強心顆粒對耐常壓缺氧、利尿及抗氧化作用的初步觀察

秦文艷， 李春偉， 董 波， 陳 賀， 孟 莉， 趙金明*

(1.遼寧省中醫藥研究院，遼寧沈陽110031;2.遼寧電力中心醫院，遼寧沈陽110015)

慢性心力衰竭 (chronic heart failure，CHF)，簡稱心衰，是指各種心臟病及其他臟器疾病發展到嚴重階段所致心功能不全的一種綜合征，病機為各種原因導致心肌收縮力下降使心排血量不能滿足機體代謝的需要，器官組織灌注不足，臨床表現為肺循環和 (或)體循環瘀血癥狀，如呼吸困難、水腫等。心力衰竭時通常伴有肺循環和 (或)體循環的被動性充血故又稱之為充血性心力衰竭［1］。強心顆粒由紅參，制附子，黃芪，葶藶子等中藥組成，具有益氣溫陽、強心、活血利水的功效，本實驗主要考察了強心顆粒改善心肌供氧、利尿及抗氧化作用。

1 材料

1.1 試驗藥物 強心顆粒由遼寧省中醫藥研究院藥學實驗室提供，棕褐色顆粒，1 g顆粒含3.67 g生藥，批號:20081015;心寶丸，廣東省藥物研究所制藥廠，批號:20080922;注射用鹽酸多柔比星 (阿霉素)，山西普德藥業有限公司，批號:20080103;鹽酸普萘洛爾片，東北制藥總廠，批號:20080103;氫氯噻嗪片，天津力生制藥股份有限公司，批號:0806010;馬來酸依那普利片，揚子江藥業集團，批號:08100902;SOD酶聯免疫試劑盒，美國ADL公司，批號:SM200908;MDA酶聯免疫試劑盒，美國ADL公司，批號:SM200908。

1.2 實驗動物 ICR小鼠及Wistar大鼠由中國醫科大學實驗動物中心提供，動物許可證號:SCXK(遼)2007-0009。

1.3 儀器 LD5—2A離心機，北京醫用離心機廠。

1.4 統計學處理 應用SPSS11.5統計軟件進行處理。

2 方法和結果

2.1 強心顆粒對小鼠常壓耐缺氧的影響［2］體質量18～22 g健康ICR小鼠60只，雌雄各半，按性別體質量隨機分為6組，每組10只。分別為空白對照組，強心顆粒低劑量組21.5 g/kg、中劑量組43 g/kg、高劑量組86 g/kg，中藥陽性對照藥心寶丸組0.28 g/kg和西藥陽性對照藥鹽酸普萘洛爾片組0.052 g/kg。每天灌胃 (ig)給藥1次，連續7 d，空白對照組給予同體積蒸餾水。試驗前各組小鼠禁食16 h，末次給藥后45 min，將小鼠放入裝有15 g鈉石灰的250 mL廣口磨口瓶中，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴，使之不漏氣，立即計時。以小鼠呼吸停止時間為指標，記錄小鼠因缺氧而死亡的時間 (存活時間)，t檢驗比較各給藥組與空白對照組之間差異顯著性，結果見表1。

表1 強心顆粒對小鼠常壓耐缺氧的影響 (±s)

表1 強心顆粒對小鼠常壓耐缺氧的影響 (±s)

注:與空白對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0.001。

/min空白對照組 —組別 劑量/(g·kg-1)動物數/只 存活時間10 29.4±2.0強心顆粒低劑量組 21.5 10 30.1±5.5強心顆粒中劑量組 43 10 32.3±3.6*強心顆粒高劑量組 86 10 35.1±4.4＊＊心寶丸組 0.28 10 36.4 ±6.3＊＊鹽酸普萘洛爾組 0.052 10 39.3±4.4＊＊＊

結果表明，強心顆粒中、高劑量組，中藥對照藥心寶丸組和西藥對照藥鹽酸普萘洛爾組均顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間，與空白對照組比較差異顯著 (P＜0.05，P＜0.01和P＜0.001)。提示強心顆粒具有增強小鼠耐常壓缺氧能力的功效。

2.2 強心顆粒對代謝籠法小鼠利尿作用的影響［3］體質量18～22 g健康ICR小鼠60只，雌雄各半，按性別體質量隨機分為6組，每組10只。分別為空白對照組，強心顆粒低劑量組21.5 g/kg、中劑量組43 g/kg、高劑量組86 g/kg，中藥陽性對照藥心寶丸組0.28 g/kg和西藥陽性對照藥氫氯噻嗪片組0.026 g/kg。每天灌胃給藥1次，連續給藥7 d，空白對照組給予同體積的蒸餾水。試驗前將各小鼠放入代謝籠中適應兩天，試驗前小鼠禁食16 h，末次給藥后各小鼠同時灌胃給予蒸餾水1 mL/只進行水負荷，然后觀察并記錄水負荷后1 h、2 h、3 h、4 h、5 h時各小鼠的尿量，t檢驗比較各給藥組與空白對照組之間各時間點尿量差異顯著性，結果見表2。

表2 強心顆粒對小鼠利尿作用的影響 (±s)

表2 強心顆粒對小鼠利尿作用的影響 (±s)

注:與空白對照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0.001。

組別 劑量/(g·kg-1) 動物數/只 尿量/mL 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h空白對照組 — 10 0.15±0.14 0.19±0.13 0.16±0.11 0.08±0.06 0.18±0.16強心顆粒低劑量組 21.5 10 0.18±0.10 0.34±0.30 0.46±0.48 0.83±0.68＊＊ 0.46±0.50強心顆粒中劑量組 43 10 0.16±0.08 0.23±0.16 0.21±0.13 0.35±0.18＊＊ 0.23±0.17強心顆粒高劑量組 86 10 0.09±0.02 0.27±0.18 0.22±0.15 0.22±0.12＊＊ 0.22±0.14心寶丸組 0.28 10 0.14±0.08 0.15±0.11 0.20±0.08 0.08±0.04 0.09±0.06氫氯噻嗪組 0.026 10 0.28±0.17 0.43±0.12＊＊＊ 0.34±0.17* 0.29±0.24*0.27±0.29

結果表明，強心顆粒低、中、高劑量組，氫氯噻嗪片組給藥后均能增加小鼠水負荷后4 h的尿量，與空白對照組比較，有顯著性差異 (P＜0.01)。提示強心顆粒給藥后4 h具有利尿作用。

2.3 強心顆粒對心衰大鼠血清SOD和MDA的影響［4-5］體質量200～250 g健康Wistar大鼠120只，雌雄各半。飼養1周后，除10只大鼠作為空白對照組外，其它大鼠腹腔注射3 mg/kg注射用鹽酸多柔比星，每周1次，連續腹腔注射4周，空白組腹腔注射同體積生理鹽水。末次注射1周后，造模大鼠較空白組大鼠進食量減少，毛色欠華，體質量減輕，活動量減少，注射時掙扎力明顯減弱。心臟彩超顯示，左室射血分數 (LVEF＜50%)則心衰造模成功。挑選造模成功的大鼠60只，按體質量隨機分為6組，即模型組，強心顆粒低劑量組15 g/kg、中劑量組30 g/kg、高劑量組60 g/kg，中藥陽性對照藥心寶丸組0.2 g/kg和西藥陽性對照藥馬來酸依那普利片組0.001 8 g/kg。每天灌胃給藥1次，連續給藥30 d，空白對照組和模型組給予同體積的蒸餾水。末次給藥后，10%水合氯醛 (3.5 mL/kg)腹腔注射麻醉，腹主動脈取血5 mL，分離血清 (3 000 r/min，離心15 min)，酶聯免疫試劑盒測定血清中SOD活性和MDA水平。t檢驗比較各給藥組與模型組之間差異顯著性，結果見表3。

表3 強心顆粒對心衰大鼠SOD和MDA的影響(±s)

表3 強心顆粒對心衰大鼠SOD和MDA的影響(±s)

注:與模型組比較，*P＜0.05;與空白對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別 劑量/(g·kg-1) 動物數/只 SOD/(U·L-1) MDA/(mmol·L-1)空白對照組-10 19.87±8.18 0.78±0.10模型組 - 10 12.26±6.50# 1.12±0.27##強心顆粒低劑量組 15 10 19.00±8.34 0.89±0.20*強心顆粒中劑量組 30 10 20.36±8.96* 0.88±0.13*強心顆粒高劑量組 60 10 23.07±11.02* 0.85±0.16*心寶丸組 0.20 10 20.14±7.92* 0.86±0.20*馬來酸依那普利片組 0.018 10 19.40±6.77* 0.86±0.14*

結果表明，模型組SOD和MDA與空白對照組比較差異顯著 (P＜0.05，P＜0.01)。強心顆粒低、中、高劑量組、心寶丸組和馬來酸依那普利片組均能提高心衰大鼠血清中SOD活力，并降低MDA水平，與模型組比較差異顯著 (P＜0.05)。表明強心顆?？赏ㄟ^抗氧化作用發揮其改善心功能的作用。

3 討論

心肌缺血缺氧會引起心肌細胞代謝過程紊亂，尤其是能量物質的生成銳減，正常心功能難以維持，進而發生心衰。又因血流中斷，有害的產物難以清除。因此，可以通過改善血供，降低氧耗，清除或對抗有害物質對心肌的不良影響以保護心肌［6］。近年來發現氧自由基 (oxygen free radicals，OFR)及其脂質過氧化物 (Lipidperoxide，LPO)可能參與了心衰形成、發展的病理過程。生理情況下，體內氧自由基的產生和清除保持動態平衡，心衰時由于心肌缺血缺氧，使氧自由基產生增加，同時清除氧自由基的防御系統活性下降，從而使氧自由基進一步增多，而氧自由基的增多又可損害心肌導致或加重心衰。膜的脂質過氧化反應是氧自由基損傷的主要途徑，MDA是脂質過氧化損傷的主要代謝終產物，而SOD則是機體抗氧化防御系統中的重要金屬酶，是體內唯一直接淬滅自由基的酶，其活性直接影響體內脂質過氧化的平衡。本實驗結果表明，強心顆粒中、高劑量組均顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間;提高心衰大鼠血清中SOD活性，并降低MDA水平。提示強心顆粒具有增強小鼠耐常壓缺氧能力的功效，同時可通過清除氧自由基和脂質過氧化物發揮其改善心功能的作用。利尿劑是治療心力衰竭的關鍵藥物之一，它能較快的緩解心力衰竭的癥狀，比其他藥物作用迅速;也是唯一可以適當控制心力衰竭患者體內水鈉潴留的藥物。強心顆粒低、中、高劑量組均能增加小鼠水負荷后4 h的尿量，提示其可能通過利尿作用減輕心衰患者的水鈉潴留，降低前負荷，從而改善心衰。綜上可見，強心顆?？赡芡ㄟ^增加心肌供氧，抗氧化作用及利尿作用而發揮其抗心力衰竭的作用。

［1］汪艷麗，劉如秀，劉志明.中西醫結合治療對慢性心衰患者心功能的影響［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2010，8(10):1151-1152.

［2］朱秋萍，李洪亮，范小娜.黃花倒水蓮水提取物耐缺氧作用的研究［J］.贛南醫學院學報，2007，27(4):510-511.

［3］陳永梅，崔紅霞，蘇富琴，等.復方前列腺炎栓劑抗炎利尿作用實驗研究［J］.齊齊哈爾醫學院學報，2000，21(2):123-124.

［4］韓 凡，羅 翌，梅廣源.參附芪注射液治療充血性心力衰竭的實驗研究［J］.中國中醫急癥，2005，14(11):1088-1089.

［5］韓紅亞，李 瑞，仙人強心片對充血性心力衰竭家兔氧自由基清除作用的實驗研究［J］.山西中醫學院學報，2004，5(1):19-21.

［6］付曉春，王 希，鄭 輝，等.葒草苷對缺血缺氧心肌的保護作用［J］.南方醫科大學學報，2007，27(8):1173-1175.