飛龍掌血石油醚部位的化學(xué)成分研究Δ

石磊，王微，姬志強(qiáng)，康文藝#（.解放軍第55中心醫(yī)院，河南開封475003；.河南大學(xué)中藥研究所，河南開封 475004）

飛龍掌血Toddalia asiatica（Linn）Lam.為蕓香科飛龍掌血屬（Toddalia）植物，該屬植物只有飛龍掌血1種。飛龍掌血分布于亞洲東及東南部、非洲東及東南部[1]，在中國(guó)是傳統(tǒng)的活血化瘀中草藥[2]。許多文獻(xiàn)報(bào)道了飛龍掌血提取物的藥理作用：胡興堯等[3]研究了飛龍掌血乙醇提取物的鎮(zhèn)痛抗炎作用；郝小燕等[4]發(fā)現(xiàn)飛龍掌血總堿具有鎮(zhèn)痛抗炎的作用；王秋靜等[5]發(fā)現(xiàn)飛龍掌血的水提取物具有鎮(zhèn)痛抗炎的作用；栗世鈾等[6]的研究表明，飛龍掌血乙醇提取物具有抗A型流感病毒活性。

近年來的研究表明，飛龍掌血主要含有香豆素類、生物堿類、萜類等成分[7]。本課題組對(duì)飛龍掌血進(jìn)行了持續(xù)研究，采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用法研究證明其脂溶性成分主要為烴類和酯類[8]。藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，飛龍掌血石油醚部位具有止血活性[9]。為此，本試驗(yàn)對(duì)該植物的石油醚部位進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分分析，通過理化方法和波譜數(shù)據(jù)確定了6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。

1 儀器與試藥

UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)（上海尤尼可儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東京理化器械株式會(huì)社）；電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Avance-400MHz核磁共振（NMR）儀（瑞士Bruker公司）；EZ-中壓制備液相色譜儀（上海利穗公司）。

飛龍掌血于2008年9月采集于貴州都勻市，經(jīng)黔南民族師范學(xué)院郭治友教授鑒定為真品。硅膠（200～300目）、硅膠H與GF254（煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司）；進(jìn)口硅膠（美國(guó)Merck公司）；Sephadex LH-20（英國(guó)Amersham公司）；ODS（美國(guó)Daiso公司）。

2 提取與分離

取飛龍掌血根1.3kg，以甲醇冷浸3次，每次7d，將濾液濃縮后與80目進(jìn)口硅膠拌樣，分別以石油醚、乙酸乙酯和甲醇洗脫，得到石油醚、乙酸乙酯和甲醇部位。取石油醚部位113g上硅膠200～300目色譜柱，以石油醚-丙酮溶液（100∶1→8∶2，V/V）梯度洗脫，薄層色譜（TLC）檢測(cè)，濃縮、合并，得洗脫組分13份。

取其中第5份與第6份合并拌樣，干法上硅膠柱，以石油醚-乙酸乙酯溶液為洗脫劑，反復(fù)經(jīng)減壓柱、凝膠柱純化，得化合物1（7.8mg）和化合物2（10.8mg）；取洗脫餾分第7份上硅膠柱，以石油醚-乙酸乙酯溶液為洗脫劑，反復(fù)經(jīng)減壓柱、進(jìn)口硅膠柱、丙酮凝膠柱純化，得化合物3（80mg）；取洗脫餾分第9份上硅膠柱，以石油醚-丙酮溶液為洗脫劑，反復(fù)經(jīng)減壓柱、進(jìn)口硅膠柱、丙酮凝膠柱純化，得化合物4（100mg）；取洗脫餾分第10份上硅膠柱，以石油醚重結(jié)晶4次，經(jīng)減壓柱、凝膠柱純化，得化合物5（81.4mg）；取洗脫餾分第11份上硅膠柱，以石油醚-丙酮溶液為洗脫劑，經(jīng)減壓柱、凝膠柱純化，得化合物6（46.1mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色固體，化學(xué)式為C18H36O2。EI-MS（m/z）：284[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：2.31（2H，J＝7.4Hz，H-2），1.58（2H，J＝7.2Hz，H-3），0.85（3H，t，J＝6.9Hz，H-18）；13C-NMR（CDCl3，400Hz）δ：179.5（C-1），34.1（C-2），31.9（C-3），30.1～27.4（C-4～15），24.8（C-16），22.7（C-17），14.2（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道一致，故鑒定化合物1為十八酸。

化合物 2：淺黃色油狀物。EI-MS（m/z）：282[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：5.34（2H，H-9，10），2.35（2H，J＝7.6Hz，H-2），2.05（4H，H-8，11），1.63（2H，m，H-3），0.87（3H，H-18）；13C-NMR（CDCl3，400Hz）δ：179.8（C-1），130.0（C-10），129.7（C-9），34.1（C-2），31.9（C-16），27.3（C-8，11），24.7（C-3），22.6（C-17），14.2（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道一致，故鑒定化合物2為油酸。

化合物3：白色粉末，硫酸噴霧顯紫色。EI-MS（m/z）：280[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：5.34～5.41（4H，H-9，10，12，13），2.80～2.82（2H，H-11），2.34～2.38（2H，H-2），2.06～2.10（4H，H-8，14），1.64（2H，H-3），1.28～1.35（14H，H-4～7，15～17），0.89（3H，t，J＝6.2Hz，H-18）；13C-NMR（CDCl3，100MHz）δ：179.5（C-1），34.3（C-2），32.1（C-3），29.2～29.9（C-4～7，15），27.5（C-8，14），128.2（C-9），130.3（C-10），25.8（C-11），130.3（C-12），128.4（C-13），24.7（C-16），22.9（C-17），14.1（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道一致，故鑒定化合物3為亞油酸。

化合物4：白色晶體，其TLC與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品的Rf值一致，且混合后熔點(diǎn)不下降。EI-MS（m/z）：413[M-1]+。13C-NMR（CDCl3，400MHz）δ：37.3（C-1），31.7（C-2），71.8（C-3），42.3（C-4），140.8（C-5），121.7（C-6），31.9（C-7），31.9（C-8），50.2（C-9），36.5（C-10），21.1（C-11），28.3（C-12），42.4（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），39.8（C-16），56.1（C-17），11.9（C-18），19.1（C-19），36.2（C-20），18.8（C-21），34.0（C-22），26.2（C-23），45.9（C-24），29.2（C-25），19.4（C-26），19.8（C-27），23.1（C-28），12.0（C-29）。以上性質(zhì)和數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道一致，故鑒定化合物4為β-谷甾醇。

化合物5：淡黃色針晶。EI-MS（m/z）：246[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：4.0（3H，s，OCH3），4.15（3H，s，OCH3），6.31（1H，d，J＝9Hz，C3-H），8.03（1H，d，J＝9Hz，C4-H），7.03（1H，d，J＝2Hz，C4′-H），7.59（1H，d，J＝2Hz，C5′-H）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道一致，故鑒定化合物5為茴芹內(nèi)酯。

化合物6：淡黃色粉末。EI-MS（m/z）：333[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：9.73（1H，s，H-6），8.71（1H，s，H-4），8.36（1H，d，J＝3.9Hz，H-10），8.33（1H，d，J＝3.9Hz，H-11），7.83（1H，d，J＝9.0Hz，H-12），7.58（1H，d，J＝9.0Hz，H-9），7.25（1H，s，H-1），6.12（2H，s，H-13），4.11（3H，s，7-OMe），4.04（3H，s，8-OMe）；13C-NMR（CDCl3，400MHz）δ：146.5（C-6），127.1（C-12），118.3（C-10），118.2（C-11），104.4（C-1），102.1（C-4），101.3（C-13），61.9（7-OMe），56.8（8-OMe）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物6為去甲白屈菜紅堿。

4 討論

本研究采用硅膠柱色譜法對(duì)飛龍掌血的石油醚部位進(jìn)行分離純化，通過波譜分析鑒定了6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為3個(gè)脂肪酸、1個(gè)甾體、1個(gè)內(nèi)酯和1個(gè)生物堿類化合物。脂肪酸類化合物（化合物1～3）為首次從飛龍掌血中分離得到，其中油酸和亞油酸是人體必需的不飽和脂肪酸，對(duì)高血壓、高膽固醇有明顯療效[16]。因此，本研究可對(duì)開發(fā)利用飛龍掌血資源在創(chuàng)制中成藥新品種及綜合利用等方面提供科學(xué)依據(jù)。

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