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木瓜活性成分提取工藝研究進展

2012-04-29 06:21:39肖碩,丁卓伶
湖北農業科學 2012年5期

肖碩,丁卓伶

摘要:木瓜為中國道地藥材,內含黃酮、鞣質、多糖等藥理成分,藥效多樣,然而其成分復雜、理化性質不穩定,導致藥理成分的提取工藝不易掌握,就其活性成分的提取工藝研究進展展開綜述,為后續的研究及應用提供參考。

關鍵詞:木瓜;道地藥材;活性成分;提取工藝

中圖分類號:TQ914文獻標識碼:A文章編號:0439-8114(2012)05-0877-02

Research Progress on the Exaction of Papaya Active Ingredients

XIAO Shuo,DING Zhuo-ling

(The Affiliated Jingzhou Hospital,Tongji Medical School,Huazhong University of Science and Technology,Jingzhou 434020,Hubei,China)

Abstract: Papaya is a genuine Chinese medicine containing flavone, tannin, polysaccharide and other pharmacological ingredients with multiple efficacies. However, the exaction process of pharmacology component was not easy to master because its complex composition and unstable physicochemical property. The research progress of papaya active ingredient extraction process was summarized to provide reference for further research and application.

Key words: papaya; genuine medicine; active ingredient; exaction process

木瓜為薔薇科植物貼梗海棠[Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai]的干燥近成熟果實,2003年就被國家衛生部首批認定為藥食同源品種之一[1],其中皺皮木瓜是藥用木瓜的正品,主產于安徽、湖北、浙江、四川等地。木瓜作為一種常用中藥,味酸、溫,歸肝、脾經,有平肝舒筋、和胃化濕之功效,臨床常用于濕痹拘攣、腰膝關節酸重疼痛、吐瀉轉筋、腳氣水腫等病癥的治療[2]。木瓜中含有多種有效藥理成分,主要有黃酮類、鞣質、三萜皂苷類、有機酸類、多糖、過氧化物酶等,不僅其水提物可用于臨床治療,有效成分如黃酮(總黃酮)、三萜皂苷(總皂苷)、鞣質、有機酸等更作為多種藥物的復方制劑成分之一[3]。為了更好地研究木瓜中各種有效成分的合理應用,對木瓜中有效成分的最佳提取工藝進行研究是相當必要的,其對后續的含量測定、作用機制及藥理作用的研究等都有重要意義。本研究對木瓜中包括總黃酮、鞣質、皂苷等有效成分的多種提取工藝展開綜述,以期為后續的工作奠定基礎。

1木瓜中黃酮提取工藝的研究

黃酮是木瓜中有效藥物成分之一,黃酮類化合物具有多種生物活性,有抗潰瘍、抗過敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治療心腦血管疾病、活血化瘀等功能[4]。隨著研究方法的不斷更新和提高,新的黃酮類化合物不斷被發現,出現了許多新的應用,尤其在抗自由基和抗癌、防癌上的應用意義重大。

傳統的木瓜總黃酮提取工藝有回流提取、超聲提取[5]、微波提取3種常用方法。回流提取將原料用80%的乙醇或乙酸乙酯[6]在90 ℃回流2 h后,將提取液在旋轉蒸發儀上濃縮,加5%亞硝酸鈉放置6 min,再加4%的氫氧化鈉,最后定容于容量瓶中。超聲提取則用95%的乙醇在90 ℃超聲回流30 min,提取液在旋轉蒸發儀上濃縮,加5%亞硝酸鈉放置6 min,再加10%硝酸鋁放置6 min,最后加4%氫氧化鈉后定容。微波提取步驟是:將原料加入80%乙醇,120 ℃提取20 min,在旋轉蒸發儀上濃縮后加5%亞硫酸鈉放置6 min再加入10%硝酸鋁,放置6 min后加入4%氫氧化鈉,最后加水定容。3種方法提取木瓜中總黃酮的回收率均可超過95%,且雜質都較少,研究者可根據自身實驗及試劑條件選擇有效的提取方法[7]。宋亞玲等[8]將木瓜果實先粉碎,95%乙醇回流提取后,將提取液減壓濃縮成浸膏,加水懸浮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取,減壓濃縮得各部分提取物,經過分離得到總黃酮的各種有效成分;嚴睿文等[9]分別用乙醇回流、超聲提取與微波提取后,測定回收率發現,用微波提取法處理20 min回收率最高,可達到97.7%,平均水平在95.0%~98.0%,其原理可能是因為微波能直接輻射能量到反應物上,使其分子產生旋轉和碰撞,迅速提高溫度,且無溫度梯度加熱,促進試劑與樣品更有效地接觸,因此為最好的處理樣品法,且處理時間20 min比較適宜。

2木瓜中鞣質的提取工藝研究

人們對木瓜中鞣質的研究取得重大進展,除發現其有抗菌、抗炎、止血等藥理活性外,還有抗突變、抗脂質過氧化、清除自由基、抗腫瘤與抗艾滋病等多種藥理活性,甚至在抗腫瘤治療中顯示出了誘人的前景。木瓜中所含鞣質為縮合鞣質,含有較多的鄰位酚羥基結構,具有很強的還原性,在生物體內表現出清除自由基、抗炎、抗變態反應等作用,極易被氧化、脫水,縮合為不溶于水的“鞣酐”沉淀。因此,在制備提取鞣質有效成分時應避免光照、高溫處理,從而保證其穩定性。目前,公認的提取木瓜中鞣質的最佳方法是超聲提取法[10]。將木瓜粉末精密稱定后置于棕色容量瓶中,加水放置過夜后用超聲處理10 min左右,放冷,水稀釋至刻度,均勻混合,靜置使其沉淀,過濾,棄初濾液,精密量取濾液后至新的棕色容量瓶中水稀釋至刻度搖勻即可。也有研究根據木瓜鞣質溶于水不溶于乙醚的理化特性,將木瓜粉末首先加石油乙醚超聲后棄去石油醚液,再加乙醇超聲,過濾,蒸干濾液后用水溶解殘渣,用乙酸乙酯萃取2次后合并乙酸乙酯液,蒸干,殘渣加甲醇溶解后離心即得上清液為提取物[11]。以上2種方法的應用均比較多,研究者將上述提取物做含量測定發現提取率都較高。

3木瓜中三萜皂苷類的提取工藝研究

木瓜中的三萜皂苷以齊墩果酸、熊果酸等為主,現代藥理學研究證明其中齊墩果酸具有護肝降酶、抗炎、促免疫等多重功效;熊果酸有美容護膚、抗炎等多重功效,二者已成功地被分離、鑒定出來。早期,郭學敏等[12]采用乙醇提取,硅膠H柱色譜法,從木瓜中分離得到齊墩果酸(Oleanolic acid)173、乙酰熊果酸(3-O-acetyl ursolic acid)、3-O-乙酰坡模醇酸(3-O-acetyl pomolic acid)和樺木酸(Betulinic acid)。近年來的提取工藝更為完善,可以得到并分離出純度更高的齊墩果酸與熊果酸,研究多根據它們的理化特性采用最優的方法提取,木瓜總皂苷可溶于水和乙醇,然而木瓜中所含多糖類成分較豐富,故不宜采用水與低濃度乙醇為提取劑,因此二者的提取多用70%左右的乙醇為宜,然而馮華等[13]提取熊果酸時用100%的乙醇25 mL提取30 min后,用HPLC法測定熊果酸含量為0.324%,以此確定該方法為最佳提取熊果酸的方法,也為木瓜中熊果酸的提取和利用提供了科學依據。

一般用正交法對木瓜的提取工藝進行研究,在單因素實驗基礎上采用L9(34)正交試驗考察包括提取時間、溫度、料液比、原料粒度對提取率的影響,最后用HPLC法測定了二者的含量,以確定最優提取工藝。其中,齊墩果酸的最佳提取工藝參數如下:95%乙醇、溫度為60 ℃、時間3 h、料液比為1∶8,原料粒度為40目,提取2次;熊果酸的提取工藝參數如下:95%乙醇、溫度為60 ℃、時間3 h、料液比為1∶6,原料粒度為60目,提取2次[14]。

4討論與展望

木瓜作為傳統的中藥材與新型的美容佳品,其藥用與食用價值的發掘日趨完善。然而,作為藥用植物,選擇適當的藥理成分尤其重要。怎樣選擇最佳提取工藝提取特定的靶點成分一直是藥學研究者們研究的重點之一。本研究僅就近年來木瓜中幾種主要藥理成分的提取工藝做了簡單的闡述,隨著分子生物學和生物技術的快速發展,更好、更先進的技術正用于傳統中藥材的研究中,更優化的提取工藝還有待研究,對后續的藥學研究工作將產生重要作用。

參考文獻:

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