敦煌前列寶對慢性前列腺炎模型大鼠血液流變學指標及血管內皮功能的影響*

朱向東，丁文君，程暢和

(1.甘肅中醫學院，甘肅蘭州730000;2.甘肅省中醫院腎病科，甘肅蘭州730050)

慢性非細菌性前列腺炎是男性泌尿系統常見病、多發病，好發于青壯年［1］。其病因及發病機制目前尚不完全清楚，屬難治性疾病，臨床缺乏有效的治療方法和藥物。敦煌前列寶是以敦煌出土卷子《輔行訣臟腑用藥法要》中所載“大瀉腎湯”為基礎，依據慢性前列腺炎臨床表現加減化裁而成，經臨床反復應用，療效肯定。筆者觀察了敦煌前列寶對慢性前列腺炎模型大鼠血液流變學及血管內皮功能的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 動 物

SPF級Wistar大鼠32只，雄性，3月齡，體質量(240±20)g，由甘肅中醫學院動物實驗中心提供，實驗動物質量合格證:SCXK(甘)2004－0006。動物購置后適應性喂養1周，全部實驗操作均于SPF級動物實驗室進行，設施使用合格證為SYXK(甘) 2004－0006。

1.2 藥品、試劑與儀器

敦煌前列寶由茯苓、生甘草、制大黃、黃芩、赤芍、干姜、川牛膝、益母草按比例組成，藥材由甘肅中醫學院附屬醫院中藥房提供，煎煮后過濾去渣，水浴濃縮濾液，使每mL藥液含生藥1.72 g;前列泰膠囊，陜西東泰制藥有限公司產品，批號Z20050021，以蒸餾水配制成10μL/g混懸液備用;消痔靈注射液，北京第四制藥廠產品，批號0710312，實驗前用生理鹽水配制成250 g/L備用。ET-1放免試劑盒，蘭州軍區總醫院安寧分院核檢驗科提供，批號S20063089。Biofuge Fresco低溫高速離心機，德國賀力氏(Heraeus)公司產品;BS124s電子分析天平，德國賽多利斯(Sartorius)公司產品;UV－2401 PC型紫外分光光度計，日本島津(SHIMADZU)公司產品; BH 2型光學顯微鏡，日本奧林巴斯公司產品;MDF－71超低溫冰箱，日本三洋(SANYO)公司產品;HH－601數顯恒溫水浴箱，江蘇省金壇市恒豐儀器廠產品;LBY－N6A自清洗旋轉式黏度儀，北京普利生儀器有限公司產品;K－80型全自動血液黏度測定儀，中外合資北京世帝儀器公司。

1.3 分組、模型的建立與給藥

將32只大鼠依體質量編號，按隨機數字表法選取8只為正常對照組，其余24只動物造模后稱量體質量，按隨機數字表法分為模型對照組、前列泰組、敦煌前列寶組3組，每組8只。模型的建立參照文獻方法［2］:將實驗大鼠用100 g/L水合氯醛(250～300μg/g)麻醉，無菌操作下取下腹部正中切口約1 cm，直達腹腔，提出膀胱及兩側精囊，暴露附屬于精囊內側的前列腺背葉，注入前列腺雙側背葉250 g/L消痔靈注射液共0.2 mL，縫合肌肉、皮膚。創口處噴慶大霉素注射液以防感染。造模期為7 d。

敦煌前列寶組予敦煌前列寶水煎劑10μL/g灌胃，相當于8.6 g/kg生藥，是臨床用量的1倍;前列泰組予前列泰混懸液 10μL/g灌胃，相當于0.66 g/kg生藥，是臨床用藥量1倍;模型對照組、正常對照組按用藥組的方法，灌服蒸餾水，灌胃量10 mL/(kg·d)。每日給藥1次，連續30 d。

1.4 檢測指標

于末次給藥后24 h，稱大鼠體質量，將大鼠以50μg/g的戊巴比妥鈉腹腔麻醉，腹主動脈取血，肝素抗凝，測血液流變學各參數。取出前列腺組織，剝離被膜及周圍脂肪組織，以生理鹽水涮洗，濾紙吸干，電子天平稱量質量，計算大鼠前列腺指數。將大鼠前列腺自中軸均分2份，右側部分保存于40 g/L多聚甲醛/0.1M PBS(pH值7.2)固定液中，室溫下經水洗、梯度酒精脫水、二甲苯透明、浸蠟、包埋等處理后，切片，HE染色，光鏡下觀察前列腺局部病理變化;左側部分勻漿，將勻漿液以3 000 r/min離心15 min，將上清液裝入試管，按照ET-1試劑盒說明書采用放免法檢測ET-1含量。

1.5 統計學方法

采用SPSS 17.0統計分析軟件處理。所有數據以均數(x－)±標準差(s)表示，各組間比較采用單因素方差分析，各個實驗組的兩兩比較采用最小顯著性差異法LSD-t法。以P＜0.05為差別有統計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠前列腺濕質量、體質量及腺體指數對比

模型對照組及藥物組大鼠體質量與正常對照組對比，差別無統計學意義(P＞0.05)，表明各組之間前列腺腺體質量有可比性。模型對照組前列腺指數與正常對照組對比，差別有統計學意義 (P＜0.05)。與模型對照組對比，前列泰組、敦煌前列寶組大鼠前列腺指數降低，差別有統計學意義(P＜0.05、P＜0.01)，但敦煌前列寶組與前列泰組兩組間對比，差別無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 各組大鼠體質量、前列腺濕質量及腺體指數對比 ±s

表1 各組大鼠體質量、前列腺濕質量及腺體指數對比 ±s

注:與正常對照組對比，*P＞0.05，＊＊P＜0.05;與模型對照組對比，##P＜0.05，###P＜0.01;與前列泰組對比，ΔP＞0.05。

組 別 動物數 大鼠體質量/g 單側前列腺濕質量/mg 前列腺指數/(mg·g－1)正常對照組 8 379.714 3±39.373 1 0.453 7±0.090 3 0.003 1±0.000 8模型對照組 8 366.375 0±37.332 2* 0.646 6±0.139 1 0.005 2±0.000 6＊＊前列泰組 8 370.875 0±37.146 2* 0.465 6±0.154 9 0.004 5±0.000 5##敦煌前列寶組 8 373.857 1±67.966 7* 0.447 5±0.070 2 0.003 3±0.000 4###Δ

2.2 各組大鼠前列腺組織病理學對比

正常腺體組織柔軟，有光澤，彈性好，與周圍組織無粘連，易分離。模型對照組腺體明顯增大，與周圍組織粘連較重，部分組織表面可見暗紅色或灰白色片狀結節。前列泰組腺體中度增大，與周圍組織有粘連，彈性較差，部分組織表面呈暗紅色，其程度較模型對照組明顯減輕。敦煌前列寶組腺體與周圍組織有輕度粘連，腺體較柔軟，表面有光澤，但腺體較正常對照組有輕度的腫脹。見圖1。

圖1 各組大鼠前列腺組織病理學對比(HE染色，100×)

2.3 各組大鼠血液流變學指標對比

與正常對照組對比，模型對照組紅細胞壓積、血漿黏度及全血黏度升高，差別有統計學意義(P＜0.01)。與模型對照組對比，敦煌前列寶組各血液流變學指標均降低，差別有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。與前列泰組對比，敦煌前列寶組的各血液流變學指標偏低，差別無統計學意義(P＞0.05)見表2。

表2 各組大鼠血液流變學指標對比 ±s

表2 各組大鼠血液流變學指標對比 ±s

注:與正常對照組對比，＊＊＊P＜0.01;與模型對照組對比，##P＜0.05，###P＜0.01;與前列泰組對比，ΔP＞0.05。

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2.4 各組大鼠前列腺組織勻漿ET-1含量對比

與正常對照組對比，模型對照組大鼠前列腺組織中 ET-1含量增高，差別有統計學意義(P＜0.05)。與模型對照組對比，敦煌前列寶組和前列泰組前列腺組織ET-1含量均減少，差別有統計學意義(P＜0.01、P＜0.05)。與前列泰組對比，敦煌前列寶組前列腺組織ET-1含量減少，差別有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 各組大鼠前列腺組織ET-1含量對比 ±s

表3 各組大鼠前列腺組織ET-1含量對比 ±s

注:與正常對照組對比，＊＊P＜0.05;與模型對照組對比，##P＜0.05，###P＜0.01;與前列泰組對比，ΔΔP＜0.05。

ET-1正常對照組組別 動物數0.300 0±0.012 0模型對照組 8 0.505 0±0.010 2＊＊前列泰組 8 0.471 3±0.174 8##敦煌前列寶組 8 0.253 8±0.152 3###ΔΔ 8

3 討論

中醫典籍中雖無前列腺炎病名，但根據其臨床癥狀可歸屬于“精濁”、“白淫”范疇。歷代醫家對其病因病機進行了深入探討，認為濕熱是前列腺炎早期的主要病機、精濁瘀阻是其主要病理變化、腎虛是其后期病機演變的結果。敦煌前列寶是在敦煌《輔行訣臟腑用藥法要》所載的“大瀉腎湯”的基礎上，依據臨床經驗并根據慢性前列腺炎“腎虛為本，濕熱、血瘀為標”的病機本質加減化裁而成。“大瀉腎湯”以茯苓為君，淡以利竅，甘以助陽;以大黃為臣，重用以清泄濕熱、活血化瘀;輔以黃芩清熱燥濕、瀉火解毒;獨特之處是在蕩滌祛實之中，妙用芍藥護陰，佐以干姜辛開溫陽，陰陽并調，氣化以行。敦煌前列寶方是在上方基礎上酌加了川牛膝、益母草，是針對前列腺炎瘀血病機，增強其組方的活血化瘀、利尿通淋之功效。

本研究采用傳統的前列腺內注射消痔靈方法復制了慢性非細菌性前列腺炎動物模型［2］，并且以血液流變學和ET-1為觀察指標［3］，研究結果表明敦煌前列寶可明顯改善實驗性慢性非細菌性前列腺炎大鼠前列腺組織的炎癥狀態及病理損傷，其主要機制可能是通過提高前列腺指數，升高模型大鼠全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積百分率及降低前列腺組織中ET-1的表達，從而改善模型大鼠的血液流變學異常及內皮功能紊亂。此研究為敦煌前列寶臨床治療慢性前列腺炎提供了理論依據，也為敦煌古方的臨床開發提供了佐證。

［1］王琦.王琦男科學［M］.北京:中國中醫藥出版社，1997: 653.

［2］史紅，鄭曉亮.慢性非細菌性前列腺炎動物模型研究進展錢伯初［J］.中國臨床藥理學與治療學，2007，12(1): 14－18.

［3］陳國宏，李蘭群，任映.前列通瘀湯對前列腺蛋白所致慢性非細菌性前列腺炎大鼠前列腺組織細胞因子影響的研究［J］.北京中醫藥大學學報，2007，30(6):406－408.