關(guān)于絲裂霉素制備急性皮膚潰瘍模型的研究*

張玨 指導 周健洪

（廣州中醫(yī)藥大學，廣東廣州510006）

抗癌藥若發(fā)生意外滲漏，常導致局部潰瘍、壞死，甚至造成肢體功能障礙，尤以絲裂霉素C等一類阻斷細胞DNA復制的抗癌藥為多見［1］。絲裂霉素由鏈霉菌提取，化學結(jié)構(gòu)具有苯醌、乙酰亞胺基及氨甲酰3個活性基團，作用與烷化劑相似，與DNA鏈形成交聯(lián)，抑制DNA復制，對RNA也有抑制作用。使用時應靜脈注射，溢出血管外可引起組織壞死等不良反應。目前關(guān)于動物急性皮膚潰瘍模型的制作尚無一公認的方法 。為此，本課題組在查閱相關(guān)方法 的基礎(chǔ)上［2］，利用絲裂霉素的藥理作用及不良反應，通過觀察絲裂霉素化學損傷法造模所得豚鼠、新西蘭兔皮膚潰瘍的特點及自然愈合時間，選擇最適合進行急性皮膚潰瘍模型制備的動物，為進一步研究急性潰瘍的發(fā)病機制及治療方法 提供新平臺。

1 材料與方法

1.1 試藥10%水合氯醛、絲裂霉素（批號H33020786，浙江海正藥業(yè)股份有限公司）、利多卡因（批號H32022122，常州康善藥業(yè)有限公司）、0.9%氯化鈉注射液、硫化鈉。

1.2 動物成年豚鼠12只（雌雄各半，體質(zhì)量300～350 g，廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證明NO：0102530），分別標記為1～12號。成年新西蘭兔12只（雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.2 kg，廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證明NO：0102530），分別標記為1～12號。

1.3 模型制備

1.3.1 潰瘍部位的選定豚鼠：在豚鼠背部接近臀部，定為中心點，備皮0.5 cm×0.3 cm區(qū)域，再以中心點為圓心，用硫化鈉褪毛。新西蘭兔：在新西蘭兔大腿接近臀部，定為中心點，備皮半徑為2.5 cm的圓形皮膚區(qū)域，再以中心點為圓心，用硫化鈉褪毛。

1.3.2 造模將1 mg絲裂霉素融入0.5 mL利多卡因及0.5 mL 0.9%氯化鈉注射液中，搖勻，皮下注射于豚鼠大腿圓形標記中心點處，按壓3 min，剪去直徑為1.0 cm的圓形皮膚區(qū)域。同等劑量皮下注射于新西蘭兔大腿圓形標記中心點處，按壓3 min，剪去直徑為1.5 cm的圓形皮膚區(qū)域［2］。

2 結(jié)果

造模第2日，豚鼠的創(chuàng)面迅速壞死，并形成壞死性黑痂（圖1），痂皮附近皮膚微紅，無膿性分泌物；新西蘭兔的創(chuàng)面輕微壞死，無膿性分泌物。造模第4日，豚鼠的創(chuàng)面已干潔，無膿性分泌物，痂皮附近皮膚已無發(fā)紅，潰瘍模型制備失敗；新西蘭兔的創(chuàng)面可見組織壞死，并可見膿性分泌物，壞死組織周圍發(fā)紅，潰瘍模型制備成功。

圖1 豚鼠造模第2日

圖2 新西蘭兔造模第4日

3 討論

3.1 豚鼠造模失敗的原因（1）藥物劑量。12只豚鼠的造模劑量均為絲裂霉素1 mg/只，并未分成高、中、低劑量組，且使用劑量與新西蘭兔相同，考慮可為絲裂霉素使用劑量過高，致使豚鼠創(chuàng)面局部嚴重壞死，無法制備潰瘍模型。（2）造模方式。本實驗僅使用化學損傷一種方法 進行造模，過于單一，可進行多種損傷，如電烙法、手術(shù)取皮法等進行對比研究。

3.2 豚鼠死亡原因豚鼠在實驗期間頻頻出現(xiàn)死亡狀況，嚴重影響實驗的進行。考慮原因如下。（1）豚鼠生性膽小，喜干燥，且自身無法合成維生素C，故對飼養(yǎng)環(huán)境要求很高。（2）絲裂霉素作為一種化療藥物，其不良反應主要為骨髓抑制及胃腸道反應，藥物使用后可使機體免疫力減退，考慮豚鼠死亡也可為造模后免疫力低下，并發(fā)感染所致。

3.3 總結(jié)綜上所述，運用絲裂霉素制備豚鼠潰瘍模型無法形成潰瘍面；且因飼養(yǎng)困難，死亡較多，增補致使造模成本較高，并嚴重影響實驗的準確性與連續(xù)性；相比之下，新西蘭兔潰瘍模型制備過程造模較為簡便規(guī)范，造模的均一性較好，運用絲裂霉素化學損傷法的可控性較高，潰瘍模型3～4 d即可制備完成。可見，新西蘭兔較豚鼠更適于急性皮膚潰瘍的造模。

中醫(yī)瘡瘍劑在急性潰瘍的救治上具有一定療效，相信新西蘭兔作為較為適合制備急性皮膚潰瘍模型的動物，可為進一步研究急性潰瘍的發(fā)病機制及治療方法 提供新平臺。

［1］ 王光華，陳梅，張小謙，等.絲裂霉素C血管外漏致皮膚潰瘍的防護實驗［J］.中華護理雜志，1995，2（30）67-70.

［2］ 蘭海梅，錢江，賴梅生.兔小腿潰瘍模型的建立方法 比較［J］.南方醫(yī)科大學學報，2010，30（1）：103-105.