犬細(xì)小病毒病臨床診斷與綜合防制

方宗敏 （山東省蓬萊市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 265600）

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犬細(xì)小病毒病臨床診斷與綜合防制

方宗敏 （山東省蓬萊市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 265600）

犬細(xì)小病毒病(Canine parvovirus disease，CPVD)是由犬細(xì)小病毒感染犬發(fā)生的一種嚴(yán)重傳染病。1977年美國(guó)學(xué)者Eugster和Nairn最先從患出血性腸炎的犬糞便中分離得到CPV，其后加拿大、澳大利亞、法國(guó)、日本等國(guó)均有CPV感染的報(bào)道。但CPV目前已存在于所有養(yǎng)犬國(guó)家和地區(qū)，我國(guó)各地都有流行。犬細(xì)小病毒病臨床上以劇烈嘔吐、出血性腸炎、心肌炎和白細(xì)胞顯著減少為主要特征。CPV 造成的感染發(fā)病率高，傳染性強(qiáng)，病死率高，是危害養(yǎng)犬業(yè)最為嚴(yán)重的傳染病之一。本文介紹了CPV的一些生物學(xué)特性及流行病學(xué)特征，并介紹了犬細(xì)小病毒病的常見的診斷方法和CPV檢測(cè)手段，準(zhǔn)確快速診斷和先進(jìn)的檢測(cè)手段對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)本病至關(guān)重要，從而有效控制CPV的流行與蔓延。

1 犬細(xì)小病毒生物學(xué)特征

1.1 形態(tài)特點(diǎn)與理化性質(zhì)

CPV在分類地位上屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬，與貓泛白細(xì)胞減少癥病毒、貂腸炎病毒、浣熊細(xì)小病毒和藍(lán)狐細(xì)小病毒同屬細(xì)小病毒亞群。CPV是單負(fù)股DNA病毒、無囊膜，病毒粒子細(xì)小，直徑為20~22nm，等軸對(duì)稱的二十面體，在氯化銫中浮密度為1.43g/cm，4℃能凝集恒河猴、豬、馬、貓和倉鼠的紅細(xì)胞。CPV對(duì)酒精、碘酒等常用消毒劑有較強(qiáng)的抵抗力，在pH3.0時(shí)對(duì)氯仿、乙醚有抵抗，在4~10℃可存活180d，65℃ 30min而不失其感染性，室溫保存90d感染性輕度降低，在糞便和固體污染上的病毒可存活數(shù)月至數(shù)年。對(duì)CPV最有效的消毒劑有福爾馬林、次氯酸鈉和氧化劑等，此外紫外線也能使其失活。

1.2 培養(yǎng)特性

CPV能在貓和犬的腸肺腎的原代和傳代細(xì)胞中很好生長(zhǎng)，也能在貂肺、牛睪丸等細(xì)胞中增值。于37℃培養(yǎng)3~4d，可出現(xiàn)細(xì)胞拉長(zhǎng)、破碎、脫落的病變，傳統(tǒng)的提高CPV的分離率和病毒滴度采用的是傳代細(xì)胞同步接毒或者是有40~50%細(xì)胞貼壁時(shí)接毒。

1.3 流行病學(xué)特征

CPV在自然界廣泛存在，犬是其主要自然宿主，各年齡和性別的犬均有易感性，但幼犬的易感性最高。除感染犬外，CPV也可感染其他犬科動(dòng)物如狼、食蟹狐、南美狗和亞洲貍等。患病動(dòng)物是主要傳染源，病毒隨糞便、尿液、嘔吐物及唾液排出體外，污染食物、墊料、食具和周圍環(huán)境，康復(fù)犬的糞便可長(zhǎng)期帶毒，一年四季均可發(fā)病。近年來CPV的抗原性隨著時(shí)間的推移而發(fā)生了很大的改變，不斷出現(xiàn)新的CPV變異株，宿主范圍不斷擴(kuò)大。

2 臨床診斷

犬細(xì)小病毒病無明顯季節(jié)性，但在寒冷的冬季較為多見。自然感染潛伏期一般為5~7d，本病以出血性腸炎或心肌炎為主要特征，可分為腸炎型和心肌炎型兩種，有少數(shù)病犬表現(xiàn)為混合型。在臨床上以腸炎型多見，發(fā)熱癥狀以低熱為主，體溫上升0.5~1℃左右，如繼發(fā)腸毒血癥，則少數(shù)病例可達(dá)40℃以上的高熱。剛斷奶不久的幼犬多以心肌炎綜合癥為主，青年犬多以腸炎綜合癥為主。

2.1 臨床特征

臨床上主要表現(xiàn)為以下三種類型：

2.1.1 腸炎型 此型較普遍，病初精神沉郁，食欲減退或廢絕，臥地不起，喜曬太陽，體溫升至40℃以上，有渴感。但個(gè)別犬不出現(xiàn)體溫明顯升高；嘔吐，先吐食物，后吐出黃色水樣黏液；腹瀉，先是黃色水樣便，后出現(xiàn)蕃茄汁樣暗紅色血樣稀便，且腥臭難聞。病的后期嚴(yán)重脫水，鼻端干燥，舌頭下垂，眼窩下陷，黏膜蒼白，迅速消瘦，全身散發(fā)異臭味。病程長(zhǎng)短不一，幼犬較短，多為3~5d，病死率較高；12月齡以上的成年犬病程長(zhǎng)達(dá)7~14d，病死率較低。

2.1.2 心肌炎型 此型較少見，多見于2~3月齡幼犬，表現(xiàn)精神沉郁，心跳快而弱，病犬常因突然衰竭而死亡，病程較短。

2.1.3 混合型 此型兼有上述二型的典型癥狀，大多先出現(xiàn)腸炎型，隨后出現(xiàn)心肌炎型癥狀，病死率較高。

2.2 病理剖檢

2.2.1 腸炎型 病尸剖檢可見腸系膜血管呈樹枝狀充血，腸系膜淋巴結(jié)出血、水腫，呈暗紅色，切面外翻，呈紫紅色，如大理石樣外觀。小腸黏膜出血、壞死甚至脫落，小腸及大腸內(nèi)容物暗紅色呈醬油樣或果醬樣。病尸消瘦，脫水，可視黏膜蒼白，胃內(nèi)空虛，黏膜表面附有淡黃色或黃紅色黏液，胃底部黏膜彌漫性充血。

2.2.2 心肌炎型 病尸剖檢可見心肌或心內(nèi)膜有非化膿性壞死灶，心肌纖維變性，心肌有紅黃相間虎斑狀的出血斑紋，有時(shí)出現(xiàn)出血灶，肺部局部充血、出血及水腫。

2.3 CPV的檢測(cè)技術(shù)

目前用于CPV的檢測(cè)方法很多，包括動(dòng)物試驗(yàn)、病毒分離、電鏡觀察、分子生物學(xué)和免疫學(xué)檢測(cè)等。各種檢測(cè)技術(shù)的特異性、敏感性均有一定的差異。

2.3.1 PCR檢測(cè)技術(shù) 比較常用的PCR技術(shù)包括普通PCR、套式PCR和熒光定量PCR技術(shù)。

2.3.2 LAMP檢測(cè)技術(shù) LAMP法為環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴(kuò)增方法，其原理是采用能特異識(shí)別靶序列上6個(gè)位點(diǎn)的4條引物及一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶，在65℃左右不到1h的時(shí)間里進(jìn)行核酸的指數(shù)級(jí)擴(kuò)增，其擴(kuò)增效率可達(dá)到109~1010個(gè)拷貝數(shù)量級(jí)。LAMP擴(kuò)增法具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、廉價(jià)、易檢測(cè)等特點(diǎn)。

2.3.3 核酸雜交檢測(cè)技術(shù) 原位雜交技術(shù)可用于組織樣品中CPV核酸的檢測(cè)與定位。

2.3.4 ELISA檢測(cè)技術(shù) ELISA對(duì)CPV的檢測(cè)具有檢測(cè)迅速、操作簡(jiǎn)單、成本相對(duì)低廉等優(yōu)點(diǎn)。

2.3.5 膠體金檢測(cè)技術(shù) 膠體金標(biāo)記的免疫層析技術(shù)是20世紀(jì)80年代以來發(fā)展起來的一種新型的檢測(cè)方法，它是在免疫滲濾的基礎(chǔ)上建立的一種簡(jiǎn)單快速的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)。利用膠體金標(biāo)記單克隆抗CPV抗體，制成檢測(cè)試紙條，用該試紙條只需一步加樣，2~5min之內(nèi)就可判定結(jié)果，具有敏感性高，特異性強(qiáng)，穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)便、快速，分析結(jié)果準(zhǔn)確，易于判定等優(yōu)點(diǎn)。

2.3.6 血凝試驗(yàn) 血凝試驗(yàn)可完成對(duì)CPV抗原及抗體的檢測(cè)，是一種經(jīng)典的CPV檢測(cè)方法。該法操作簡(jiǎn)單，結(jié)果易于判定，但敏感性較低，很難滿足快速檢測(cè)CPV的要求。

3 治療

治療期間對(duì)病犬要加強(qiáng)護(hù)理，病初要禁食，以減輕胃腸負(fù)擔(dān)，并特別注意保溫保暖，要安靜；腹瀉期間應(yīng)停喂牛奶、雞蛋、肉類等高蛋白、高脂肪性飼料，給予易消化的飼料，以減輕胃腸負(fù)擔(dān)，可提高治愈率；在恢復(fù)期要控制飲食，少喂勤添。

心肌炎型病程短、病勢(shì)急，未出現(xiàn)臨床癥狀就很快死亡。腸炎型主要采取特異療法、對(duì)癥療法和支持療法。治療原則主要為止吐、止瀉、止血、補(bǔ)液、抑菌消炎、防止酸中毒、提高機(jī)體免疫力。

3.1 增強(qiáng)免疫力

發(fā)病初期、中期選用犬細(xì)小病毒單抗或高免血清，同時(shí)配合免疫增強(qiáng)劑增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，達(dá)到更好的治療效果。

3.2 止吐、止血

可用維生素B6和氯丙嗪止吐，鹽酸消旋山莨菪堿止瀉，在發(fā)病初期使用止血敏或安絡(luò)血，中期選用維生素K，后期使用氨甲苯酸止血。

3.3 補(bǔ)液

通過補(bǔ)液調(diào)整機(jī)體的脫水和代謝紊亂，調(diào)節(jié)酸堿平衡，常用生理鹽水、復(fù)方氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液靜注，加入10%氯化鉀和碳酸氫鈉，以防酸中毒和電解質(zhì)紊亂。

3.4 防繼發(fā)感染

頭孢拉定、林可霉素、地塞米松等防繼發(fā)感染。

3.5 強(qiáng)心

對(duì)于食欲廢絕者，可用肌苷、三磷酸腺苷二鈉及輔酶A等防止心衰。

4 預(yù)防

4.1 平時(shí)做好免疫接種

用犬瘟熱、犬細(xì)小病毒性腸炎等五聯(lián)苗或七聯(lián)苗，肌肉或皮下注射。使用國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的犬五聯(lián)弱毒疫苗時(shí)，對(duì)30~90日齡犬應(yīng)注射3次，90日齡以上犬注射2次即可，每次間隔2~3周。每次注射2ml，以后每半年加強(qiáng)免疫1 次。進(jìn)口疫苗每年免疫1次。

4.2 緊急隔離，消除傳染源

當(dāng)犬群暴發(fā)本病后，應(yīng)及時(shí)隔離，對(duì)無治愈可能的犬，應(yīng)盡早撲殺，焚燒深埋。與病犬接觸未發(fā)病者，可肌肉注射CPV單克隆抗體1ml/kg體重。對(duì)犬舍和飼具用2%~4%氫氧化鈉、0.5%過氧乙酸或10%~20%漂白粉進(jìn)行徹底消毒。

（2012–06–03）

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