博卡病毒的感染狀況

韓慶彥，賀奮義，高生智，尚立宏，周 峰，姚奕蕾，王 佳

（甘肅省動物疫病預防控制中心，甘肅 蘭州730046）

自2005年從幼兒檢測到博卡病毒（Boca virus）以來，包括中國在內的很多國家報道了人的博卡病毒感染和研究情況，自2009年從豬群中檢測到博卡病毒以來，包括從臨床健康豬、斷奶多系統衰竭綜合征、高熱病和具有腹瀉癥狀的豬群中檢測到博卡病毒的報道也陸續增多。但其致病性研究還不夠，進一步研究博卡病毒具有重要的現實意義。

1 病毒

博卡病毒（Boca virus）是細小病毒科、細小病毒亞科、博卡病毒屬的成員。包括人博卡病毒（Human Boca virus，HBoV）、豬博卡病毒（Porcine Boca virus，PboV）。PboV 與犬小病毒（Canine minute virus，MVC）和牛細小病毒（Bovine parvovirus，BPV）同源性較高。

博卡病毒是單股線狀DNA病毒，其基因組全長約為4.8kb～5.2kb，包括3個開放性閱讀框（ORFs），其中ORF1編碼非結構蛋白NS1，ORF2編碼結構蛋白VP1／VP2，ORF3位于基因組的中間，編碼磷酸化的非結構蛋白 NP1［1－2］。

研究發現，博卡病毒的非結構蛋白（NS1）較為保守，而兩個衣殼蛋白（VP1／VP2）較易發生突變，這提示不穩定的VP1／VP2基因突變可能是導致新種群產生和病毒逃逸免疫監視的重要原因和機制，而穩定的NS1基因則可能成為制備疫苗和藥物作用的靶點［3］。

基于ORF3基因序列，將曾經報道的6個PBoV分為四種類：PoBoV1（豬博卡病毒，簡稱PBoV1），PoBoV2（豬細小病毒 4，簡稱 PPV4），PoBoV3（PBoV1／PBoV2）和 PoBoV4（6V／7V），PoBoV3和PoBoV4分別包括2個基因型［4］。

通過對PBoV全長基因組的測序與分析，發現我國所流行的PBoV與瑞典的毒株同源性非常高，PBoV基因序列與犬小病毒（CMV）的親緣關系更為接近，而與引起豬繁殖障礙的豬細小病毒的基因組同源性為52%～53%。

2 感染狀況

HBoV最早于2005年，在一位患下呼吸道疾病的瑞典兒童體內被發現［5］。已有許多國家報道了HBoV的流行［6］。2006年中國疾病預防控制中心也檢出HBoV［7］。迄今來自五大洲的數據均發現，HBoV常從患急性呼吸道疾病（喘氣、咳嗽、流鼻涕和發燒等）的病人（大多數來自兒童）體內檢測到，而且有呼吸道癥狀兒童的病毒載量高于發熱驚厥或沒有顯著呼吸道發現物的兒童。HboV也可從急性腹瀉的嬰兒糞便中檢測出，在西班牙，患有急性腹瀉兒童的527份糞標本中有48份檢測到HBoV；目前臨床尚無 HBoV感染的特效治療方法［8］。HBoV感染可以單獨存在，也可與其他病毒混合感染，其混合感染率為7%～50%［9－10］，最常見的是與呼吸道合胞病毒共同感染，其次是與甲型流感病毒的共同感染。所報道病例的流行率從加拿大病人的1.5%到約旦呼吸道感染兒童的18%［11］。

2009年，瑞典科研人員利用宿主DNA清除、隨機多重置換擴增方法（random multiple displacement amplification，MDA），在患仔豬斷奶后多系統衰竭綜合征的豬淋巴結中檢測到博卡病毒，命名為豬博卡病毒（Porcine Boca virus，PBoV）［12］。文獻報道的中國健康豬群PBoV陽性率為7.3%～16.7%，斷奶仔豬多系統衰竭綜合征、豬高熱病、仔豬腹瀉等發病豬群 PBoV 的 陽 性率為 30% ～100%［13－16、19］，斷奶仔豬的感染率明顯高于哺乳仔豬。暗示其對豬有一定的致病性，但未能按照“科赫法則”進一步證實PBoV是致病性病原。自2006年我國暴發豬高熱病以來，其主要病原被確定為豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株，但在豬繁殖與呼吸綜合征病毒陽性的病料中也頻繁地檢出豬圓環病毒2型、豬偽狂犬病病毒及豬瘟病毒等［17－18］。對2009年中國部分省市豬場的191份疑似患高熱病的病料（組織108份、血清76份及精液7份）檢測發現，PBoV的總陽性率為39.3%（75／191），組織59.3%（64／108）、血清14.5%（11／76）、精液0%（0／7），其中陽性率大于70% 以上樣品（來自北京、河北、安徽、新疆）所在豬場有著高的發病率和死亡率［19］。

自2011年年初至今，國內很多豬場陸續暴發了傳染病性腹瀉病，主要集中在產房哺乳仔豬，哺乳仔豬死亡率在20%～85%，抗生素治療和疫苗免疫均未取得好的效果，疑似為新的病毒病，同時有些科研單位也報道，從腹瀉仔豬的糞便中檢測出PboV［13］；也有研究認為，豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus.PEDV）所致［20－21］，但傳統的流行性腹瀉和傳染性胃腸炎弱毒苗、滅活苗反復免疫，效果不明顯［13］，死亡率可達 100%［21］，僅9.52%（2／21）的豬場沒有發病，而且有66.67%（14／21）以上的豬場首次發病后20～60d左右再次發病。本次豬腹瀉疫情中，PboV的致病情況怎么樣，還需進一步研究。

3 檢測

目前國內尚未見到成功分離病毒的報道。

HBoV檢測方面的研究工作均采用PCR擴增和實時熒光定量PCR擴增技術，科學家正在建立ELISA、DFA、IFA、Western Blot等［5、9］多種檢測方法，用于HBoV的臨床診斷，并為進一步研究提供基礎。

已報道的PBoV檢測方法主要是根據Gen－Bank上遞交的豬博卡病毒核苷酸序列（登錄號：FJ872544、GU902967－GU902971）設計特異性引物，建立的PCR檢測方法，并將NP1基因克隆、原核表達，據報道已經建立的PCR方法特異性強、敏感度高、重復性好，表達的NP1蛋白具有良好的反應原性［19、22］。

4 小結和前景

博卡病毒作為一種新發現的病毒，是對人呼吸道感染病毒的重要補充。在豬群中，斷奶仔豬多系統衰竭綜合征、豬高熱病、豬腹瀉病例以及健康豬群中均檢測出了該病毒。目前，HBoV和PBoV的分子生物學和流行病學研究方面已取得一定的成就，但其檢測方法需要進一步的改進，致病性等問題需進一步研究，特別是PBoV在2011年年初以來國內豬群腹瀉病中的致病作用，以便指導HBoV和PBoV引起疾病的防治。

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