針刺結(jié)合滌痰湯對急性腦出血大鼠神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)及腦水腫影響的研究*

王桂芳楊超崔海

（1.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院，北京100053；2.中國康復(fù)研究中心，北京100000；3.首都醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院，北京100000）

針刺和方藥結(jié)合治療對腦出血患者的神經(jīng)功能缺損具有很好的恢復(fù)作用。滌痰湯出自《濟(jì)生方》，具有滌痰開竅之功效，其用于治療中風(fēng)病既可以開竅醒神治其標(biāo)，又可以補(bǔ)氣滲濕化痰，使?jié)駸o所聚，痰無所生，以固其本。針刺尤其是頭針治療腦源性疾病效果顯著，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，其對急性腦出血的治療受到越來越廣泛的關(guān)注［1-2］。為了進(jìn)一步探討針?biāo)幗Y(jié)合治療腦出血的作用機(jī)制，筆者動(dòng)態(tài)觀測了針刺結(jié)合滌痰湯對急性腦出血大鼠神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)及腦組織含水量的影響。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量250～280 g，均由首都醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心從北京維通力利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司購得并提供。

1.2 藥物滌痰湯，組方：姜南星、姜半夏各12 g，枳實(shí)、茯苓、石菖蒲、竹茹各10 g，橘紅7.5 g，甘草3 g，飲片，購自北京同仁堂藥店。先煎40 min，再煎30 min，兩煎混合，濃縮為含生藥1.2 g/mL的藥液。

1.3 模型制備雄性SD大鼠用10%的水合氯醛麻醉后，固定于腦立體定向儀上，頭頂剪毛，常規(guī)消毒，矢狀切開頭正中額頂部皮膚，暴露顱骨，以前囟為中心，向后0.2 mm向右旁開2.9 mm，用牙科鉆在顱骨表面鉆孔，用固定在立體定向儀上的微量注射器（5 μL，針頭直徑0.7 mm）沿鉆孔進(jìn)針垂直插入腦組織，深約6 mm（此處為尾狀核位置），緩慢注入含1 U/μL膠原酶的生理鹽水1.2 μL，留針8 min緩慢出針，用牙科水泥封閉顱骨上的鉆孔，縫合切口。假手術(shù)組僅于造模時(shí)向腦內(nèi)注射生理鹽水1.2μL。

1.4 分組與干預(yù)將大鼠分別5組，分組40只。模型組：造模成功后，不給予任何處理。滌痰湯組：造模后每日灌胃滌痰湯2次，每次1 mL。針刺組：造模后固定于實(shí)驗(yàn)架上，取頭頂部相當(dāng)于人體百會(huì)穴，常規(guī)消毒，以28號1寸毫針快速刺入皮下，沿右下方（相當(dāng)于人體曲鬢穴）透刺，進(jìn)針0.8寸，捻轉(zhuǎn)速度為200 r/min，留針30 min，留針期間捻轉(zhuǎn)行針2次。針刺結(jié)合滌痰湯組：針刺方法 同針刺組，藥液灌胃同滌痰湯組。假手術(shù)組：不給予任何處理。干預(yù)時(shí)間72 h。

1.5 大鼠行為學(xué)觀察動(dòng)物模型制作成功后，分別于24、48、72 h時(shí)，以兩種方法 進(jìn)行行為學(xué)評分。（1）Berdenson評分法［3］：0分為無神經(jīng)功能缺損；1分為前肢出現(xiàn)任何屈曲成分（即提尾懸空實(shí)驗(yàn)陽性），不伴其他不正常；2分為一側(cè)推抵抗力下降（即側(cè)向推力實(shí)驗(yàn)陽性），伴前肢屈曲，無轉(zhuǎn)圈行為；3分為同2級行為，伴自發(fā)性旋轉(zhuǎn)即提尾懸空實(shí)驗(yàn)陽性（自由活動(dòng)時(shí)向癱瘓側(cè)劃圈）。神經(jīng)癥狀評分越低提示腦損害越輕，神經(jīng)癥狀評分越高提示腦損害越嚴(yán)重。（2）平衡木行走實(shí)驗(yàn)［4］：測定運(yùn)動(dòng)整合及協(xié)調(diào)能力，平衡木長80 cm，寬2.5 cm，平放在距離地面高10 cm處。按Feeney的記分標(biāo)準(zhǔn)：0分為穿過平衡木，不會(huì)跌倒；1分為穿過平衡木，跌倒機(jī)會(huì)少于50%；2分為穿過平衡木，跌倒機(jī)會(huì)大于50%；3分為能穿過平衡木，但受累的癱瘓側(cè)后肢不能幫助向前移動(dòng)；4分為不能穿過平衡木，但可坐在上面；5分：將大鼠放在平衡木上會(huì)掉下來。

1.6 腦組織含水量測定各組在手術(shù)和治療72 h后，將大鼠麻醉斷頭處死，取出大腦，用干濕法測定相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)腦組織含水量，公式為（腦組織濕重－腦組織干重）/濕重×100%。腦組織用電子天平（精確度為0.1 mg）測濕重后放入（100±5）℃的烤箱內(nèi)烘干24 h后，重復(fù)測定至恒重。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。各項(xiàng)數(shù)據(jù)以（x±s）表示，多個(gè)樣本均數(shù)之間的兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，雙變量的關(guān)系采用直線相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 行為學(xué)評分結(jié)果 見表1～表2。從表1、表2可以看出，24、48、72 h后模型組與滌痰湯組、針刺組、針滌組的Bederson評分及平衡木行走實(shí)驗(yàn)評分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但滌痰湯組、針刺組與針滌組的Bederson評分及平衡木行走實(shí)驗(yàn)評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。滌痰湯組、針刺組、針滌組評分均低于模型組，說明滌痰湯、針刺、針刺結(jié)合滌痰湯對腦出血后大鼠的神經(jīng)行為有較好的改善作用，而滌痰湯、針刺治療與針刺結(jié)合滌痰湯治療在24、48、72 h后對腦出血大鼠的神經(jīng)行為學(xué)影響差異不大。

表1 各組不同時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)Bederson評分比較（分，±s）

表1 各組不同時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)Bederson評分比較（分，±s）

與假手術(shù)組比較，*P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05。下同。

組別n72 h假手術(shù)組80.00±0.00模型組81.52±0.55*滌痰湯組81.11±0.39*△24 h48 h 0.00±0.000.00±0.00 2.92±0.32*2.57±0.49*2.23±0.13*△2.17±0.14*△針刺組81.01±0.52*△2.12±0.23*△2.11±0.24*△針滌組82.11±0.19*△2.16±0.31*△1.00±0.48*△

表2 各組不同時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)平衡木行走實(shí)驗(yàn)評分比較（分，±s）

表2 各組不同時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)平衡木行走實(shí)驗(yàn)評分比較（分，±s）

組別n72 h假手術(shù)組80.00±0.00模型組82.09±0.27*滌痰湯組81.71±0.89*△24 h48 h 0.23±0.100.00±0.00 3.53±0.07*2.81±0.27*2.88±0.97*△2.09±0.21*△針刺組81.69±0.99*△2.98±0.99*△2.00±0.20*△針滌組82.98±0.99*△#2.00±0.20*△#2.00±0.20*△#

2.2 腦組織含水量測定72 h后假手術(shù)組、模型組、滌痰湯組、針刺組、針滌組腦含水量分別為（76.43±0.27）、（80.98±0.43）（79.05±0.29）、（78.15±0.39）、（77.15±0.11）。各治療組腦組織含水量與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；針滌組顯著低于滌痰湯組及針刺組（P＜0.05）。表明滌痰湯、針刺、針刺結(jié)合滌痰湯治療均能夠降低腦出血大鼠的腦水腫程度，其中尤以針刺結(jié)合滌痰湯治療降低腦出血大鼠的腦水腫程度明顯。

3 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為腦出血屬于“中風(fēng)”范疇，其病多在內(nèi)傷積損的基礎(chǔ)上，又因勞逸不當(dāng)，情志不暢，嗜食肥甘等原因，引起臟腑陰陽失調(diào)，氣血逆亂，夾痰夾火，竄行于經(jīng)脈，最終導(dǎo)致腦竅痹阻，心神蒙蔽而發(fā)病；其病因以積損正衰為主，其病機(jī)在虛、火、風(fēng)、痰、氣、血諸端，病性多為本虛標(biāo)實(shí)［5］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為腦出血后，易形成繼發(fā)性腦水腫，顱內(nèi)壓增高進(jìn)而引發(fā)神經(jīng)細(xì)胞的繼發(fā)性損害，這是腦出血預(yù)后不良的主要原因之一。有研究表明，腦出血后行為學(xué)改變能夠反映腦水腫的嚴(yán)重程度和病情的輕重［6］。本研究對72 h腦出血后大鼠行為學(xué)、腦水腫含水量的觀察結(jié)果 與這一論斷相一致。滌痰湯、針刺、針刺結(jié)合滌痰湯在72 h內(nèi)能夠降低腦出血SD大鼠的腦含水量，并且其對腦出血大鼠肢體活動(dòng)狀況以及在其平衡木行走能力都有較好的改善或提高作用。此外有研究表明［7-10］，滌痰湯能夠減少腦組織含水量，降低腦組織TNF-α表達(dá)，阻止細(xì)胞色素C釋入胞漿，減少活化caspase-3的表達(dá)，降低腦組織細(xì)胞凋亡率，促進(jìn)血腫的吸收，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，減輕腦組織受損程度。另有研究也表明［11-12］，頭針對急性腦出血后TNF-α介導(dǎo)的免疫炎性反應(yīng)過程有明顯的抑制作用，減少腦出血大鼠活化TNF-α的表達(dá)，阻止神經(jīng)元的損傷，保護(hù)腦出血后神經(jīng)元免于凋亡。筆者的研究結(jié)果 與以往的研究共同說明和驗(yàn)證了中醫(yī)理論中有關(guān)中風(fēng)病“瘀痰”致病的病機(jī)學(xué)說且針刺結(jié)合滌痰湯對急性腦出血后腦水腫的減輕的程度優(yōu)于單獨(dú)的針刺或服用滌痰湯的治療，為針刺結(jié)合滌痰湯治療腦出血提供了更加直觀或客觀的依據(jù)，說明了其優(yōu)越性的可能機(jī)理。實(shí)驗(yàn)中針刺結(jié)合滌痰湯對腦出血后神經(jīng)行為學(xué)的評分與單獨(dú)針刺、服用滌痰湯治療未見顯著差異，可能與療程有關(guān)，有待今后的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

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