甘藍型油菜與菘藍原生質體融合及植株再生體系的研究

杜雪竹 李再云

摘要：以甘藍型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）和菘藍（Ｉｓａｔｉｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉａ）葉片為材料提取原生質體，采用ＰＥＧ—高鈣高ｐＨ法融合親本原生質體，采用固液雙層培養法誘導愈傷組織的形成。研究適宜原生質體分離的酶種類及濃度，并考察了激素種類和用量對愈傷組織誘導和分化的影響。結果表明，５ ｍｇ／Ｌ纖維素酶＋３ ｍｇ／Ｌ離析酶適合甘藍型油菜和菘藍的酶解。各培養基中適宜的激素濃度分別為，誘導培養基ＰｅｌｌＢ １．０ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋１．０ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．25 ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ；增殖培養基ＰｅｌｌＣ ２．０ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ；分化培養基ＰｅｌｌＥ ２．０ ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ＋０．１ ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．０２ ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ。獲得了１５株再生植株，雜種幼苗葉片均呈深綠色，葉表面覆有厚的蠟質，葉片肥厚，植株在成熟期時株高比甘藍型油菜矮，開花較晚，雄蕊發育不完全，雜種體細胞染色體數目為４８～６６。

關鍵詞：甘藍型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）；菘藍（Ｉｓａｔｉｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉａ）；原生質體融合；植株再生