代治療遺傳和退行性等疾病的新方法。骨髓間充質干細胞（BMSCs）是一種來源于中胚層的，具有多向分化能力的組織干細胞，實驗研究發現［1］，BMSCs在治療腦梗死及后遺癥方面具有良好的療效和安全性。本研究通過分析2010年以來用BMSCs治療38例腦梗死的臨床資料，希望為臨床治療提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2010年4月—2012年2月收治的腦梗死患者38例，將其隨機分為治療組和對照組。治療組20例，其中男12例，女8例，年齡49～74歲，平均（56.4±7.9）歲；對照組18例，男11例，女7例，年齡47～76歲，平均（54.3±8.7）歲。兩組患者一般資料無統計學差異（P＞0.05），所有患者均符合第四屆腦血管病會議確定的診斷標準［2］。

1.2 納入標準

所有符合診斷標準的腦梗死患者，包括腦卒中、腦栓塞、腦血栓。

1.3 排除標準

急性腦出血患者，包括暫時性腦缺血、對治療藥物有不良反應的患者、顱內腫瘤、腦外傷及其他肝臟、腎臟疾病者和無自主能力者。

1.4 治療方法

對照組采用常規的治療方法：使用腦神經保護藥如單唾液酸四己酸神經節苷酯、腦蛋白水解物等，口服辛伐他汀等他汀類藥物，同時使用抗凝藥物如低劑量阿司匹林等。此外，加強運動康復如四肢關節的主動運動，緩慢行走運動等，培養患者的生活自理能力，運動療程大于2個月。治療組在此基礎上進行肝細胞移植。治療前經患者或家屬簽署知情同意書，骨髓穿刺，取自體骨髓300mL，同時用肝素抗凝；按照 Dharmasaroja法［3］進行培養分離：利用 DME／F12（1∶1）培養基培養，培養溫度37℃；再用5%的CO2培養箱培養，每3天換液一次，直到細胞基本融合后再用胰蛋白酶酶解；最后用生理鹽水配置成干細胞液（1×108／mL）。將配置好的干細胞液靜脈滴注患者，同時密切觀察生命指標，于3個月后判斷療效。

1.5 評價標準

按照美國國立衛生院的NHISS和BI神經損傷評分評價患者治療前后的神經功能；再對照治療前后的影像學判斷患者的腦灌注量指標。

1.6 統計學分析

所有研究數據均采用SPSS 17.0統計學軟件包進行統計分析，計量資料以（）表示，組間率的比較采用χ2檢驗。若P＜0.05則表示差異有統計學意義。

2 結果

治療3個月后，治療組和對照組的NIHSS和BI均有提高，提示我們無論常規藥物治療還是加用干細胞移植治療，對腦梗死都有一定療效，但治療組的療效和腦部灌注量均優于對照組（P＜0.01），見表1。

表1 兩組評價指標對比（）

表1 兩組評價指標對比（）

BI NHISS類型 h灌注量治療前 治療后治療組 18 36.9±7.9 56.2±6.1 10.2±2.3 4.9±2.1 45.2±1治療前 治療后 治療前 治療后2.5 65.2±16.2對照組 20 39.1±6.2 79.1±7.1 10.8±2.9 7.1±2.3 48.3±9.8 46.2±10.5 t 3.49 10.75 4.55 P P＜0.01 P＜0.01 P＜0.01

3 討論

腦梗死具有發病率高、死亡率高等特點，嚴重威脅人類的生命安全，同時腦梗死治療后易出現偏癱及行動障礙等，給社會和家庭帶來沉重負擔。目前治療的方式主要是利用一些溶栓或改善微循環藥物，但由于腦梗死發病急、并發癥多，療效往往不理想，因此目前對此病的研究重點主要是如何提高神經細胞的再生以改善神經的各項功能，使患者更好地恢復。

干細胞移植是當今醫學研究的熱點，它通過細胞注入來提高機體的自身更新能力。骨髓間充質干細胞是存在于骨髓中的一種非造血干細胞，有很高的增殖和更新能力，能夠多向分化。大量研究證實［4］，BMSCs在治療腦梗死方面具有極大的優越性，它主要通過以下途徑起到治療作用：①替代損傷的神經細胞，有學者發現［5］人類BMSCs移植到腦缺血的大鼠中，可以分化為神經元細胞，提高大鼠的神經系統各項功能，減輕各項功能障礙；②分泌營養因子，研究發現［6］，移植的BMSCs可以分泌VEGF（血管生成因子）和神經生長因子來改善神經系統功能和促進腦部新血管的生成；③刺激內源性細胞的生長，這可能與BMSCs可以分泌細胞生長因子，改善細胞的形成內環境，激活新神經元的生成有關；④減少腦部膠質瘢痕形成，研究證實，BMSCs可以通過炎性調節來抑制腦部膠質細胞的形成，減少腦部膠質瘢痕形成，改善腦梗死的癥狀，減少后遺癥的發生［7］。

本研究發現，采用自體骨髓間充質干細胞移植治療腦梗死，可以明顯提高腦梗死的損傷修復，增加腦灌注量。治療組中，基礎治療加用BMSCs可明顯減少NHISS和BI評分，與對照組相比，有顯著性差異（P＜0.01）；同時在腦灌注量中，治療組（65.2±16.2）也明顯高于對照組（46.2±10.5），兩組差異顯著（P＜0.01）。因此，骨髓間充質干細胞移植方法治療腦梗死療效顯著，值得臨床推薦應用。

［1］桂莉，范文輝，李露斯，等.大鼠骨髓間充質干細胞移植后大鼠腦梗死區超微結構變化的研究［J］.第三軍醫大學學報，2004，26（6）：523－525.

［2］王燕琳，閆禹，宋波，等.骨髓間充質干細胞移植影響慢性腦缺血大鼠認知功能及海馬區Nogo－A、NgR的表達［J］.中國組織工程研究，2012，16（10）：1833－1836.

［3］彭玉，張其梅，游輝，等.骨髓間充質干細胞移植促進腦缺血性損傷大鼠神經細胞黏附分子的表達［J］.中國組織工程研究，2012，16（23）：4187－4192.

［4］孟憲國，朱士文，高華，等.自體骨髓間充質干細胞移植治療腦梗死：6個月隨訪［J］.中國組織工程研究與臨床康復，2009，13（32）：6374－6378.

［5］梅雪蕊.補陽還五湯聯合骨髓間充質干細胞移植對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用［D］.鄭州：河南中醫學院，2008，12（3）：637－639.

［6］張婷勇.骨髓間充質干細胞移植并用單唾液酸神經節苷脂治療大鼠腦梗死［J］.中國組織工程研究與臨床康復，2011，15（14）：2557－2561.

［7］梁松嵐，郝光，楊風剛，等.骨髓間充質干細胞移植治療對大鼠腦梗死后神經再生抑制因素的影響［J］.中風與神經疾病雜志，2011，28（9）：781－785.