高效液相色譜法在藥物合成中的應用

曹長春 韓永紅 張艷軍 劉斌 劉家秀

高效液相色譜法在藥物合成中的應用

曹長春 韓永紅 張艷軍 劉斌 劉家秀

目的介紹HPLC在藥物合成中的應用。方法舉例說明HPLC在藥物合成中的應用并與傳統方法作比較。結果HPLC已廣泛應用于藥物合成。結論HPLC在藥物合成中的應用前景廣闊。

HPLC;藥物;合成

高效液相色譜(high performance liquid chromatography，HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上引入氣相色譜理論而迅速發展起來的［1］。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒填料雖具有高柱效，但阻力高，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜，又因分析速度快被稱為高速液相色譜。藥物合成需要具有高分離效能的分析方法作為“眼睛”來判斷反應的進程、分析組分的純度以及雜質的含量。HPLC作為一種高效的分析方法在藥物合成中起著不可或缺的作用。

1 HPLC與化學藥物合成

1.1 跟蹤反應和探討機理 采用合適的分析方法對藥物合成反應進行監測、判斷反應的進程以及終點是至關重要的。薄層色譜法(thin layer chromatography，TLC)和HPLC是目前監測藥物合成反應的主要方法，后者在合成反應中的應用實例很多。吡喃鹽是很多有機合成反應的前驅化合物，單繼宏等用HPLC跟蹤實驗首次合成出了銀橋聯的多苯基吡喃鹽，確定了反應在熱力學上的可行性，也明確了各反應因素影響［2］。陶建清等應用電噴霧質譜和HPLC等譜學手段研究phen-5，6-dione與乙二胺、二胺基順式丁烯二腈等物質的相互作用，發現羰基和胺基加成形成中間體后脫水形成雙鍵，如能形成共軛體系將脫氫形成稠環共軛化合物［3］。過氧化氫異丙苯(CHP)是重要的工業原料，可由異丙苯和溴苯催化合成，反應體系有原料、催化劑、產物和副產物，合成過程需進行跟蹤分析，一般的分析化學方法很難達到要求。向瑞禮等用HPLC測定CHP的合成反應混合物體系，能快速觀察到各物質的變化［4］。HPLC能對藥物合成進行在線實時監控，這是化學分析很難達不到的。

1.2 檢測組分含量 分析合成產物以及雜質的含量也是HPLC的重要用途。張惠等采用反相HPLC對雙酚芴的粗產品和精制后的產品進行分析，采用外標法定量獲得了滿意的結果［5］。狄斌等運用反相HPLC及TLC對伊立替康樣品中有關物質的組成成分進行研究，確證樣品中的主要雜質為SN-38和伊立替康羥酸［6］。吳璟等建立了一種用HPLC直接測定2，4-二氯喹唑啉含量的方法［7］。范宗良等建立了異佛爾酮合成產物的HPLC分析法［8］。

2 HPLC與傳統方法比較

TLC、柱色譜等屬于傳統分析，HPLC、質譜等屬于儀器分析。后者在精密性、連續性、重現性等方面有著前者達不到的優點，后者的主要缺點是不靈活，須按固定程序操作，更改條件比傳統方法繁瑣，同時，成本高，先期投入大、人員培訓周期長、運行維護的人力、物力費用高。相反，這些正是傳統分析的優點。定量分析多組分有機混合物或在有標準品的情況下確定未知物時，HPLC比TLC準確度更高、重現性更好。原理上HPLC與經典液相色譜沒有本質差別，其特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相。相比氣相色譜，HPLC優點在于分離后樣品不被破壞，可以收集或制備單一組分。

3 總結

HPLC對反應監測和含量分析等至關重要，制備液相更擴大了HPLC在藥物合成中的應用范圍。隨著固定相的發展，HPLC有可能成為解決藥物合成分析問題最有效的方法。

［1］張玉奎，張維冰，鄒漢法.分析化學手冊.第六分冊，液相色譜分析.化學工業出版社，2000:126.

［2］單繼宏，寧桂玲，李新成，等.反相高效液相色譜法在合成四苯基銀橋聯吡喃鹽中的應用;分析科學學報，2003，19(6):531-533.

［3］陶建清，孫沖，張利民，等;電噴霧質譜法和高效液相色譜法對dpq、ttd 合成機理探討;應用化學，2005，22(11):1234-1238.

［4］向瑞禮，祝曉紅，匡德中;高效液相色譜法檢測合成反應產物過氧化氫異丙苯;廣西化工，2000(S1):109-110.

［5］張惠，呂宏飛，劉傳玉，等;反相高效液相色譜法測定合成產物中的雙酚芴;色譜，2007，25(3):445-446.

［6］狄斌，馮芳，于立潔，等;抗癌新藥伊立替康有關物質的研究;中國藥科大學學報，1999，30(3):196-198.

［7］吳碌，何堅剛;高效液相色譜法測定出口抗癌新藥中間體2，4-二氯喹唑啉;海峽藥學，2007，19(10):70-71.

［8］范宗良，董宇航，李貴賢，等;異佛爾酮合成產物的高效液相色譜法分析;分析儀器，2008(6):30-31.

223300江蘇省淮陰衛生高等職業技術學校