許會芬,羅軍,李芳,余康,石恒波,李君,林先滋,朱江江
西北農林科技大學動物科技學院 陜西省農業分子生物學重點實驗室,陜西 楊凌 712100
固醇調節元件結合蛋白 (Sterol regulatory element binding protein,SREBPs) 是體內重要的核轉錄因子,屬于 bHLH-Zip (Basic helixloop-helix leucine zipper) 核轉錄因子超家族的一員,與體內膽固醇及脂肪生成基因的調節密切相關[1-2]。研究發現,SREBPs可以直接激活膽固醇、脂肪酸、甘油三酯及磷脂生物合成及攝取過程中 30多個基因及還原型輔酶Ⅱ (NADPH) 的表達[2-4]。乳腺作為哺乳動物的特有器官,是機體脂質合成的3個主要部位 (脂肪、肝臟及乳腺)之一[5]。與肝臟、脂肪不同的是,乳腺具有較強的泌乳功能,可以使外源基因在乳腺中表達后隨乳汁排出體外[6],是研究基因功能的良好材料。研究表明,SREBP-1基因對哺乳動物乳腺脂肪酸代謝過程發揮重要調控作用。在小鼠泌乳期內,SREBP-1基因的表達量是干奶期的3~4倍,其靶基因的表達量也有不同程度的上調,在泌乳高峰期達到最高[7]。并且隨著泌乳高峰期的到來,乳中短中鏈脂肪酸 (C6∶0?C14∶0) 的比例也隨之增大。山羊奶中短中鏈脂肪酸含量高,具有較高的營養價值,而關于羊奶脂肪酸代謝相關基因功能的研究較少,因此SREBP-1基因的超表達研究有助于揭示該基因的功能。
本研究通過構建 SREBP-1基因的重組腺病毒超表達載體,轉染HEK 293細胞包裝擴增出高滴度的腺病毒,并感染乳腺上皮細胞,研究該基因超表達后對脂肪酸代謝相關基因的影響,為SREBP-1基因的功能研究及奶山羊脂肪酸代謝調控基因網絡構建等提供實驗依據?!?br>