復方益母膠囊的提取工藝研究

林凡友，王世禮

(山東翔宇健康制藥有限公司，山東 臨沂 276023)

復方益母膠囊是我公司獨家產品，現已批準為國家中藥保護品種。該品種由益母草、當歸、川芎、木香四味藥材組方而成，目前有關上述四味藥材的文獻資料很多，其提取工藝也是多種多樣。益母草為復方益母膠囊的君藥，其主要的有效成分為益母草堿、水蘇堿等生物堿類，其流浸膏均采用水提醇沉法，益母沖劑采用水提法，益母草制劑的質量標準研究多采用鹽酸水蘇堿做質控指標，在八十年代多采用測定總生物堿含量。當歸化學成分為揮發油、有機酸、糖類及氨基酸等，提取方法有蒸餾法、醇提法及水提法;川芎主含生物堿、阿魏酸等有機酸及揮發油等成分，多采用醇提工藝;木香化學成分為揮發性成分，多采用醇提法、水煎法。為探索復方益母膠囊各藥材有效成分的分離提取，保證產品質量，我們對復方益母膠囊的提取工藝進行了研究，確定了最佳提取工藝，研究結果表明，該提取方法操作簡單，實用性強，能充分保證該產品有效成分的提取，進一步提升了該產品的質量標準。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 CS－9301型薄層掃描儀(日本島津公司)，定量毛細管(日本島津公司)，939全自動薄層制板器。

1.2 試藥 試驗用藥材益母草、當歸、川芎、木香均購于當地中藥材供應站，經鑒定均為藥典正品，試驗用中性氧化鋁購于國藥集團化學試劑有限公司。硅膠G，甲醇、丙酮、無水乙醇、鹽酸、三氯化鐵等所用試劑均為分析純。鹽酸水蘇堿(批號為110712－200306)由中檢所提供，供含量測定用。

2 方法與結果

2.1 益母草提取工藝的研究

2.1.1 樣品溶液的制備 水提取工藝:取益母草250g，加水煎煮二次，第1次3 h，第2次2 h，均加8倍量水，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.12～1.14(60℃)，冷藏24 h，濾過，濾液濃縮至每mL含2.5 g原藥材的濃縮液，備用。

水提醇沉工藝:取益母草250g，同水提取的工藝方法制成水提取濃縮液加入乙醇，使含醇量達60%，冷藏24 h，濾過，濾液回收乙醇，并濃縮至每mL含2.5 g原藥材的濃縮液，備用。

樣品液的制備:上述水提取工藝及水提醇沉工藝制備的濃縮液，分別取1mL，蒸干，殘渣用甲醇5mL使溶解，并分次轉移至已處理好的氧化鋁柱(內徑約0.9 cm，中性氧化鋁2g，濕法裝柱，用乙醇10mL預洗)上，用70%的乙醇50mL洗脫，收集洗脫液，揮干乙醇，殘渣加甲醇使溶解并定容于2mL量瓶中，搖勻，備用。

對照品溶液的制備:取鹽酸水蘇堿對照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，備用。

含量測定方法:照薄層色譜法［1］(《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取供試品溶液5～12μL、對照品溶液2μL與6μL，分別交叉點于同一以0.2%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以丙酮－無水乙醇－鹽酸(10∶10∶1)為展開劑，預飽和1 h后展開，展距10 cm，取出，晾干，100℃烘約10min，取出，放冷，噴以新鮮配制的稀碘化鉍鉀與1%三氯化鐵無水乙醇溶液(2∶1)的混合溶液，冷風吹干，至斑點清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B薄層掃描法)進行掃描，波長λs=517 nm，λr=700 nm，測量供試品吸收度積分值與對照品積分值，計算，即得。

2.1.2 不同工藝樣品液的含量測定 見表1。

表1 水提法及水提醇沉法水蘇堿含量比較(mg·mL－1)

由此可表明，水提法及水提醇沉法兩種工藝水蘇堿含量無明顯的差異。經藥材測定，水蘇堿提取率均在50%以上。但水提法樣品液粘稠，測定誤差較大;且出膏率較高，含無效物質多，故應采用水提醇沉法。

2.2 不同醇沉濃度對水蘇堿含量的影響

2.2.1 樣品溶液的制備 取益母草750g，按水提醇沉法工藝進行提取，將水提取的濃縮液分為3份，分別以50%、60%、70%乙醇進行醇沉，冷藏24 h，按水提醇沉法工藝回收乙醇制成每mL含2.5 g原藥材的濃縮液，備用。將不同醇濃度的藥液，按含量測定方法制備供試品溶液。

2.2.2 不同工藝樣品的含量測定 按上述含量測定方法測定樣品液中水蘇堿的含量，結果見表2。

表2 不同醇濃度對水蘇堿含量的影響(mg·mL－1)

測定的結果表明，不同醇沉濃度對水蘇堿含量無明顯的影響。考慮抽濾順利及成品的澄明度等因素，確定采用60%醇沉濃度。

2.3 當歸、川芎、木香提取工藝的確定 當歸、川芎、木香三味藥，考慮其有效成分和作用部位多為揮發油、內酯、生物堿等醇溶性的成分，且當歸還含有大量的糖類，約占40%，提取液含粘稠物質，過濾困難，烘干，過篩，裝膠囊均受影響，成品吸潮性較大，為此考察了不同醇濃度的提取工藝對出膏率及干膏粉吸潮性的影響。

2.3.1 不同醇濃度樣品的制備 按處方量取當歸136 g、川芎68 g、木香25 g，共取3份，分別以50%、60%、70%乙醇(均加入8倍量的乙醇)回流提取3 h，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用。

2.3.2 不同醇濃度樣品質量比較 取上述3種醇濃度提取的干膏粉稱重，計算烘干所需的時間，并將1 g干膏粉室溫(濕度50%)放置1 d，測定水分，觀察干膏粉吸潮性，結果見表3。

表3 不同工藝出膏率、烘干時間及吸潮性

結果表明，不同醇濃度提取對干膏粉出膏率(去除水分)稍有影響，但50%及60%醇濃度提取的稠膏由于提取糖類較多，烘干時間長，干膏粉吸潮性較大，給下一步膠囊工藝帶來了很大的困難，因此，考慮節省工時以及操作方便，成品的穩定性好等諸因素，確定了采用70%乙醇提取。

3 結論

通過以上的試驗結果表明，復方益母膠囊中的益母草采用水提醇沉法及60%濃度的乙醇進行提取，當歸等三味藥材采用70%濃度的乙醇進行提取，可以有效控制復方益母膠囊中有效成分的分離提取，保證該制劑產品質量。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:172.