奎屯墾區棉花黃萎病發生規律及防控技術研究

郭天鳳,馬野萍,李國萍,丁榮榮,蔡曉麗,王國平,張軍

摘要：測定了奎屯墾區棉花黃萎病致病類型，明確了該區棉花黃萎病發生與溫、濕度等氣象因子的關系；通過黃萎病抗性鑒定，表現耐病的品種（系）有１３個；利用選擇性培養基以新陸早３５號為供試材料分析了棉花黃萎病發病與土壤中黃萎病菌微菌核數量之間的關系。獲得了新陸早３５號菌核含量致病的臨界點。調查了生物藥劑萎菌凈防治棉花黃萎病的效果。

關鍵詞：棉花黃萎病；發生規律；防控技術；致病臨界點；奎屯墾區

中圖分類號：Ｓ４３５．６２１．２＋４文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）05－0928-03

Study on the Occurrence Regulation and Control Technology of Cotton Verticillium Wilt in Kuitun Reclamation Area

ＧＵＯ Ｔｉａｎ－ｆｅｎｇ１a，ＭＡ Ｙｅ－ｐｉｎｇ１a，ＬＩ Ｇｕｏ－ｐｉｎｇ１a，ＤＩＮＧ Ｒｏｎｇ－ｒｏｎｇ１a，ＣＡＩ Ｘｉａｏ－ｌｉ１a，ＷＡＮＧ Ｇｕｏ－ｐｉｎｇ１a，

ＺＨＡＮＧ Ｊｕｎ１a，ＺＨＡＯ Ｆｕ－ｑｉａｎｇ１a，ＺＨＡＮＧ Ｄｏｎｇ－ｂｉｎ1b，ＬＩ Ｊｉａ－ｓｈｅｎｇ１a，ＬＩＵ Ｈａｉ－ｙａｎｇ2，ＹＡＮＧ Ｓｅｎ2

（１a．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ； 1b．Ｒｅｇｉｍｅｎｔａｌ Ｆａｒｍ １２９， Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｄｉｖｉｓｉｏｎ ７， Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｃｏｒｐｓ， Ｋｕｉtｕｎ ８３３２００，Ｘｉｎｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ； 2．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＰｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｕｒｕｍｑｉ ８３００００，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｔｙｐｅ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ ｉｎ Ｋｕｉｔｕｎ ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ ａｒｅａ was determined； ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｒｅｌａｔｉｖｅ ｍｏｉｓｔｕｒｅ， ｒａｉｎｆａｌｌ was defined． It was ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ that 13 ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｗｅｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ against vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ was analyzed ｂｙ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ Ｘｉｎｌｕｚａｏ ３５． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｏｉｎｔ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｌｅｒｏｔｉａ ｏｎ Ｘｉｎｌｕｚａｏ ３５ was obtained； ａｎｄ ｔｈｅ control ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｂｉｏｔｉｃ fｕｎｇｉｃｉｄｅ dａｈｌｉａｅ ｎｅｔ were investigated．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ； ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ； ｃｏｎｔｒｏｌ ｍｅｔｈｏｄｓ； ｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｏｉｎｔ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ； Ｋｕｉｔｕｎ ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ ａｒｅａ

由大麗輪枝菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ Ｋｌｅｂ．）引發的棉花黃萎病是土傳植物維管束萎蔫病害，是危害棉花的最重要病害之一。該病在奎屯墾區致病力明顯增強，發病時期不斷提前，極大地影響了棉花的生產和棉農的植棉積極性［１，２］。土壤中棉花黃萎病菌的大量積累是該病發生流行的重要原因［３，４］。目前，防治棉花黃萎病的主要方法是選育與應用抗病品種。藥劑防治中使用化學藥劑對環境造成了危害。拮抗微生物和農業措施防病效果都不是很理想［５］。國外已有報道，拮抗微生物的種群密度大小與其寄主病原菌種群密度的相關性是保持防治效果穩定的重要條件，其相關性越大防治的效果越顯著［６，７］。希臘、澳大利亞等國已將生物防治黃萎病的重點轉向黃萎菌的初侵染源——微菌核［８，９］，目前尚未見對土壤中黃萎病菌核數量與品種抗病性之間的相互關系和致病臨界點進行研究。因此，明確奎屯墾區棉花黃萎病的致病類型和發生發展規律，客觀評價主栽品種的抗黃萎病能力，深入分析土壤中黃萎病菌核含量與品種抗病性之間的相互關系和致病的臨界點，對今后品種布局以及棉花黃萎病的綜合控制有很重要的意義。

１材料和方法

１．１材料和試劑

以新陸早３５號和農七師主栽棉花品種、新育品種等３８份材料為供試材料。采集不同類型棉田的土壤，用直徑10 ｃｍ的網孔直徑為３８ μｍ和１５０ μｍ的網篩過篩。

選擇性培養基：改良ＭＳＭ培養基［３］（玻璃紙浸出液、蔗糖２ ｇ、ＥＤＴＡ－Ｎａ２ ０．１５ ｇ、２ ｍｏl／Ｌ的ＭｇＳO４·７Ｈ２Ｏ ０．５ ｍＬ、２ ｍｏl／Ｌ的ＫＮＯ３ ５ ｍＬ、1 ｍｏｌ／Ｌ的Ｋ２ＨＰＯ４ ２ ｍＬ，Ｔｅｒｇｉｔｏｌ－ＮＰ１０ １ ｍＬ、Ｂｉｏｔｉｎ 1 ｍｇ、1 ｍｏｌ／Ｌ的ＴＲＩＳ ３５ ｍＬ、ｌ ｍｏｌ／Ｌ的ＴＲＩＳ－ＨＣｌ １５ ｍＬ、瓊脂 １５ ｇ、蒸餾水１ 000 ｍＬ、土霉素５０ ｍｇ／Ｌ、青霉素２００ ｍｇ／Ｌ）。

１．２病菌的篩選

采用土壤水篩法［３］稱取上述土樣2．０ ｇ，共３份，每份分別放入盛有２００ ｍＬ水的三角瓶中，加入玻璃珠以剛好鋪滿三角瓶底部為宜，靜置１０ ｍｉｎ，在２００ ｒ／ｍｉｎ的搖床上搖３０ ｍｉｎ。然后倒入上層孔徑１５０ μｍ、下層孔徑３８ μｍ的雙層細篩里，在自來水下將泥土沖洗干凈。將留在下層篩網上的土壤殘留物全部轉移到５0 ｍＬ三角瓶中，用無菌水定容到2０ ｍＬ。將定容好的土樣液用移液槍每次均勻吸取２ ｍＬ于MSM培養基表面均勻涂布，每種培養基接種10皿（接種前將三角瓶中的土樣液充分搖勻），放在超凈工作臺上吹干，在２５ ℃下黑暗培養，分別在１、２、３、４周后于體視顯微鏡下進行檢查。每種培養基10個皿的檢驗結果數目之和就是所測2 ｇ土樣中所含微菌核的量。試驗設３次重復。

1.3生物藥劑防治

供試藥劑為可濕性粉劑萎菌凈（河北省農林科學院植物保護研究所提供）。棉花播種前用種子重量10%的藥劑拌種。試驗在本所黃萎病圃進行，設拌種處理、未拌種處理、新陸早6號未拌種處理3種處理方式。設3次重復。每處理種植2膜8行，行長6 m，每小區18 m2。統一地塊、品種，調查棉花黃萎病的發生情況，比較拌種與不拌種對棉花黃萎病發生的影響。

２結果與分析

２．１奎屯墾區棉花黃萎病菌的致病力

采集奎屯墾區棉田棉花黃萎病病株，并對黃萎病菌進行了分離、鑒定。病菌菌落在ＰＤＡ平板上正面為灰色，背部為黑色，在２０～２５ ℃條件下生長最快，３０ ℃下大部分菌株停止生長；并利用室內盆栽、定量蘸根接種法對分離菌株的致病力進行了測定，結果表明奎屯墾區的棉花黃萎病菌的致病力為中等。

２．２奎屯墾區棉花黃萎病的發生規律

棉花黃萎病的發生情況調查從５月份持續到９月份，從３年的調查結果（圖１）來看，棉花黃萎病的發生均呈上升趨勢，隨著生育期的進程而加重。２０１０年棉花黃萎病發病較重，是因為棉花現蕾后持續適溫，有利于棉花黃萎病的發生。

２．３棉田土壤中棉花黃萎病微菌核數量

２０１０年比較了同一品種不同類型棉田土壤微菌核的種群數量之間的差異，分析了棉花黃萎病發病與土壤中黃萎病菌微菌核數量之間的關系。隨著土壤中菌核數的增多，棉花黃萎病的發生程度加重。當土壤中菌核數在０～９個／ｇ時，新陸早３５號表現為耐病，即病情指數在３５以下；當土壤中菌核數大于９個／ｇ時，新陸早３５號表現為感病。結果表明新陸早３５號菌核含量致病的臨界點為９個／ｇ。

２．４主栽和新育棉花品種的抗病性

２０１０年在人工病圃種植了農七師近幾年來的主栽品種、近年來審定的新品種、生產上抗性較好的品種以及我所近幾年培育的新品系共３７個（份），通過黃萎病抗性鑒定，表現耐病的品種（材料）為：８１－３、Ｇ－９５８、早３３、早３８、早４１、早４２、早４５、早４６、早４９、Ｋｆ２、６２０、Ｌ１、０８－１０６０。

２．５生物藥劑防治效果

利用可濕性粉劑萎菌凈進行了防治棉花黃萎病效果試驗，從棉花的長勢來看，棉花的整個生育期拌種處理整齊度好，生長勢強。從棉花黃萎病的發生情況看，蕾期、花期藥劑拌種處理效果較好，到了鈴期、吐絮期，隨著棉花黃萎病發生高峰期的到來，藥劑拌種效果有所減弱。因此，該藥劑拌種對于苗期、蕾期的棉花黃萎病有一定的抑制作用。

３討論

本研究應用改良的棉花黃萎病菌土壤選擇性培養基進行抗性監測具有成本低廉、不需要昂貴儀器設備等優點，可在棉花黃萎病土壤帶菌量普查、病害危害風險及防治效果的監測評估等方面直接應用。但是建立土壤棉花黃萎病有效的定量檢測方法，受培養基、土壤接種量的影響，同時還可能受大田土壤采集方法、土壤制備方法以及計數方法等因素的影響，這些方面還值得深入探討。

參考文獻：

［１］ 馬存，石磊巖，陳其煐，等． １９９３年棉花黃萎病大發生的原因及防治措施［Ｊ］．中國農學通報，１９９４，１０（３）：３３－３５．

［２］ 石磊巖．我國棉花黃萎病菌研究進展［Ｊ］．棉花學報，１９９５，７（４）： ２４３－２４５．

［３］ 馮爭光． 一種新的檢測土壤棉花黃萎菌微菌核的選擇性培養基［Ｊ］．華北農學報，２００４，１９（Ｓ）：２５９－２６２．

［４］ 馬存，簡桂良．新疆棉花枯、黃萎病為害及防治［Ｊ］．中國棉花，１９９７，２４（５）：２－４．

［５］ 陳其瑛．棉花病蟲害綜合防治及研究進展［M］．北京：中國農業科技出版社，１９９０.２８６-２９０．

［６］ ＶAN ＤEN ＢＯＯＧＥＲＴ Ｐ Ｈ Ｊ Ｆ，ＶＥＬＶＩＳ Ｈ． Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｙｃｏｐａｒａｓｉｔｅ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｇｕｔｔａｔｕｍ ａｎｄ ｉｔｓ ｈｏｓｔ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｆａｉａ ｓｏｌａｎｉ［Ｊ］． Ｓｏｉｌ Ｂｉｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９９２，２４（２）：１５７－１６４．

［７］ ＲＡＡＩＪＭＡＫＥＲＳ Ｊ Ｍ，ＷＥＬＬＥＲ Ｄ Ｍ． Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ ｇｅｎｏｔｙｐｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ２，４－Ｄｉａｃｅｔｙｌｐｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ－－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｒｏｏｔ－ｃｏｌｏｎｉｚｉｎｇ Ｐ． ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓｓｔｒａｉｎ Ｑ８ｒ１－９６［Ｊ］． Ａｐｐｌ Ｅｎｖｉｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００１，６７：２５４５－２５５４．

［８］ ＴＪＡＭＯＳ Ｅ Ｃ，ＦＲＡＶＥＬ Ｄ Ｒ． Ｄｅｔｒｉｍｅｎｔａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｕｂｌｅｔｈａｌ ｈｅａｔｉｎｇ ａｎｄ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｆｌａｖｕｓ ｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉａ ｏｆ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ［Ｊ］． Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９９５，８５：３８８－３９２．

［９］ ＦＲＡＶＥＬ Ｄ Ｒ，ＬＥＷＩＳ Ｊ Ａ，ＣＨＩＴＴＡＭＳ Ｊ Ｌ． Ａｌｇｉｎａｔｅ ｐｒｉｌｌ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｆｌａｖｕｓ ｗｉｔｈ ｏｒｇａｎｉｃ ｃａｒｒｉｅｒｓ ｆｏｒ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ［Ｊ］． Ｐhｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９９５，８５：１６５－１６８．

［１０］ 李國英，霍向東，田新莉，等．新疆棉花黃萎病菌的培養特性及致病性分化的研究［Ｊ］．石河子大學學報，２００0，4（１）：9－１５．