吳 濤
淺析中藥鑒定技術(shù)的發(fā)展
吳 濤
(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),哈爾濱150040)
中藥材鑒定技術(shù)的重要任務(wù)是研究鑒定中藥的品質(zhì),鑒定其真?zhèn)闻c優(yōu)劣,整理復(fù)雜品種,尋找、開(kāi)發(fā)新藥源。倘若想實(shí)現(xiàn)該任務(wù)則須有切實(shí)有效、與時(shí)俱進(jìn)的技術(shù)方法作為保障。伴隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步,已經(jīng)涌現(xiàn)出了新的特色學(xué)科,而這些新學(xué)科也正被融入中藥鑒定技術(shù)的研究發(fā)展道路上來(lái),這樣無(wú)疑開(kāi)辟了新思路與新技術(shù),對(duì)中藥鑒定工作的發(fā)展而言意義深遠(yuǎn)。淺析了幾種中藥鑒定技術(shù)的新發(fā)展。
中藥鑒定技術(shù);DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù);聚類(lèi)分析法
我國(guó)地大物博,中藥材資源豐富且來(lái)源復(fù)雜,其中存在真品、偽品、混淆品、野生品、習(xí)用品以及栽培品等差異,與此同時(shí),鑒于中藥材的成分非常復(fù)雜,難免存在著難以進(jìn)行定性定量分析、缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)量不穩(wěn)定以及難以控制等問(wèn)題,以上種種都為深入研究中藥材帶來(lái)了一定程度上的困難。由此可見(jiàn),中藥鑒定顯得尤為重要,它是中藥材應(yīng)用研究的基本工作,其任務(wù)主要為鑒定中藥的真?zhèn)闻c優(yōu)劣,整理中藥的復(fù)雜品種,以期尋找并開(kāi)發(fā)新藥源,其意義與重要性早已不言而喻,為控制中藥材質(zhì)量、保證臨床用藥安全有效,中藥鑒定成為中藥研究的首要任務(wù),其成敗將直接關(guān)系到中藥各項(xiàng)研究工作結(jié)論的正誤。
DNA分子作為遺傳信息的直接載體,具有信息含量大、相對(duì)較高的遺傳穩(wěn)定性以及不受外界環(huán)境因素制約等特點(diǎn)。DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù),將直接分析遺傳物質(zhì)DNA在不同生物個(gè)體間的差異,將使藥材分類(lèi)和資源的研究更加科學(xué)化??梢?jiàn),從分子水平提高鑒定技術(shù),有助于保證中藥質(zhì)量,利于促進(jìn)中藥材標(biāo)準(zhǔn)化、國(guó)際化,因此用DNA分子特征作為遺傳標(biāo)記進(jìn)行中藥鑒別更為準(zhǔn)確可靠。陳大霞等[1]用黃連基因組DNA作為模板,通過(guò)單、雙因子實(shí)驗(yàn)研究了ISSR反應(yīng)體系中主要成分及熱循環(huán)參數(shù)(退火溫度、循環(huán)數(shù)、變性時(shí)間、退火時(shí)間、延伸時(shí)間)對(duì)擴(kuò)增結(jié)果的影響,找出各自的最適條件,建立了適合黃連ISSR分析的反應(yīng)體系與擴(kuò)增程序,該優(yōu)化系統(tǒng)的建立為日后應(yīng)用該技術(shù)進(jìn)行黃連鑒定及種質(zhì)遺傳多樣性分析提供了一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化程序。
免疫技術(shù)主要是基于不同的動(dòng)、植物藥材含有不同的特異蛋白,利用該蛋白制備的特異抗體與待檢品中的特異抗原結(jié)合產(chǎn)生沉淀反應(yīng)來(lái)鑒別中藥材的真?zhèn)?。該技術(shù)主要適用于鑒別動(dòng)、物藥材,特別是親緣關(guān)系較接近的動(dòng)物藥材之間的鑒別。國(guó)內(nèi)學(xué)者[2]應(yīng)用免疫電泳法與瓊脂免疫擴(kuò)散法準(zhǔn)確鑒定了虎、豹等多種動(dòng)物的骨骼。此外,該技術(shù)還能將豹骨進(jìn)一步精確鑒定為雪豹、石豹或金錢(qián)豹,可見(jiàn)免疫鑒別技術(shù)是一種特異性十分強(qiáng)的鑒別方法。
聚類(lèi)分析法,指的是根據(jù)對(duì)象的定性或定量特征進(jìn)行分組歸類(lèi)的一種現(xiàn)代統(tǒng)計(jì)方法,即選取不同的模糊相似系數(shù)或長(zhǎng)短距離計(jì)算公式,將一批樣品或變量實(shí)施數(shù)據(jù)處理,以期得到不同的動(dòng)態(tài)聚類(lèi)圖,再通過(guò)數(shù)圖可進(jìn)行分類(lèi)、鑒定中藥材的質(zhì)量。常璇等[3]利用聚類(lèi)分析法對(duì)寧夏中寧縣與平羅縣兩地的枸杞中銅、鋅、鍺、錳、砷、硒等6種微量元素的含量進(jìn)行了鑒定以比較不同產(chǎn)地之間的枸杞品質(zhì),結(jié)果示該法在整體水平上能夠區(qū)分不同產(chǎn)地枸杞中6種元素含量,誤判率為零,通過(guò)更多的驗(yàn)證后,在不同省區(qū)枸杞之間進(jìn)行聚類(lèi)分析比較研究,能夠?yàn)殍坭降赖匦再|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供極具價(jià)值的依據(jù)??梢?jiàn)聚類(lèi)分析法可用于中藥的鑒別,方法簡(jiǎn)便且樣品處理較簡(jiǎn)單,將有助于實(shí)現(xiàn)中藥材質(zhì)量的規(guī)范化。
中藥指紋圖譜技術(shù),指的是某中藥材或中成藥中所共有的、具有特征性的某類(lèi)或幾種成分的色譜或光譜的圖譜,也就是說(shuō)應(yīng)用一定方法(如HPLC、TLC、GC、HPLC-MS、FTIR、GC-MS以及X-ray等),對(duì)特定對(duì)象(如中藥材、飲片、提取物等)和特定過(guò)程進(jìn)行分析,以期得到具有特征性的相對(duì)穩(wěn)定的圖譜。該技術(shù)的最大特點(diǎn)就是通過(guò)指紋圖譜的特征性,從而有效鑒別出樣品的真?zhèn)巍.?dāng)前使用最多的中藥化學(xué)指紋圖譜主要采用HPLC法[4],能夠提供大量信息,符合中藥材的復(fù)雜體系研究需要。
應(yīng)用現(xiàn)代化分析技術(shù)進(jìn)行中藥鑒定,創(chuàng)建更為先進(jìn)的中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)體系,發(fā)展現(xiàn)代中藥質(zhì)量監(jiān)控技術(shù),已然成為保證中藥臨床應(yīng)用安全、有效、可控以及實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的核心。中藥鑒定技術(shù)的迅速發(fā)展,豐富了人們對(duì)中藥的認(rèn)識(shí),也提高了藥材品質(zhì)的評(píng)價(jià)體系水平。此時(shí)需強(qiáng)調(diào)的是,在引入新技術(shù)的同時(shí)并不意味著廢棄傳統(tǒng)方法,因?yàn)槎鄶?shù)新方法仍舊基于探索階段,傳統(tǒng)方法依然是中藥鑒定中不可或缺的方法,唯有在正確合理使用傳統(tǒng)方法與現(xiàn)代新技術(shù)的基礎(chǔ)上,才可使中藥鑒定技術(shù)合理的發(fā)展、提高。此外,除以上新技術(shù)被應(yīng)用到中藥鑒定領(lǐng)域外,還有示波極譜法、核磁共振波譜法、模糊數(shù)學(xué)法、電鏡掃描法以及mRNA差異顯示等,這些新技術(shù)對(duì)于完善中藥鑒定的標(biāo)準(zhǔn)化和科學(xué)性也具有重要意義。
[1] 陳大霞,李隆云,魯成.黃連ISSR反應(yīng)條件優(yōu)化的研究[J].植物研究,2007, 27(1):77.
[2] 向金蓮,張榕.現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用[J].華西藥學(xué)雜志,2001, 16(3):204.
[3] 常璇,奇林.聚類(lèi)分析方法對(duì)寧夏中寧縣和平羅縣枸杞中6種元素綜合指標(biāo)的比較研究[J].寧夏大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006,27(3):248.
[4] 路飚,彭詠梅. HPLC法測(cè)定心腦健滴丸中兒茶素和表兒茶素的含量[J].湖南中醫(yī)雜志,2007,23(1):78.
10.3969/j.issn.1672-2779.2012.18.111
1672-2779(2012)-18-0158-02
2012-07-14)