2005－2010年鄭州市腹瀉病患者志賀病原菌檢測

程春榮，李 偉，田宏茹，趙慧霞，安 戈，羅 琦，劉戰偉

(1.鄭州市疾病預防控制中心 河南鄭州 450007;2.鄭州市第二人民醫院 河南鄭州 450000;3.鄭州市二七區婦幼保健所 河南鄭州 450052;4.范縣疾病預防控制中心 河南范縣 457000)

細菌性痢疾是由志賀菌引起的一種急性腸道傳染病，也是《中華人民共和國傳染病防治法》規定的乙類傳染病。在2005年至2010年期間，本研究為了解該病在鄭州市區發病的主要特點和優勢流行菌型的變化，從鄭州市兒童醫院、鄭州市中心醫院、鄭州市人民醫院、鄭州市第三人民醫院、鄭州市第一人民醫院等監測點共采集2 851份腹瀉病患者的標本(其中兒童病例和成人病例約各占50%)，進行細菌性痢疾的病原學監測，現將病原學監測情況報告如下。

1 材料和方法

1.1 標本收集 收集2005年至2010年鄭州市5個腹瀉病監測點門診就診感染性腹瀉病例糞便標本1～2 g，立即保存至Carry-Blair運送培養基并及時送達實驗室。

1.2 試劑 質控菌株大腸埃希氏菌(ATCC25922)購于中國生物制品檢定所。培養瓊脂所報含營養肉湯、營養瓊脂、SS瓊脂、麥康凱瓊脂、雙糖鐵瓊脂、MIU瓊脂等均購自廣東環凱微生物科技有限公司。API20E為法國梅里埃公司生產。志賀菌診斷血清購于蘭州生物制品所。

1.3 檢驗方法 依照《痢疾防治手冊》，將糞便標本直接劃線接種到SS和Mac培養基上，置37℃溫箱培養16～24 h，每個平板上挑取不分解乳糖菌落5個，接種于克氏雙糖鐵(KIA)和動力-靛基質-尿素(MIU)培養基中，37℃培養過夜進行初步生化鑒定試驗。分離物中出現K/A反應不產氣或微產氣，硫化氫、動力、靛基質、尿素均陰性者疑為志賀菌屬。可疑志賀菌落進行純培養，用多克隆及單克隆抗血清做玻片凝集試驗，鑒定血清型和亞型;用法國梅里埃公司生產API20E板條進行生化鑒定。

1.4 統計學分析 采用Excel建立數據庫，SPSS 13.0進行統計分析，用秩和檢驗進行處理，檢驗水準α= 0.05。

2 結果

2.1 菌群分布 自2 851例腹瀉病患者中共檢出183株痢疾桿菌，占腹瀉病發病率的6.42%。標本血清學分群結果為:福氏菌145株，占79.2%，其中F4c菌55株(30.0%)，F2a菌39株(21.3%)，F1a菌36株(19.7%)，F2b菌6株(3.3%)，Fx變種4株(2.2%)，F4a菌2株(1.1%)，Fy變種1株(0.5%)，F1b菌1株(0.5%)，F6菌 1株(0.5%)，宋內菌 38株(20.8%)，其中宋內Ⅰ菌30株(16.4%)，宋內Ⅱ菌8株(4.4%)。F4C痢疾桿菌為本市菌株流行的優勢菌株。

2.2 年齡分布 183例志賀菌腹瀉病患者中，1～5歲年齡組最多，占糞便培養陽性總數的45.9%;其次是21～30歲年齡組，占糞便培養陽性總數的17.5%。F2a和F4c菌型各年齡組均有，最大的90歲，最小的才幾個月，但大部分分布于小年齡組。見表1。

表1 2005-2010年鄭州市各年齡組陽性菌株分布及血清型分布

2.3 分離率和流行菌血清型的變遷 2005年和2006本市菌株流行的優勢菌株是F4c，2007年、2008年和2010年都以F2a菌為本市菌株流行的優勢菌株，2009年宋內菌為本市菌株流行的優勢菌株，見表2。

經秩和檢驗，2005年至2010年陽性分離率至少有2組存在差別(HC=101.8071，P=0.0001)，2005和2006年陽性分離率明顯高于其它年份陽性率，2007年至2010年陽性率無差別。

表2 2005-2010年鄭州市陽性分離數及各血清型分離數

3 討論

痢疾是一個遍及世界、發病率高且嚴重的古老傳染病［1］，志賀痢疾桿菌感染除了引起水樣腹瀉以外，主要導致痢疾癥狀(發燒、腹痛、膿血便)，這也是妨礙兒童生長發育的重要原因，可能是因為受感染的嬰幼兒腸腔被痢疾桿菌侵襲破壞而致使生長遲緩［2］。通過2005年至2010年對鄭州市腹瀉病人病原檢測，結果顯示菌痢占腹瀉病發病率的6.4%［3］，提示細菌性痢疾仍是我市常見、高發的腸道傳染病。

志賀菌在發達國家的流行特點以宋內志賀菌為主，在發展中國家以福氏志賀菌為主［4］。本文檢測結果顯示鄭州市菌痢的優勢流行菌群仍為福氏痢疾桿菌(145株)，占分離菌株數的79.2%。其中2005年F4c菌(24株)占當年總陽性數的57.1%，為本市2005年菌痢的優勢流行菌型。2006年的優勢菌株F4c［5］(18株)占當年總陽性數的37.5%，宋內菌(11株)占當年總陽性數的22.9%。2007年的優勢菌株不明顯，F4c、宋內、F2a、F1a各占近20%。2008年的優勢菌株為F2a，2009年優勢菌株為宋內菌(13株)，占當年陽性總數的41.9%，顯示鄭州市2005年至2010年志賀菌優勢菌株由F4c型逐漸向F2a和宋內志賀菌型轉變.此與河南省相關報道相一致［6－7］。此種變化對菌痢的流行強度和流行特征所產生的影響需要進行長期而深入的監測研究，應引起我們的高度重視。

本市5歲以下兒童組菌痢陽性84份，占總陽性數的57.9%，明顯高于其他年齡組，提示今后應加強對小年齡組兒童的預防工作，如學齡前兒童衛生習慣的培養、兒童看護人防病知識及個人衛生習慣的提高等。本文結果提示，今后我市的細菌性痢疾的預防工作除加強衛生宣教及改水、改廁預防工作，還應著重加強菌痢優勢菌型監測、流行趨勢及發病特征研究，加強預防控制措施研究，降低痢疾發病率。

［1］ Changyun Ye，Ruiting Lan，Shengli Xia，et al.Emergence of a New Multidrug-Resistant Serotype X Variant in an Epidemic Clone of Shigella flexneri［J］.Journal of Clinical Microbiology，2010，48(2):419－426.

［2］ Shengli Xia，Bianli Xu，Lili Huang.et al.Molecular characterization and antimicrobial resistance of Shigella from humans in Henan province，China［J］.Journal of Clinical Microbiology，2011，49(1):232－242.

［3］ Sivapalasingam S，Nelson J M，Joyce K，et al.High prevalence of antimicrobial resistance among Shigella isolates in the United States tested by the national antimicrobial resistance monitoring system from 1999 to 2002［J］.Antimicrob Agents Chemother，2006，50(1):49－54.

［4］ Vargas M，Gascon J，De Anta M T J，et al.Prevalence of Shigella Enterotoxins 1 and 2 among Shigella Strains Isolated from Patients with Traveler’s diarrhea［J］.J.Clin.Microbiol，1999，37(11):3608－3611.

［5］ 茹維平，黃麗莉，趙嘉詠，等.河南省2005－2009年細菌性痢疾流行概況及病原特性分析［J］.現代預防醫學，2010，37(21):4092－4094.

［6］ 沈麗珍，徐斐，余玲玲，等.浙江省溫州地區志賀菌流行菌株的血清分型及耐藥性分析［J］.疾病監測，2009，24(5):334－336.

［7］ 徐蘭英，許汴利，郭萬申.河南省2005－2007志賀菌多中心研究［J］.中華流行病學雜志，2009，30(2):2003.

［8］ 趙嘉詠，羅琦，李孟磊，等.河南省細菌性痢疾病原學特征研究［J］.疾病監測，2010，25(12):950－952.