卡式微柱凝膠方法在血型鑒定中的應用及價值

袁碧和（重慶市墊江縣人民醫院輸血科 408300）

隨著醫學科學的迅猛發展，輸血已經成為一門涉及多個學科的新興學科。輸血作為一種特殊的治療手段可挽救患者生命，而準確的血型鑒定及交叉配血方法對安全輸血起著非常重要的作用。安全輸血是輸血工作中的重點，必須保證血型鑒定、交叉配血等輸血相關檢測百分之百正確，因為0.1%的誤差可能就會危及受血者的健康，甚至是生命。隨著科學技術的進步，卡式微柱凝膠方法（簡稱卡式法）已在全國各級醫院中普遍運用，逐步取代了已使用百年傳統式的血型血清學技術。相對于從前國內各級醫院傳統的血型鑒定及配血試驗來說，卡式法結果準確、操作簡單、時間短、試劑用量小、環境污染小［1－3］。2009年1月至2011年12月對本院需輸血治療的1 435例住院患者用卡式法進行血型鑒定及配血，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年1月至2011年12月本院需輸血治療的住院患者1 435例，其中男730例，女705例，年齡5～70歲，平均（25.49±13.65）歲。抽取肘靜脈3mL，肝素抗凝，同時分別用卡式法和手工鹽水法進行血型鑒定。

1.2 試劑 抗A、抗B血清購自上海血液生物醫藥有限責任公司，抗D單克隆血清由長春博德生物技術有限責任公司提供，ABO、RhD血型鑒定Cellbind微柱凝膠卡由荷蘭皇家血液基金會有限公司提供。鹽水購自天圣制藥集團股份有限公司。操作及結果判定按使用說明書進行。

1.3 儀器 免疫微柱孵育器和血型血清學離心機由長沙英泰儀器有限公司提供。

1.4 方法

1.4.1 手工鹽水法 按《全國臨床檢驗操作規程》［4］規定，正向定型和反向定型用試管法進行。

1.4.2 卡式法 按荷蘭皇家血液基金會有限公司Cellbind微柱凝膠卡血型鑒定操作手冊進行：取微柱凝膠卡分別標明ABO／D正、反定型卡各1張，標記患者姓名、住院號和日期等，撕去卡上部的錫紙膜。在A、B、D孔內，各加入0.5%受檢紅細胞45μL，再分別加入20μL抗A、抗B、抗D血清。在A1、B孔內各加入45μL的0.5%A、B型紅細胞懸液，再加入45μL受檢血清。900r／min離心2min，1 480r／min離心3min，4 400r／min離心5min，取出觀察結果。按微柱凝膠卡說明書提示標準判讀結果，紅細胞完全降至柱底者為陰性，完全或部分被阻擋于凝膠內者為陽性。

2 結 果

在1 435例送檢血樣中，微柱凝膠法一次性正確率正定型為100.0%，反定型為99.7%；手工鹽水法一次性正確率正定型為99.3%，反定型為98.9%。兩種方法血型鑒定正確率比較見表1。1 435例血樣共檢測RhD型12例，占0.83%。正反定型不相符者30例，將血液紅細胞用生理鹽水洗滌3次，再進行重復鑒定，有6例為紅細胞濃度異常，10例血漿中含有纖維蛋白，5例為紅細胞懸液不新鮮。其余9例正反定型不符者，進一步檢測發現2例有抗IgG抗體（腫瘤），3例自身凝集（多發性骨髓瘤），2例有嚴重冷凝集（凝血功能障礙），2例紅細胞被抗體致敏（自身免疫性溶血性貧血）。

表1 兩種方法血型鑒定結果比較

續表1 兩種方法血型鑒定結果比較

3 討 論

隨著醫學的發展，安全輸血日益受到人們的重視。目前，大多數醫院在進行交叉配血試驗時還在應用鹽水法、酶法、聚凝胺法等傳統方法，這些方法靈敏度較低，操作繁瑣，需反復洗滌紅細胞，自動化程度低，試驗全過程不宜標準化，且影響因素多，不利于臨床采取正確的診治手段。卡式法是近年來被推薦使用的，是微柱凝膠技術與上述傳統方法結合的產物，其既克服了傳統方法的缺點，又具有靈敏度、準確性高等優點，為臨床安全輸血提供了很好的保障［5－6］。

本研究結果顯示，正反定型不相符者30例，有6例為紅細胞濃度異常，10例血漿中含有纖維蛋白，4例為紅細胞懸液不新鮮。紅細胞濃度或過高或離心不徹底，血清中含纖維蛋白、出現細胞“凝塊”、細菌污染、反定型紅細胞懸液不新鮮等，可能導致卡式法呈假陰性或假陽性［7］。因此，準確的紅細胞濃度是卡式法正確操作的關鍵之一，文獻報道2%為最佳紅細胞濃度。

本研究結果表明，9例正反定型不符者，進一步檢測發現2例有抗IgG抗體（腫瘤），3例自身凝集（多發性骨髓瘤），2例有嚴重冷凝集（凝血功能障礙），2例紅細胞被抗體致敏（自身免疫性溶血性貧血），說明某些疾病可引起的自身凝集、冷凝集等，引起的抗原減弱，會影響卡式法鑒定結果，應予以重視。

本研究結果表明，卡式法鑒定血型，其正確率及反應強度均高于手工鹽水法，且操作簡便、快速、省時、省力，樣本、試劑用量少，易于觀察結果，并可以長時間保存血型鑒定樣本（保存1周以上），有利于事后復查。同時，卡式法結果的判讀易于標準化，最大限度減少了操作人員主觀因素的影響。但由于卡式法成本略高于手工鹽水法，因此，作者建議對門診患者采用手工鹽水法，而對住院患者則采用卡式法。

綜上所述，卡式法是一種靈敏、安全的血型鑒定技術，對于提高血型檢驗質量有明顯的促進作用，為臨床安全輸血提供了很好的保障，但由于成本略高于手工鹽水法，可應用于住院患者血型鑒定。

［1］ 劉永霞.凝聚胺法與微柱凝膠法在臨床配血中的應用比較［J］.現代中西醫結合雜志，2012，21（3）：266－267.

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［4］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：135.

［5］ 楊瑩，譚雅玲，蔣永青.卡式配血在臨床輸血中的應用價值［J］.實驗與檢驗醫學，2011，29（3）：332.

［6］ 葉巧國，楊毓，何靜，等.微柱凝膠卡式法在交叉配血及不規則抗體檢測中的應用［J］.現代醫院，2011，11（12）：59－61.

［7］ 王小平.微柱凝膠法應用于血型鑒定［J］.廣州醫藥，2007，38（2）：60－61.