某地區HIV/AIDS患者T淋巴細胞亞群與中醫證型的相關性分析*

王春芳，徐立然，符林春

(1.河南中醫學院第一附屬醫院，河南鄭州450000;2.廣州中醫藥大學，廣東廣州510405)

艾滋病全稱獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immune deficiency syndrome，AIDS)，是由人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染引起的傳染病。人體內CD4+T淋巴細胞是HIV的主要受體，在HIV直接和間接作用下，CD4+T細胞被大量破壞和功能受損，導致細胞免疫缺陷，同時其他免疫細胞均不同程度受損，促進各種嚴重的機會性感染和腫瘤發生，導致死亡。因此，淋巴細胞亞群的檢測在評價HIV感染者和AIDS患者的免疫狀況及預后判斷等方面都具有重要作用。近年來，中醫藥治療艾滋病取得了較好的臨床療效，然而對HIV/ AIDS中醫證型及病機演變規律的探索仍處于起步階段。本研究擬探索HIV/AIDS淋巴細胞亞群與中醫證型的關系，為進一步研究HIV/AIDS中醫病機演變提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2008年3月—2008年7月，選取某省某農村地區HIV/AIDS患者276例，健康對照者11例。所有HIV感染者均在2004年某省有償獻血人群艾滋病普查中被確診，感染途徑均為1990—1995年之間的有償獻血感染。HIV/AIDS組男158例，女118例;年齡35～67歲，平均(45.0±3.5)歲。健康對照組男6例，女5例;年齡36～65歲，平均(44.1±3.9)歲。2組患者一般資料對比，差別無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 病例選擇標準

1.2.1 納入病例標準

①符合HIV/AIDS診斷標準(采用2005年中華人民共和國衛生部頒布的《艾滋病診療指南》［1］標準)及中醫辨證分型標準(參照1997年中華人民共和國國家標準《中醫臨床診療術語證候部分》［2］，并結合筆者前期對HIV/AIDS患者的臨床調查，擬訂中醫證候辨證標準);②年齡在18～60歲;③有艾滋病流行病史及臨床表現，HIV抗體確證試驗陽性〔均經河南省疾病預防控制中心(CDC)進行免疫印跡確認試驗(WB)HIV抗體陽性者〕;④CD4細胞計數為≤400個/μL(美國BD公司的流式細胞檢測儀);⑤癥狀體征積分≥8分;⑥簽署知情同意書。

1.2.2 排除病例標準

①急性感染期的患者;②患有嚴重的精神及神經疾病者;③合并有其他嚴重原發性疾病(嚴重腦血管疾病，EKG嚴重異常，ALT＞正常1.5倍，CK＞正常;WBC≤3×109L－1等);④有嚴重的機會性感染和機會性腫瘤者。

1.3 樣本的采集、處理及觀察指標

HIV/AIDS患者及健康對照者清晨8:00空腹，取靜脈血8 mL，其中4 mL按1∶1加入1個有乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝劑的真空采血管，輕搖，存在(20±5)℃環境下，備用。收集樣品在4 h以內進入實驗室檢測，由某大學醫學院血液病研究所采用流式細胞儀進行CD3+、CD4+、CD8+T細胞檢測。

1.4 統計學方法

采用SPSS 13.0統計分析軟件處理。計量資料數據以均數(x－)±標準差(s)表示，組間比較采用t檢驗;計數資料組間比較采用χ2檢驗;等級資料組間比較采用Ridit分析。以P＜0.05為差別有統計學意義。

2 結果

對276例HIV/AIDS患者進行中醫辨證，歸納為6個證型，不同證型之間及各證型與健康對照組T細胞亞群分布比較見表1。各證型組與健康對照組對比，除痰濕內蘊型在CD3+方面沒有表現顯著性下降，其余各證型組CD3+、CD4+T細胞水平均較健康人明顯下降(P＜0.05)。276例HIV/AIDS不同證型之間對比，CD3+T細胞水平在氣血虧虛兼痰濕組最低，與氣血虧虛兼血瘀組、氣血虧虛組對比，差別有統計學意義(P＜0.05)。其他各組之間對比，差別無統計學意義(P＞0.05)。CD4+T細胞水平在痰濕內蘊組最低，與氣血虧虛組、氣血虧虛兼血瘀組對比，差別有統計學意義(P＜0.05);其他各組之間對比，差別無統計學意義(P＞0.05)。

表1 HIV/AIDS不同證型之間及各證型與健康對照組T細胞亞群分布對比 個/μL，±s

表1 HIV/AIDS不同證型之間及各證型與健康對照組T細胞亞群分布對比 個/μL，±s

注:與健康對照組對比，*P＜0.05;與氣血虧虛兼血瘀組、氣血虧虛組對比，#P＜0.05;與氣血虧虛兼血瘀組、氣血虧虛組對比，△P＜0.05。

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3 討論

人類T淋巴細胞具有識別特異性抗原的能力，對體內的體液和細胞免疫反應類型和強度都有較重要的調節作用。T淋巴細胞免疫功能狀況是決定HIV感染病情發展的最重要因素，同時，其他淋巴細胞群諸如NK細胞等在HIV感染中可能也起到一定的作用［3］。人體感染艾滋病病毒后，隨著疾病的進展，各項免疫指標均有明顯變化，而中醫證候學也認為，同一種疾病在不同的發展階段會有不同的表現，即證型的轉換。因此，筆者將HIV/AIDS進行中醫辨證分型，同時應用流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群的表面標志，以了解不同證型HIV感染者T細胞亞群的變化，試圖探討HIV/AIDS淋巴細胞亞群與中醫證型之間的關系。

在T淋巴細胞分類中，CD3+T細胞包含2個細胞亞群，即CD4+T細胞和CD8+T細胞，CD4+T細胞代表T輔助細胞，而CD8+T細胞代表T抑制細胞和T殺傷細胞。HIV感染的免疫病理改變主要包括CD4+T細胞數量的下降和功能的改變，以及機體的異常免疫激活。CD4+T細胞計數能直接反映艾滋病患者的免疫功能狀態，其減少的程度與本病的臨床特征有一定的關系，臨床上常以CD4+T細胞數量的多少作為劃分疾病的分期和進行抗病毒治療的依據［4］。許多機制被用來解釋CD4+T細胞數量的下降，其中細胞凋亡包括自發性凋亡、Fas介導的凋亡及活化誘導的凋亡，被認為是CD4+T細胞數量下降的重要機制，此外，CD4+T淋巴細胞增殖能力的下降也是CD4+T淋巴細胞減少的原因之一。

機體的異常免疫激活主要表現為T細胞的過度活化。CD8+T細胞能夠清除受感染細胞內的病毒，HIV進入人體后會激活CD8+T細胞，CD8+T細胞活化后分化為細胞毒性T細胞(CT1)，通過對被感染CD4+T細胞的細胞殺傷作用，起到抑制病毒復制的作用，但最終卻不能控制HIV的感染，其中原因除了病毒因素(如病毒變異、減少被感染細胞MHC2的表達等)外，還與HIV特異性CD8+T細胞的持續耗竭有關。此外研究發現，大部分HIV特異性CD8+T細胞分泌穿孔素的水平較低，引起的細胞裂解效應不明顯，有人認為HIV特異性CD8+T細胞可能不屬于高效殺傷細胞。疾病晚期CD8+T細胞的克隆形成能力降低，導致HIV細胞毒T細胞的最終消亡［5］。

本研究結果顯示，各證型與健康對照組T細胞亞群分布對比，除痰濕內蘊型外，各證型CD3+、CD4+T細胞水平均較健康人下降(P＜0.05)，反映HIV/AIDS較正常人免疫功能的整體低下。而痰濕內蘊型CD4+T細胞水平作為各組中最低的一組，在CD3+T細胞方面與其他組對比，沒有表現顯著性下降，可能與其CD4+T細胞明顯減少的同時CD8+T細胞被激活，數量增加有關(本研究顯示其CD8+T細胞數量最高，盡管與其他組對比，差別無統計學意義)。HIV/AIDS不同證型T細胞亞群分布對比，氣血虧虛組、氣血虧虛兼血瘀組CD4+T細胞水平較高，痰濕內蘊組CD4+T細胞水平明顯下降，差別有統計學意義;而CD3+T細胞水平在氣血虧虛兼痰濕組中明顯低于氣血虧虛兼血瘀組、氣血虧虛組。結果提示，HIV/AIDS虛證(氣血虧虛)或虛實夾雜證(氣血虧虛兼血瘀)可能為早期表現，以邪實為主的痰濕內蘊證及氣血虧虛兼痰濕證患者機體免疫功能下降更為顯著，可能為疾病發展到較嚴重階段的主要證型，提示艾滋病病毒侵襲人體后，五臟氣血陰陽正氣受損，繼而因虛致實，產生瘀血痰濕病理性產物，早期病理性產物以瘀血為主，進一步發展產生痰濕濁邪。

由本研究可以看出，HIV/AIDS中醫證型的不同，與機體淋巴細胞亞群數量的變化密切相關，在CD3+、CD4+、CD8+等指標方面，表現出虛證、虛實夾雜證與實證(痰濕內蘊)之間免疫損害由淺入深的規律。基于目前醫學界對HIV感染造成的免疫異常的認識，結合我們以前的臨床及研究［6－7］，是否提示艾滋病病毒侵襲人體后，五臟氣血陰陽正氣受損，較早表現出以氣血虧虛或脾腎兩虛等為主的虛證，此時免疫損害尚較輕，隨著疾病進展，因虛致實，產生瘀血痰濕病理性產物，免疫損害逐漸加深。由于此次研究的對象以某地區輸血感染艾滋病人群為主，且排除了急性感染期及有嚴重機會性感染的患者，故還需在今后的工作中擴大樣本量，進一步研究HIV/AIDS中醫證型與相關免疫學指標的相關性，為深入探討艾滋病這種新發病的病因病機、證候演變規律提供思路和佐證。

［1］中華醫學會感染病學分會艾滋病學組.艾滋病診療指南［J］.中華傳染病雜志，2006，24(2):133－144.

［2］國家技術監督局.GB/T16751.2——1997中醫臨床診療術語證候部分［S］.北京:中國標準出版社，1997.

［3］Spivak AM，Sydnor ER，Blankson JN，et al.Seronegative HIV-l infection:a review of the literature［J］.AIDS，2010，24(2):1407－1414.

［4］Pitcher CJ，Hagen SI，walker JM，et al.Development and homeostasis 0f T ceLL memory in rhesusmacaque［J］.J Immunol，2002，168(1):29－43.

［5］RoLLand M，Nickle DC，DengW，et al.Recognition of HIV-1 peptides by host CTl is related to HIV-1 similarity to human proteins［J］.Plos One，2007(2):823.

［6］岑玉文，符林春.HIV/AIDS患者中醫證型、證型演變及其與T淋巴細胞活化關系的研究［D］.廣州:廣州中醫藥大學，2008.

［7］郭建中，徐立然.108例無癥狀期HIV感染者臨床流行病學特征及中醫證候分析［J］.云南中醫中藥雜志，2011，32(5):18－20.