大馬士革玫瑰花中非環(huán)單萜衍生物的研究

王 輝

(寶雞文理學(xué)院化學(xué)化工系，陜西 寶雞 721013)

玫瑰(Rosa)為薔薇科薔薇屬植物，在世界范圍內(nèi)種植很廣，主要分布于北半球，以保加利亞、土耳其、摩洛哥、法國(guó)、俄羅斯等國(guó)家為主，我國(guó)亦有栽培[1]。玫瑰的品種繁多，有重瓣玫瑰、大馬士革玫瑰、百葉玫瑰、香水月季、墨紅、白玫瑰、木香花等，其中保加利亞的大馬士革玫瑰含精油最多[2，3]。目前對(duì)大馬士革玫瑰花的研究主要集中在玫瑰精油上，較少研究大馬士革玫瑰花中的萜類(lèi)化合物及其它化合物的生物合成途徑。8-羥基芳樟醇(E-3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3,8-二醇)、8-羥基香葉醇[(2E,6E)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1,8-二醇]和8-羥基橙花醇[(2Z,6E)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1,8-二醇]屬單萜類(lèi)化合物，具有較強(qiáng)的生物活性和濃郁的香氣，是醫(yī)藥、化妝品和食品工業(yè)的重要原料，其中8-羥基香葉醇在萜類(lèi)化合物的生物合成途徑中具有非常重要的作用，是藥用價(jià)值廣泛的單萜吲哚類(lèi)生物堿(如利血平、喜樹(shù)堿等)生物合成的關(guān)鍵中間體，也是具有諸多生物活性的重要單萜化合物(如環(huán)烯醚萜苷)生物合成的重要前體[4，5]。這3個(gè)化合物在國(guó)產(chǎn)的大馬士革玫瑰花中未見(jiàn)報(bào)道。

作者在此以陜西渭南產(chǎn)大馬士革玫瑰花為研究對(duì)象，采用溶劑萃取法、柱層析分離法和高效液相色譜法分離大馬士革玫瑰花中的化學(xué)成分，并利用GC-EI-MS和1HNMR分析鑒定大馬士革玫瑰花中是否含有8-羥基芳樟醇、8-羥基香葉醇、8-羥基橙花醇。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料、試劑與儀器

大馬士革玫瑰花(R.damascena)采自渭南白楊區(qū)玫瑰精油廠(chǎng)種植區(qū)。

8-羥基芳樟醇、8-羥基香葉醇、8-羥基橙花醇，Alfa Aesar公司；氯仿(分析純)、乙醚(分析純)、正丁醇(分析純)、75%乙醇(工業(yè)品)，天津富宇精細(xì)化工廠(chǎng)；甲醇(分析純)，西安化學(xué)試劑廠(chǎng)；石油醚(分析純)，成都聯(lián)合化工試劑研發(fā)所；乙酸乙酯(分析純)，天津化學(xué)試劑有限公司；甲醇(色譜純)，Burdick & Jackson公司；柱層析硅膠G(200目)，青島海洋化工集團(tuán)公司。

Shimadzu GC2010型氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀，日本島津公司；rts-5ms型色譜柱，RESTEK公司；2695型高效液相色譜儀、2696型紫外檢測(cè)器，Waters 公司；HC-C18色譜柱，Agilent公司；BP221S型微量電子天平，Sartorius公司；DT-1000型電子天平，北京醫(yī)用天平廠(chǎng)；RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠(chǎng)；SHB-3型循環(huán)水多用真空泵，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；WG71型電熱鼓風(fēng)干燥箱，天津泰斯特儀器有限公司；INOVA型核磁共振儀(400 MHz)，美國(guó)Varian公司。

1.2 大馬士革玫瑰花中化學(xué)成分的提取分離

取新鮮大馬士革玫瑰花10 kg,用75%乙醇于室溫提取2次，每次提取7 d，合并2次提取液，減壓濃縮成浸膏后加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，再將石油醚和乙酸乙酯萃取物合并，減壓蒸發(fā)得浸膏后分散于水中，用乙醚萃取，分離出乙醚層。

將乙醚浸膏(約16 g)經(jīng)過(guò)硅膠色譜柱，用氯仿-甲醇梯度洗脫得到10個(gè)組分(Fr1～Fr10)。將Fr2(2.2 g)反復(fù)經(jīng)硅膠色譜柱，用石油醚-乙酸乙酯(5∶1～2∶1)梯度洗脫得化合物Ⅰ(10 mg)；將Fr2(3.0 g)反復(fù)經(jīng)硅膠色譜柱，用石油醚-乙酸乙酯(3∶1～1∶1)梯度洗脫，得一混合物，經(jīng)HPLC進(jìn)一步分離得化合物Ⅱ(6 mg)和化合物Ⅲ(7 mg)。通過(guò)GC-EI-MS和1HNMR分析化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。

大馬士革玫瑰花中化學(xué)成分的分離提取流程見(jiàn)圖1。

圖1 大馬士革玫瑰花中化學(xué)成分的分離提取流程

1.3 GC-EI-MS條件

GC條件：rts-5ms毛細(xì)管色譜柱(30 m× 0.25 mm，0.25 μm)；載氣為高純氦氣(99.999%)，氦氣流速1.0 mL·min-1；進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度320 ℃；柱箱溫度60 ℃；壓力100 kPa；總流量35.2 mL·min-1；柱流量1.61 mL·min-1；線(xiàn)速度46.3 cm·s-1；吹掃流量3.0 mL·min-1；分流比19.0。程序溫度：初始60 ℃，保持2 min;以5 ℃·min-1升至300 ℃，保持10 min。

質(zhì)譜條件：電子源為EI；EI電子能量為70 eV；離子源溫度180 ℃；接口溫度300 ℃。

1.4 HPLC條件

檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm；上樣量50 μL(1 mmol·L-1)；流速0.75 mL·min-1；流動(dòng)相：流動(dòng)相A為甲醇，流動(dòng)相B為水，0 min，50%A→20 min，90%A→30 min，50%A→35 min，50%A。

2 結(jié)果與討論

2.1 化合物Ⅰ的鑒定

化合物Ⅰ的1HNMR(400 MHz，CDCl3)，δ,ppm:5.88(1H，dd，J=10.754 Hz，10.751 Hz，H-2)，5.39(1H，t，H-6)，5.21(1H，dd，J=17.3 Hz，1.2 Hz，H-1b)，5.05(1H，dd，J=10.8 Hz，1.2 Hz，H-1a)，3.98(2H，s，H-8)，2.06(4H，m，H-4，H-5)，1.66(3H，s，Me-C3)，1.29(3H，s，Me-C7)。

化合物Ⅰ在GC上的保留時(shí)間為17.528 min。

在相同的GC-EI-MS條件下，標(biāo)準(zhǔn)品8-羥基芳樟醇的保留時(shí)間為17.575 min，且化合物Ⅰ的MS圖與其MS圖相似度為98%(圖2)，再結(jié)合1HNMR數(shù)據(jù)確定化合物Ⅰ為8-羥基芳樟醇。

圖2 8-羥基芳樟醇標(biāo)準(zhǔn)品(a)與化合物Ⅰ(b)的MS圖譜

2.2 化合物Ⅱ的鑒定

化合物Ⅱ的1HNMR(400 MHz，CDCl3)，δ，ppm:5.40(2H，m，H-2，H-6)，4.16(2H，d，J=7.0 Hz，H-1)，3.99(2H，s，H-8)，2.17(2H，m,H-5)，2.08(2H，m，H-4)，1.74(3H，s，Me-C3)，1.68(3H，s，Me-C7)。

化合物Ⅱ在GC上的保留時(shí)間為21.500 min。

在相同的GC-EI-MS條件下，標(biāo)準(zhǔn)品8-羥基香葉醇的保留時(shí)間為21.680 min，且化合物Ⅱ的MS圖與其MS圖相似度為98%(圖3)，再結(jié)合1HNMR數(shù)據(jù)確定化合物Ⅱ?yàn)?-羥基香葉醇。

圖3 8-羥基香葉醇標(biāo)準(zhǔn)品(a)與化合物Ⅱ(b)的MS圖譜

2.3 化合物Ⅲ的鑒定

化合物Ⅲ的1HNMR(400 MHz，CDCl3)，δ，ppm:5.35(2H，m，H-2，H-6)，4.00(2H，d，J=7.3 Hz，H-1)，3.91(2H，s，H-8)，2.07(4H，m，H-4，H-5)，1.67(3H，s，Me-C3)，157(3H，s，Me-C7)。

化合物Ⅲ在GC上的保留時(shí)間為21.093 min。

在相同的GC-EI-MS條件下，標(biāo)準(zhǔn)品8-羥基橙花醇的保留時(shí)間為21.192 min，且化合物Ⅲ的MS圖與其MS圖相似度為95%(圖4)，再結(jié)合1HNMR數(shù)據(jù)確定化合物Ⅲ為8-羥基橙花醇。

圖4 8-羥基橙花醇標(biāo)準(zhǔn)品(a)與化合物Ⅲ(b)的MS圖譜

3 結(jié)論

利用GC-EI-MS 和1HNMR鑒定出大馬士革玫瑰花中所含的3個(gè)非環(huán)單萜類(lèi)化合物分別為：8-羥基芳樟醇、8-羥基香葉醇、8-羥基橙花醇。為研究玫瑰花中萜類(lèi)化合物的生物合成途徑提供了有效的工具，也為大馬士革玫瑰花中主要香氣成分的分析提供了新的方法。

參考文獻(xiàn)：

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