富血小板血漿復合物對腱－骨愈合界面力學性能影響的組織學研究*

翟文亮 鄭燕梅 丁真奇 呂辰瑋 高躍川 郭以河

(中國人民解放軍第175醫院 廈門大學附屬東南醫院骨科，漳州 363000)

富血小板血漿復合物對腱－骨愈合界面力學性能影響的組織學研究*

翟文亮 鄭燕梅①丁真奇 呂辰瑋①高躍川①郭以河

(中國人民解放軍第175醫院 廈門大學附屬東南醫院骨科，漳州 363000)

目的 通過對健康成年新西蘭大白兔行生物力學拉伸試驗后標本的腱骨界面、移植物及其斷裂層面進行組織學及組織化學觀察，評價富血小板血漿(platelet rich plasma，PRP)復合異體脫蛋白骨(deproteined bone，DPB)對前交叉韌帶(anterior cruciate ligament，ACL)重建后腱骨愈合的影響。 方法 36只成年新西蘭大白兔，隨機分為3組，每組12只:富血小板血漿復合異體脫蛋白骨組(PRP+DPB組)，異體脫蛋白骨組(DPB組)，空白對照組。建立雙側自體單股半腱肌肌腱重建ACL模型，前2組骨隧道內分別植入PRP凝膠與DPB復合物、DPB，空白對照組行單純ACL重建。術后4、8、12、24周取材行生物力學測試(單一軸向的拉伸試驗)后，采用HE、Alcian blue、Masson染色及VEGF免疫組織化學觀察各組腱骨愈合、移植物及其斷裂層面組織學特點，分析各自的力學薄弱點。 結果 行拉伸試驗后，術后4、8周各組標本肌腱移植物均從股骨隧道內斷裂拉出，但PRP+DPB組術后8周時標本肌腱斷裂處靠近股骨隧道內口，DPB組及空白對照組斷裂部位位于隧道中段。術后12周時PRP+DPB組6個標本中有5個肌腱斷裂部位在關節腔內部分，另2組仍從隧道內斷裂拉出。術后24周時各組標本均在關節腔內部分斷裂。組織學觀察:術后4周時PRP+DPB組HE染色見斷裂層面在腱骨結合部，可見少許疏松的纖維組織，Alcian blue染色未見細胞異染，Masson染色見肌腱斷端纖維排列紊亂，VEGF免疫組化染色見較多陽性細胞表達;DPB組及空白對照組斷裂層面在腱骨界面，斷端見瘢痕組織。術后8周時PRP+DPB組HE染色見斷裂層面在隧道內口處腱骨結合部，可見較致密的纖維結締組織，Alcian blue染色未見細胞異染，Masson染色見肌腱斷端纖維排列較前規則，VEGF免疫組化染色仍有較多陽性細胞表達，但較之前少;DPB組及空白對照組在靠近隧道中段處腱骨界面斷裂，斷端見疏松纖維組織。術后12周時PRP+DPB組肌腱斷端見膠原纖維排列較前有序，梭形細胞散在分布，Alcian blue染色見斷端有少量細胞異染，VEGF免疫組化陽性細胞數量少;DPB組及空白對照組在靠近隧道內口處腱骨界面斷裂，斷端見較致密的纖維組織，肌腱斷端纖維排列紊亂，Alcian blue染色未見異染。術后24周時各組斷端纖維排列整齊，PRP+DPB組可見橢圓形細胞，Alcian blue染色呈異染，較另2組明顯，VEGF免疫組化3組均難以檢出。術后4、8、12周，PRP+DPB組VEGF表達與DPB組、空白對照組有顯著性差異(P＜0.05)，即表達增強;DPB組與空白對照組各時間點VEGF表達差異無統計學意義(P＞0.05);術后24周3組標本的VEGF表達差異無統計學意義(P＞0.05)。 結論 ACL重建術后早期(8周以內)的薄弱點在腱骨界面，晚期在于移植肌腱。PRP可以提高腱骨間骨向肌腱內長入，從而增加腱骨愈合后的抗拉伸力。

腱－骨愈合; 富血小板血漿; 前交叉韌帶; 重建; 組織學

*南京軍區醫學科技創新課題基金資助項目(09MA070)

①(福建中醫藥大學碩士研究生，福州 350000)

前交叉韌帶(anterior cruciate ligament，ACL)是膝關節內重要的靜力性穩定結構，損傷后難以自愈。目前，手術重建ACL是治療ACL斷裂的有效方法，重建后腱－骨愈合與否是手術成敗的關鍵因素。本研究在行單股半腱肌重建ACL時于骨隧道中分別加入富血小板血漿(platelet rich plasma，PRP)復合異體脫蛋白骨(deproteined bone，DPB)復合物(PRP+DPB)、DPB，并與空白對照組相比較，術后不同時間對移植物拉伸后進行組織學、組織化學觀察，旨在觀察腱骨界面、移植物及其斷裂層面組織學情況，在形態學上找出腱骨愈合的薄弱點。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

健康成年新西蘭大白兔36只［清潔級，由廈門大學動物中心提供，動物批號:SYXK(閩)，2007－0013，雌雄不限］，體重3 ～3.5 kg，隨機分為3 組，每組12只:富血小板血漿復合異體脫蛋白骨組(PRP+DPB組，于骨隧道中加入PRP及DPB復合物);異體脫蛋白骨組(DPB組，于骨隧道中植入DPB);空白對照組(僅行雙股半腱肌移植重建ACL，骨隧道內不植入任何物質)。市售新鮮新生小牛股骨干骺端松質骨。牛凝血酶(1000 U/支，凍干粉劑)、氯化鈣凝結劑(Sigma公司，美國);血管內皮細胞生長因子VEGF(武漢博士德公司)，枸椽酸鈉抗凝劑(中國醫藥集團試劑公司);電子顯微鏡(Olympus公司，日本)。

1.2 PRP、DBP及其凝膠復合物的制備

1.2.1 PRP 制備 參照改進的 Landesberg 等［1］的方法制備PRP:自兔耳背中央動脈采集5 ml全血，采用二次離心法制備PRP。先將裝有5 m l全血的A離心管放入恒溫離心機內，以轉速1400 r/min離心10 min，離心后吸取上部血漿及界面下2 mm的紅細胞轉移至B離心管中，B離心管再次以轉速140O r/min離心15 min，去掉上部的血漿層，剩余約l.2 ml搖勻即為PRP。全部過程均在無菌條件下進行，離心機內的溫度恒定22℃，并保持環境溫度于20℃。

1.2.2 DPB制備 根據丁真奇等［2］方法進行DPB制備。洗凈、烘干、分袋、環氧乙烷消毒，備用。

1.2.3 PRP/DPB復合物的制備 將異種脫蛋白松質骨與富血小板血漿在抽真空條件下混合，使富血小板血漿被吸附入異種脫蛋白骨的纖維孔隙中，完成兩者的復合。在復合過程中加入0.2 ml凝血劑(由10%氯化鈣1 ml與1000 U的牛凝血酶組成)，搖勻，放置10 s左右使其封閉部分纖維孔隙，減少PRP的快速滲出。

1.3 手術方法及術后處理

速眠新Ⅱ注射液和氯胺酮注射液等量混合，按0.4 ml/kg于肌內注射行全身麻醉。雙膝備皮，術區消毒，鋪巾，屈膝90°。按趙耀等［3］報道的方法重建兔ACL，將肌腱牢固縫合于股骨外側隧道口周圍軟組織上，進行懸吊式固定。DPB+PRP組及DPB組分別將PRP復合物或DPB通過股骨及脛骨隧道內外口填入股骨及脛骨隧道內;空白對照組:不放置肌腱以外的植入材料。術后查前抽屜試驗及Lachman試驗陰性后，徹底沖洗關節，關閉關節腔，逐層縫合。術后每只兔分籠喂養，術后3 d青霉素注射液800 000 U/d肌注預防感染。

1.4 移植物的拉伸

分別于術后4、8、12、24周用空氣栓塞法處死，每組各時間點各處死3只。剔除多余軟組織，制成骨－前交叉韌帶－骨標本。取材時主要大體觀察骨隧道封閉情況、肌腱移植物是否斷裂移動等，并做記錄。用牙托粉包埋好標本的脛骨端和股骨端，測試在BiominMTS858萬能測試材料機上進行。行單一軸向的拉伸試驗，拉伸速度500 mm/min，分別記錄移植肌腱斷裂的部位。

1.5 組織學分析

將生物力學測試后的標本置于10%中性福爾馬林固定，經脫水、透明、石蠟包埋，沿骨隧道縱軸面切片，制成6μm厚的切片。分別行 HE、Alcian blue、Masson染色及血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)免疫組織化學染色。VEGF的檢測使用即用型免疫組織化學染色試劑盒(鼠抗兔，武漢博士德公司)，步驟按說明書進行，鏡下觀察VEGF的表達情況。采用FPAXMedview1.0圖像分析系統對每張切片于高倍視野(×400)下隨機選取10個不重疊視野進行半定量測定VEGF免疫組織化學染色積分吸光度值(IA)，細胞質或間質出現棕褐色均染或顆粒判為VEGF陽性細胞。每個標本取2張切片，計算平均陽性細胞數。

1.6 統計學處理

2 結果

2.1 大體形態觀察及斷裂部位

重建ACL大致呈柱狀，較正常ACL暗淡，脛骨止點端均較股骨止點處粗大，移植物表面覆蓋有滑膜及少量血管。PRP+DPB組各時間點標本見有類軟骨樣組織封閉隧道內口(圖1a)，且晚期較早期多。DPB組肌腱移植物較PRP+DPB組細，骨隧道稍有擴大(圖1b)。空白對照組肌腱更細，有少量標本移植物呈絲狀自溶現象，骨隧道明顯擴大(圖1c)。生物力學拉伸試驗后，4、8周時各組標本肌腱移植物均從股骨隧道內斷裂拉出，但PRP+DPB組術后8周時標本肌腱斷裂處靠近股骨隧道內口，DPB組及空白對照組斷裂部位位于隧道中段。術后12周時PRP+DPB組肌腱斷裂部位為關節腔內部分，而其他2組仍從隧道內斷裂拉出。術后24周時各組標本均在關節腔內部分斷裂。

2.2 組織學觀察和比較

2.2.1 HE染色 術后4周PRP+DPB組肌腱斷裂部位位于股骨隧道內，斷裂層面在腱骨結合部，可見少許疏松的纖維組織。DPB組移植物斷裂部位及層面觀察與PRP+DPB組相似。空白對照組肌腱與骨隧道間隙較大，斷裂部位靠近股骨隧道外口，斷裂層面處見疤痕組織。術后8周PRP+DPB組移植肌腱與骨隧道間可見纖維軟骨帶連接，近隧道外口及隧道中段見軟骨細胞逐漸鈣化成骨，有少許新生骨組織向肌腱內長入，肌腱纖維內見梭形細胞，纖維排列較前有序，斷裂部位靠近隧道內口，斷裂層未見新生骨;DPB組及空白對照組均形成sharpey’s纖維，纖維走向不規則，結合疏松，斷裂部位近隧道中段。術后12周PRP+DPB組腱骨界面處見典型的四層結構及潮線，新生骨明顯成熟，隧道內部分肌腱纖維排列有序，移植物于關節腔內部位斷裂，斷端見膠原纖維排列較隧道內紊亂，梭形細胞及橢圓形細胞較少(圖2a);DPB組及空白對照組sharpey’s樣纖維較前有序，肌腱纖維不規整，斷裂部位位于隧道內口，斷端可見少量軟骨細胞(圖2b，c)。24周3組移植肌腱均從關節腔部位斷裂，但PRP+DPB組腱骨界面編織骨已成熟，向肌腱方向長合，肌腱纖維排列較另2組有序，肌腱中央部位可見散布的軟骨細胞，而另兩組被纖維結締組織連接。

2.2.2 Alcian blue染色 術后4周時在腱骨界面，PRP+DPB組較DPB組及空白對照組見較多短桿狀或橢圓形細胞，Alcian blue染色時細胞周圍有異染，而在肌腱部位及斷層則無此異染現象。術后8周時PRP+DPB組腱骨結合部及肌腱內均見軟骨細胞，異染明顯，斷層未見異染(圖3a);DPB組較空白對照組亦見有軟骨細胞，但二者肌腱內及斷層未見異染現象(圖3b，c)。術后12周時PRP+DPB組隧道內腱骨界面及肌腱內中央部位見成串狀的軟骨細胞，有些軟骨細胞鈣化，形成骨組織，肌腱斷端少許軟骨細胞分布。術后24周時3組腱骨界面、移植肌腱及斷層可見軟骨細胞異染，但PRP+DPB組較另2組明顯。

圖1 a.術后4周PRP+DPB組，隧道口有類軟骨樣組織封閉;b.術后4周DPB組，股骨隧道口擴大;c.術后4周空白對照組，股骨隧道口明顯擴大 圖2 a.術后12周PRP+DPB組，斷裂部位在關節腔內部分，但隧道內移植物部分撕裂，腱骨界面結合緊密;b.術后12周DPB組，斷裂部位在隧道內口，斷端膠原纖維排列尚整齊，腱骨界面結合較PRP+DPB組疏松;c.術后12周空白對照組斷裂部位在隧道內，斷端膠原纖維排列紊亂，腱骨界面結合仍較前2組疏松 HE染色 ×100 圖3 a.術后8周PRP+DPB組，隧道內腱骨結合緊密，新生骨向肌腱內長入，見較多橢圓形細胞，周圍異染;b.術后8周DPB組，斷裂部位在隧道內口，腱骨界面未見新生骨向肌腱長入，但亦見異染的軟骨細胞;c.術后8周空白對照，肌腱撕裂部位未見骨組織長入 Alcian blue染色 ×100 圖4 a.術后12周PRP+DPB組，隧道內腱骨結合緊密，腱骨界面見典型的四層結構，潮線形成，肌腱纖維走向整齊;b.術后12周DPB組，腱骨界面結合較疏松，肌腱纖維走向規則;c.術后12周空白對照，肌腱纖維走向較紊亂，肌腱呈縱向波浪狀，結合疏松 M asson染色 ×100 圖5 a.術后8周，PRP+DPB組VEGF的陽性表達呈強陽性;b.術后8周，DPB組VEGF的陽性表達呈弱陽性，與PRP+DPB組相比明顯較少;c.術后8周，空白對照組VEGF的陽性表達與PRP+DPB組相比明顯較少，但與DPB組相比無明顯差異

2.2.3 Masson染色 術后4周時PRP+DPB組肌腱與骨隧道間形成較致密的纖維樣結締組織，肌腱纖維走向紊亂;DPB組及空白對照組形成的纖維樣組織較疏松，肌腱纖維走向更加紊亂。術后8周時PRP+DPB組肌腱纖維走向較前有序規則，見長梭形細胞及橢圓狀細胞;DPB組纖維走向較空白對照組有序，肌腱內少許橢圓狀細胞。術后12周時PRP+DPB組隧道內部位纖維組織排列規則(圖4a)，但關節腔部位肌腱纖維仍較紊亂，長梭形細胞及橢圓形細胞較隧道內部位少;另2組較8周時纖維排列規則，且DPB組纖維走向較空白對照組整齊(圖4b，c)。術后24周時PRP+DPB組纖維排列近似正常的 ACL，肌腱中央部位軟骨細胞排列，而DPB組及空白對照組纖維排列縱向成波狀，未見明顯的軟骨細胞形成。

2.2.4 VEGF免疫組織化學 術后4周的標本中，3組均見明顯的VEGF表達陽性細胞，但PRP+DPB組每高倍鏡視野下陽性細胞數量明顯高于DPB組及空白對照組。術后8周及12周時在腱－骨界面，PRP+DPB組VEGF表達趨于下降，僅局限于成熟的血管內皮細胞內，但仍多于DPB組及空白對照組，DPB組與空白對照組相似(圖5)。術后24周時各組VEGF表達均難以檢出。

2.2.5 統計學分析 術后 4周，PRP+DPB組VEGF表達與DPB組、空白對照組有顯著性差異(P ＜0.05)，即表達增強;術后 8、12 周，PRP+DPB組VEGF表達與DPB組、空白對照組有顯著性差異(P＜0.05);DPB組與空白對照組各時間點VEGF表達差異無統計學意義(P＞0.05);術后24周3組標本的VEGF表達差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 3組標本不同時間點VEGF的表達(n=6)

3 討論

3.1 PRP可以促使腱－骨界面直接止點的形成

ACL重建后移植肌腱與骨隧道及早、可靠的愈合是手術成功的關鍵。正常的ACL通過膠原纖維與礦化組織相連，這種連接是一種逐漸過渡的組織結構，可以分為4個區域:韌帶、纖維軟骨、礦化的纖維軟骨和骨［4］。研究表明ACL重建后可形成直接止點或間接止點［5］。間接的sharpey’s纖維連接和直接的纖維軟骨連接為腱－骨界面提供了不同的固定強度和界面屬性。近年來的研究普遍認為:腱－骨愈合時，首先形成一圈富含血管的纖維結締組織帶(界面組織)填充在腱與骨之間［6］，隨后來源于隧道骨組織的成纖維細胞逐漸長入，形成連接，繼而形成類似直接止點的結構。本研究結果顯示PRP+DPB組各時間點腱骨界面均較另外2組成熟，8周時可見較規則的sharpey’s纖維，12周時即見典型的四層結構，形成直接止點，并可見編織骨形成，新生骨組織向肌腱內長合，結合緊密，說明PRP有利于ACL重建后腱－骨界面形成直接止點。

3.2 隧道內肌腱的韌帶化重建

ACL重建術后腱－骨的良好愈合不僅包括腱骨止點的形成，也包括肌腱移植物的韌帶化過程。ACL重建后，肌腱移植物早期出現急性炎癥反應，組織缺血壞死;隨后進入慢性炎癥階段，移植物再血管化，細胞再生增殖;最后膠原纖維爬行替代、塑型及韌帶化［7］。再血管化對移植物愈合非常重要，但再血管化通常需要較長時間。Unterhauser等［8］報道移植肌腱在術后6周時血管密度最高，術后24周時達到正常ACL水平。本實驗中PRP+DPB組VEGF的陽性表達在早期較DPB組及空白對照組高，晚期無差異。8周時肌腱中央部位Alcian blue染色有明顯異染現象，說明這些細胞分泌酸性黏多糖蛋白，為軟骨細胞，移植肌腱已逐步韌帶化，近似正常的ACL。空白對照組各時間點無明顯異染，肌腱纖維呈縱向波狀，肌腱韌帶化較差，形態學仍近似于半腱肌腱。實驗說明PRP復合物有助于重建后肌腱的韌帶化重建，進而更好地促進腱骨愈合。

3.3 腱－骨界面新骨形成與斷裂部位的關系

重建ACL的最終目的是要達到功能上的恢復。在狗的模型中，Rodeo等［9］證明移植肌腱在骨隧道的愈合要16周。在拔出實驗時，斷裂發生在移植物本身或者加固部位，然而在2、4、8周時斷裂發生在固定部位，12周時可能出現混合型的斷裂。本研究結果表明各時間點各組行生物力學拉伸試驗后的斷裂部位及層面組織學結構有差異。術后4周時各組均為隧道內斷裂拉出，但PRP+DPB組靠近隧道中段，其他2組靠近隧道外口;術后8周時PRP+DPB組靠近隧道內口，另2組靠近隧道中段;術后12周時PRP+DPB組斷裂位于肌腱關節腔內部位，而DPB組及空白對照組仍在隧道內部位。這些說明隧道內存在不同的生物學及生物力學環境，隧道內腱骨愈合情況受固定后雨刷效應、橡皮筋效應、關節液等影響。PRP+DPB組各時間點斷裂部位與其他2組不同，斷裂面有較多軟骨細胞形成，可見新生骨組織向肌腱內長合，長合的部位未見斷裂，斷裂主要發生在未長合的部位，而其他組缺乏這種骨組織的長入。說明PRP確有促進成骨作用，進而促進腱骨愈合，而骨組織的長入可顯著提高界面愈合后的抗拉伸力。

3.4 PRP增強腱－骨間結合力的可能機制

腱－骨愈合的修復是多種生長因子共同作用的結果，腱－骨愈合進程中多種生長因子在腱骨界面表達［10，11］。PRP 富含多種生長因子，PRP 與 DPB 凝膠復合物既具有高效誘導成骨活性和骨傳導作用，又不引起免疫排斥反應，其主要成分PRP經凝血酶－鈣劑激活后釋放大量高濃度生長因子［12～14］，具有促進組織愈合和組織再生的功能［15］，并且來源于自體，采集方便，安全價廉，具有廣泛的應用前景。但PRP促進腱骨愈合的機制尚未明了，PRP+DPB組標本隧道口處有類軟骨樣組織填充，這可能是PRP促進成骨，封閉隧道口，阻止關節液浸入隧道內，從而促進腱骨愈合。PRP與DPB復合在腱骨結合部塞入，消除了腱骨間的縫隙，使肌腱與骨隧道直徑匹配合理，擠壓嚴密，這也有利于避免鐘擺效應，防止骨隧道擴大，從而避免關節液浸入骨隧道而影響腱骨愈合。此外，本研究結果顯示肌腱與骨整合部位結合緊密，未發生斷裂，斷裂層面主要發生在組織學上兩者未長合處，說明提高腱骨間骨向肌腱長入可能是促進腱骨愈合的有力措施。由于目前上PRP促進腱骨愈合的研究還尚處于動物實驗研究階段，應用于臨床仍需要長期的努力與探索。

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(責任編輯:李賀瓊)

Effect of Platelet-rich Plasma on the M echanical Property of Healing Tendon-bone Interface:Histological Study

Zhai Wenliang*，ZhengYanmei，DingZhenqi*，etal.*DepartmentofOrthopedics，175thHospitalofChinesePLA，Zhangzhou363000，China

ObjectiveTo observe the histological changes at the tendon-bone interface，graft and ruptured locations after tensile fracture test of the anterior cruciate ligament reconstruction，and to evaluate effectof platelet-rich plasma(PRP)combined with deproteinized bone(DPB)of the calf as a bone tunnel infilling on the healing tendon-bone interface.MethodsA total of 36 healthy，skeletally ature New Zealand white rabbits were random ly divided into PRP+DPB，DPB，and control groups，with 12 rabbits in each.An ACL reconstructionmodelwas established with semitendinosus tendon autograft.In the PRP+DPB and DPB groups，PRP and/or DPB were placed into the bone tunnel.Atweek 4，8，12，and 24，specimenswere obtained for tensile fracture test，and then HE，Alcian blue，Masson，and VEGF immunohistochemistry staining were used to observe the tendon-bone healing，graft，and the rupture locations.ResultsAfter the tensile fracture test，the tendon graftswere ruptured and pulled out from the femoral tunnel in all the groups atweeks4 and 8;however in the PRP+DPB group，the rupturewas close to the inner end of the femoral tunnel atweek 8，while in the DPB and control groups，it was located in themiddle of the tunnel.At week 12，five of the six specimens from the PRP-DPB group showed the rupture site in the articular cavity，while in the other groups，itwas still in the femoral tunnels.Atweek 24，in all the groups，the rupturewas located in the articular cavity.Atweek 4，the rupture in the PRP+DPB group was shown at the tendon-bone interface，and a little loose fibrous tissuewere detected with HE staining at4 weeks;irregular collagen fiberswere seen in the stump with Masson staining and VEGF.In the other two groups，the rupturewas also at the tendon-bone interface，and scar tissues were discovered there.At week 8，the rupture in the PRP+DPB group was at the tendon-bone interface，but closer to the cavumarticulare;there were dense fibrillar connective tissues shown with HE staining;collagen fibers becamemore regularwith Masson staining，and expression of VEGFwere still strong but less then that atweek 4.Whereas，in the DPB and control groups，the rupture was located at the tendon-bone interface close to themid-tunnel，and loose fibrillar connective tissueswere seen in the stump.Atweek 12，in the PRP+DPB group，the collagenous fiberswere arranged regularly at the rupture site，and some spindly cells interspersed in it;the oblong cells presented dielectial dyeing around them with Alcian blue staining，and the expression of VEGFwasweak.Atweek 24，in the stump，therewere compact fibrous tissues and irregular collagenous fiber in all the groups;in the PRP+DPB group，oblong cells were detected，and Alcian Blue staining showed dielectial dyeing，which was more obvious than that in the DPB and control groups;VEGF was not detectable in any of the groups.The expression of VEGF in the PRP+DPB group was significantly higher than that in the other two groups atweeks4，8，and 12(allP＜0.05).However，atweek 24，no differencewas detected among the three groups(P＞0.05).Between the DPB and control groups，no significantdifferencewas detected in the levelof VEGF expression atany of the time points(P＞ 0.05).ConclusionsThe weak spot in the tendon-bone healing after anterior cruciate ligament reconstruction is at the tendon-bone interface in early stage(8 week)，and thenmoves to the tendon graft later.PRP can enhance new born tissues growing into the graft and promote the healing process at the tendon-bone junction，and thus strengthen the anti-tensile force in tendon-bone healing.

Tendon-bone healing;Platelet-rich Plasma;Anterior cruciate ligament;Reconstruction;Histology

R－332

A

1009－6604(2012)06－0569－06

2011－08－29)

2012－02－17)

·短篇論著·